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cicatrização óssea após a aplicação do laser de baixa intensidade em cavidades de extracção enxertadas com material de enxerto e cobertos com um curativo de colágeno reabsorvível: a avaliação histológica piloto

 

Abstract
Fundo
Nosso objetivo foi determinar se a terapia com laser de baixa potência ( LLLT) pode diminuir o tempo entre a extração /enxerto tomada e colocação do implante, pela avaliação das mudanças histológicas em cavidades enxertadas com um material em partículas do enxerto e tratados com LLLT.
Métodos
Trinta pacientes tiveram uma tomada enxertado com um material de enxerto de partículas (MinerOss) coberto com um curativo de colágeno reabsorvível. Os pacientes foram divididos aleatoriamente em dois grupos iguais (n
= 15): grupo de teste recebem tratamento LLLT pós-operatório, e grupo controle sem tratamento a laser no pós-operatório. A avaliação da formação óssea foi realizado em ambos os grupos em intervalos de tempo bem determinado após a cirurgia por meio de análise histostomorphometric.
Resultados
Os resultados histológicos do local tratado com LBI durante 21 dias, colhidas aos 60 dias após o enxerto mostrou a formação de osso novo abundante sem qualquer sinal de inflamação. Os mesmos resultados foram obtidos no grupo de controlo não antes de 120 dias pós-cirurgia.
Conclusões
Pode-se concluir que a LLLT fotobiomodulação pode reduzir o tempo de cura após a enxertia cavidade de extracção. evidência histológica sugere que a nova formação óssea nas órbitas apareceu no prazo de 60 dias após o tratamento LLLT em comparação com um mínimo de 120 dias no grupo de controle.
Palavras-chave
Baixo nível laser terapia de regeneração óssea soquete enxerto Adriana Monea e Gabriela Beresescu contribuiu . igualmente para este trabalho
Uma errata a este artigo podem ser encontradas em http:.. //dx doi org /10. 1186 /s12903-016-0173-4
Fundo <. br> tratamento a laser de baixa intensidade (LBI) tem aumentado em popularidade e é mais freqüentemente utilizado como adjuvante no tratamento em uma várias condições em odontologia.
o processo de regeneração óssea, o que inclui proliferação e diferenciação dos osteoblastos, matriz formação e calcificação, é influenciada por uma série de factores - biomecânico, bioquímica, celular, hormonal e patológico [1]. Tem sido argumentado que a LLLT pode ser solidário no processo de cura, influenciando várias respostas tecido tais como o fluxo de sangue, inflamação, proliferação celular e diferenciação celular [1].
Em doses baixas, a laserterapia tem sido mostrado para aumentar a proliferação celular em vitro em vários tipos de células: fibroblastos [1, 2], queratinócitos [3], células endoteliais [4], osteoblastos [5], linfócitos [6, 7]. LBI estimular os linfócitos, mastócitos activar e proliferação de vários tipos de células, por conseguinte, actua como anti-inflamatório [7]. Stein e colaboradores mostraram que LBI (He-Ne irradiação laser) promove a proliferação e maturação dos seres humanos osteoblastos in vitro [5].
A colocação bem sucedida e integração dos implantes dentários nas cavidades de extracção previamente enxertadas requerem um tempo adequado para a cura e regeneração suficiente do osso. Um número de diferentes estudos mostraram que o tempo de cura de uma cavidade de extracção enxertado com um material de enxerto de partículas pode variar de 4 a 6 meses, dependendo do local do defeito [8, 9, 11]. Uma diminuição no intervalo de tempo entre a extracção /tempo do miocárdio e a colocação do implante seria muito benéfica para os pacientes. A pesquisa experimental tem mostrado diferentes métodos para melhorar a regeneração óssea tais como a estimulação mecânica [10, 11], baixa intensidade de ultra-som [12, 13], fatores de crescimento biológicos [14] e de baixo nível laser terapia [15].
O objetivo neste estudo foi determinar se a laserterapia pode diminuir o tempo entre a extração /enxerto tomada e colocação do implante, pela avaliação das mudanças histológicas em cavidades enxertadas com um material em partículas do enxerto e tratado com LLLT
registro: Trial.. ACTRN12615001013550
Métodos
Trinta e cinco pacientes foram incluídos no estudo. Os critérios de inclusão foram os seguintes: idade acima de 20, não-fumante, sistemicamente saudável, sem tratamento crónico para qualquer doença sistêmica, nenhuma infecção ativa presente no momento da extração. O protocolo do estudo foi aprovado pelo Comitê de Ética da Universidade de Medicina e Farmácia Tirgu Mures, Roménia (n ° 16 /2014/05/29). Todos os pacientes recrutados para o estudo assinaram um consentimento informado.
Todos os pacientes foram recebidas uma extração a-traumático, seguindo o protocolo descrito por Wang et al. [16]. Os seguintes sites de dente foram consideradas enquanto a tomada restante estava intacto: (dentes anteriores, dentes posteriores ou dentes com raízes fundidas) unirradiculados. As razões mais comuns para a extração do dente foram: fratura coronar, profunda decadência, mobilidade dentária que não danificar a tomada de parede após a extração. Foram excluídos os dentes com lesões periapicais. A fim de diminuir a variabilidade dos resultados foram considerados apenas 5 defeitos extração /Wall para este estudo. Dois pacientes com uma parede em falta causada por infecção ou trauma cirúrgico foram retirados do estudo. Apenas áreas de fecho primário ou secundário foram incluídos no estudo. Cada paciente teve uma tomada enxertado com um material em partículas do enxerto (MinerOss, BioHorizons, Canadá) coberto com um curativo absorvível ferida colágeno (CollaPlug, Zimmer Dent - para locais de extracção menores e MemLok, BioHorizons - para locais de extracção maiores), ou na maxila ou na mandíbula (Fig. 1). Três doentes com complicações imediatas após o enxerto, tais como membrana solta, material de enxerto ósseo solto, etc. foram excluídos do estudo. FIG. 1 uma visão pré-operatória não o tratamento de canal no número 1.1, a mobilidade 2+; (B) extração de A-traumático após o protocolo cirúrgico sangramento na cavidade foi obtida com broca esférica ½ e irrigação abundante; (C) Tomada miocárdio com utilização de material de enxerto de partículas molhadas; (D) Tomada de Extração enxertado com enxerto de partículas cobertas com um material de colágeno vestir Colla Plug; (E) de sutura colchão Cruz para estabilizar o material de enxerto; (F) acrílico aleta usado para proteger a ferida e para fins estéticos; (G) Recolha de biópsia de tecido após o período de cura; (H, i) a colocação do implante correto na tomada enxertada após a biópsia de tecido foi coletada a partir de meados de soquete
Todos os pacientes foram pré-medicados com 800 mg Ibuprophen, 2000 mg de Amoxicilina (ou 600 mg de clindamicina em caso de alergia a amoxicilina) e 8 mg dexometasona 1 h antes da extração.
instruções pós-operatórias foram dadas aos pacientes e incluíram a lavagem duas vezes com água morna e sal para as primeiras 2 semanas antes de mudar para com chlorhexadine gluconato de 0,12%, duas vezes por dia, para as próximas 2 semanas . Pós-operatória Ibuprophen 600 mg ou Tylenol foi recomendado para controlar a dor. Os pacientes também receberam dexometasona 6 mg nos dias 1, 4 mg no dia 2 e 2 mg no dia 3 pós-extração. Todos os pacientes foram reconduzidos para a remoção da sutura 10-14 dias pós-extração e enxertia. 2-3 semanas após a operação mostrou que todos os terminais de cura sem complicações com a maior parte da superfície do tecido mole coberta. O processo de cicatrização foi monitorado periodicamente
Os pacientes foram divididos aleatoriamente em dois grupos iguais (n
= 15), segundo o método bloco de randomização:. Grupo de teste recebem tratamento pós-operatório com a fototerapia OsseoPulse, a entrega por parte dos operadores, a uma intensidade de 20 mW /cm 2 durante 20 minutos por dia durante 21 dias consecutivos, e o grupo de controlo sem tratamento com laser de pós-operatório.
A avaliação da formação óssea, foi levada a cabo em ambos os grupos em vários intervalos de tempo após a cirurgia por meio de uma trefina, biopsia de tecido da amostra no seu ponto médio, seguido por uma análise histológica. Todos os pacientes foram agendados para biópsias. A colheita das amostras foram possíveis em todos os pacientes em ambos os grupos. A biópsia no grupo de controle foram colhidas no dia 120, e no grupo de teste foram colhidas no dia 60. O tempo de biópsia foram determinados radiologicamente.
O tratamento realizado foi no melhor interesse dos pacientes. Não biópsias foram tomadas sem colocação imediata de um implante dentário. Se um local pode ser feita a biópsia sem comprometer o sucesso a longo prazo do implante dentário, a biopsia foi levada a cabo tal como descrito acima. Se a situação ditada em contrário (tempo de cura não adequada), o site não foi feita a biópsia até uma data posterior. O bem-estar do paciente foram os principais critérios para o momento biópsia.
As amostras colhidas foram imediatamente colocados em 10% fixador formaldeído, descalcificadas em ácido diaminetetracetic etileno, desidratados em concentrações crescentes de etanol, embebidos em parafina e corte sagital. Os cortes foram corados com hematoxilina-eosina e examinadas ao microscópio (Leitz DM - RBE Microscópio, Leica Wetzlar Alemanha) em diferentes ampliações (X6.3, X10, X25) por um treinado, calibrado e cego para o avaliador grupos
Resultados.
dos 35 pacientes incluídos no estudo, cinco eram drop-out, dois devido a parede faltando causada por trauma cirúrgico e três com complicações imediatas após a enxertia.
no grupo controle, não recebendo biópsias LBI foram colhidas após 120 dias, e um volume total do material enxertado no osso tecido foi notado na avaliação radiográfica (Fig. 2). FIG. 2 A avaliação radiográfica. um na data de extração - Vista pré-operatória; (B) defeito após a extracção; (C) área enxertada com MinerOss e membrana Mem-Lock aos 120 dias de pós-operatório
O diagnóstico do local de biópsia foi interpretado como sendo vital tecido ósseo. O exame histológico revelou que o enxerto volume de negócios - reabsorção e substituição por osso novo -occurred rapidamente com MinerOss esponjoso e fragmentos de ossos corticais. O novo osso não foi uniformemente distribuído por todo o núcleo no entanto a maior parte era histologicamente maduro e as partículas de enxerto foram integrados de modo que era impossível distingui-los do novo osso. f otomicrograf ia de alta potência mostrou que um padrão lamelar de osso maduro tinha formado sobre a superfície e as partículas de rodeado MinerOss (Fig. 3a, b, c). FIG. 3 Biposy tirado de um sujeito de 43 anos no grupo controle (não-tratados com LLLT). um com H & amp; mancha E, originais X6.3 ampliação; (B) H & amp; mancha E, ampliação original X10; (C) H & amp; E mancha, magnificação original X25
avaliação radiográfica mostrou regeneração óssea rápida no grupo teste (Fig. 4). FIG. 4 radiográfica imagina. uma visão pré-operatória, (b) 60 dias após a enxertia; (C) última colocação do implante Online em biópsias do grupo de teste foram colhidas mais cedo, que é de 60 dias após a colocação. As amostras consistiram em fragmentos de tecido conjuntivo fibroso vascular contendo numerosas trabéculas ósseas. Os fragmentos ósseos foram irregulares na forma, algumas das quais foram interpretados para representar a formação de osso reactivo mostrando numerosos osteoblastos e os osteócitos dentro do tecido ósseo. Vários fragmentos de osso laminar vital também estavam presentes. fragmentos ocasionais de osso laminar não vitais estavam presentes. Não há evidência de material de enxerto estava presente. Não foi observada diferença significativa em termos de vascularização do osso regenerar entre os grupos. O diagnóstico do local de biópsia foi interpretado como a formação de osso reactivo (Fig. 5a, b, c). FIG. 5 biópsia feita a partir de um sujeito de 45 anos de idade no grupo de estudo (tratado com LLLT). um com H & amp; mancha E, originais X6.3 ampliação; (B) H & amp; mancha E, ampliação original X10; (C) H & amp; E mancha, discussão original de ampliação X25
Em nosso estudo clínico, os resultados histológicos dos sítios tratados com a LBI durante 21 dias, colhidas aos 60 dias após a enxertia mostrou neoformação óssea abundante sem qualquer sinal de inflamação. Os osteoblastos e os osteócitos estavam presentes no tecido ósseo. Um tecido conjuntivo fibroso vascular também esteve presente em torno do numerosas trabéculas ósseas. A presença de grandes quantidades de fibras de colágeno no grupo de teste pode representar um efeito precoce da LBI na reparação óssea [17]. Uma vez que as fibras de colagénio representam uma parte importante da matriz extracelular do osso, o aumento da quantidade pode ser um indicador do efeito positivo de LBI sobre a regeneração óssea. Pode considerar-se que a grande quantidade do colagénio pode representar um aumento da formação óssea após mineralização da matriz.
Frozanfar [18] demonstra que a terapia laser de baixa intensidade estimula gengival de fibroblastos humanos (HGF3 PI-53) e a proliferação colágeno tipo I expressão gênica in vitro
que está de acordo com os resultados reportados no efeito estimulador da irradiação laser de baixa sobre a proliferação de fibroblastos gengivais in vitro
[19].
Graft amadurece em osso lamelar dentro de um determinado quantidade de tempo para a cura dependendo de parâmetros tais como: a idade do paciente, a capacidade de infecção residual no enxerto e o tamanho do defeito a cura. Geralmente, o período de cicatrização é considerado 4-12 meses. Um estudo anterior [20] sugeriu um período de cura de mais de quatro meses para que o material de enxerto (MinerOss, BioHorizons) para ser resorbe e substituir por um osso maduro do hospedeiro. Melhorar e acelerar a regeneração óssea nos alvéolos enxertadas permitiria a colocação do implante em um intervalo de tempo mais curto e, portanto, diminuir o tempo total do tratamento.
Cicatrização do tecido é um processo complexo que envolve a atividade orgânica local e sistêmica, e fibroblastos são alguns das células directamente envolvidos neste mecanismo. A acção do laser na cura é amplamente utilizado terapêutico por indução de regeneração local e sistémica, efeitos anti-inflamatórios e analgésicos [21, 22]. Estes efeitos foram demonstrados in vitro e in vivo particularmente em estudos que incidem sobre o aumento da microcirculação local, a actividade do sistema linfático, a proliferação das células epiteliais e osteoblastos e o aumento da síntese de colagénio por osteoblastos [23, 24]. Pinheiro et al. [24] sugere que, embora os benefícios de laser na cicatrização dos tecidos moles tem sido demonstrado, os efeitos do laser no osso foram controversos e os estudos estão em conflito.
LBI foi aplicado em culturas de células e em experiências com animais e formação óssea ter demonstrado um efeito positivo sobre a proliferação e diferenciação dos osteoblastos [25, 26]. Um estudo in vitro, realizado por Stein et al. [5], demonstraram que a irradiação laser He-Ne promove a proliferação e maturação de osteoblastos humanos. Um número de estudos também mostram uma influência positiva da irradiação com o laser sobre a cicatrização de feridas [27] e a síntese de colagénio [28]. Além disso, tem sido mostrado LBI inflamação a moderada, estimular a proliferação de células HeLa [29] e a angiogénese [30].
Um número de estudos com animais mostraram que o efeito positivo da LLLT na reparação óssea e regeneração. Pinheiro et al. [17] avaliaram o efeito da LBI (comprimento de onda de 830 nm) no reparo de defeitos ósseos padronizados em fêmur de ratos Wistar Albinus que foram enxertados com osso bovino inorgânico Gen-boi. Os resultados demonstraram a evidência de uma reparação mais avançado no grupo irradiado quando comparado com o grupo não-irradiar. A reparação do grupo irradiado foi caracterizado por ambos aumento da formação óssea e quantidade de fibras de colágeno ao redor do enxerto dentro de 15 dias pós-cirurgia. Como o colagénio é uma parte importante da matriz extracelular óssea o aumento das quantidades de colagénio em alguns espécimes indica um efeito positivo do LBI, mesmo que a quantidade de osso novo era o mesmo em grupos de controlo e tratados. O autor concluiu que LBI teve um efeito positivo sobre a reparação de defeitos ósseos implantados com osso bovino inorgânico.
O primeiro estudo humano foi feito por Brawn et al. [29] quando estudou o efeito de um vermelho e infravermelho (NIR) fototerapia a laser na regeneração óssea. Brawn, nestes locais de extracção bilateral relato de caso foram enxertados com a hidroxiapatita sintética (HA) particulado - OsteografLD300 (Dentsply Friadent CERAMED Lakewood CO), um fototerapia tratada e uma não tratada. A avaliação histológica dos dois locais mostraram um aumento da formação óssea e reabsorção de partícula mais rápida associada com o local de fototerapia tratado comparado com o local não tratado. Em um estudo de caso clínico diferente, Brawn et al. [30] estudaram o efeito de um diodo emissor de luz em um fototerapia seio enxertado com um particulado de bovino material ósseo xenoenxerto. Um curso de 20 mW /cm2 620 nm Light Emitting Diode (LED) fototerapia foi realizada durante um período de 10 minutos duas vezes por dia durante 2 semanas. Após 4 semanas de uma biópsia foi analisada histologicamente e demonstrou uma cura robusta em resposta à fototerapia LED.
Nossos resultados estão de acordo com os de outros autores [31], mas mais pesquisas precisam ser realizadas a fim de identificar o mecanismos exatos da ação LBI sobre a regeneração óssea.
limitação do estudo é que nós não perfome histomorfométrica analisa ainda, o presente estudo beeing uma liminar, e o número reduzido de pacientes. Mais estudos são necessários para sustentar os nossos resultados.
Conclusões
LBI tem a capacidade de reduzir o tempo de cura após a enxertia nas cavidades de extracção. evidência histológica sugere que, em cerca de 60 dias há uma nova formação óssea nas órbitas do grupo de teste em comparação com um mínimo de 120 dias no grupo de controlo. A LLLT tem um efeito positivo sobre biomodulatory reparação óssea enxertado com enxerto de partículas.
Para o futuro, propomos a incluir um grupo controle que receberá apenas LBI sem enxertia socket, desde LBI melhora "de novo" a cicatrização óssea [29 ].
LLLT pode ser considerado são método útil para reduzir o tempo de tratamento oberall entre a colocação de extração-implante. Embora os pacientes precisam visitar a clínica durante 21 dias consecutivos após a cirurgia, com os custos de tratamento adicionais, consideram que o benefício do tratamento LLLT são mais elevados em comparação com os seus esforços. Nossos resultados histológicos sustentam a eficiência do LBI para esta finalidade.
No entanto, mais estudos são necessários para demonstrar o mecanismo exato pelo qual LBI estimula a formação de osso novo.
Notas
Adriana Monea e Gabriela Beresescu contribuíram igualmente para este . trabalho
Uma errata a este artigo podem ser encontradas em http:.. //dx doi org /10. 1186 /s12903-016-0173-4
abreviações
<. dfn> LBI:
Baixo tratamento a laser nível
NIR:
fototerapia a laser infravermelho próximo
HA:
hidroxiapatita
LED:
diodo emissor de luz
Declarações
Agradecimentos
Este artigo foi publicado sob o quadro de social Europeu Encontrado, Desenvolvimento de Recursos humanos Programa Operacional 2007-2013, o projecto n. POSDRU /159 /1,5 /S /136.893.
O estudo foi também realizado no âmbito do quadro da no.1064 bolsa de investigação /2015/01/26 financiado pelo SC COSAMEXT SRL Tirgu-Mures e desenvolvido pela Universidade de Medicina e Farmácia Tg . .Mureş
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concorrentes. interesses
os autores declaram que não têm interesses conflitantes. contribuições
dos autores
AM, SP, GB participaram na concepção do estudo, os procedimentos clinicamente, na análise dos dados e elaboração do manuscrito. MT realizadas análises histológica. DMA realizadas as correções para a versão final do manuscrito. Todos os autores leram e aprovaram o manuscrito final.