endodôntica primária e secundária
Abstract
Para determinar o efeito antibacteriano da terapia fotodinâmica no Enterococcus faecalis (E. faecalis)
biofilmes em experimentalmente infectados canais radiculares humanos em infecções primárias e retratamentos endodônticos.
Métodos
cento e sessenta dentes extraídos unirradiculares com um canal radicular foram preparados utilizando instrumentos ProTaper. Setenta amostras ficaram sem obturação do canal radicular e autoclavado. Os canais radiculares de outros 70 espécimes foram preenchidos com Thermafil e AH Plus e as obturações de canais radiculares foram removidos após 24 horas usando arquivos ProTaper D e plasma esterilizados. Os espécimes foram infectados com um isolado clínico de Enterococcus faecalis
durante 72 horas. As amostras foram tomadas usando pontas de papel estéreis para determinar a presença de E. faecalis
nos canais radiculares. Os espécimes foram divididos aleatoriamente em grupos de acordo com seu tratamento, com 20 dentes cada e um controle. No grupo PDT os dentes foram tratados com PDT, que consiste em o azul de toluidina fotossensibilizador e a fonte de luz a 635 nm PDT. No grupo de NaOCl (hipoclorito de sódio) os canais foram lavadas com 10 mL de 3% de NaOCl. No grupo de NaOCl-TFD os canais foram lavadas com 10 mL de 3% de hipoclorito de sódio e, em seguida, tratada com PDT. As amostras foram tomadas após tratamentos com pontas de papel estéreis. Além disso, mantendo-se material de enchimento do canal radicular foi recuperado das paredes do canal radicular. fracções sobrevivência das amostras foram calculados por contagem de unidades formadoras de colónias. Uma análise de uma via da variância (ANOVA) foi aplicada aos dados para avaliar o efeito de diferentes técnicas de tratamento. Os resultados
tratamento antimicrobiano de canais radiculares causou uma redução significativa da carga bacteriana em todos os grupos. NaOCl irrigação eliminado E. faecalis
mais eficaz. PDT isoladamente foi menos eficaz em comparação com NaOCl irrigação e a combinação de irrigação NaOCl e PDT. níveis de UFC recuperados a partir do material de enchimento depois de NaOCl irrigação dos canais radiculares foram 10FOLD maior em comparação com PDT e da combinação de NaOCl irrigação e PDT.
Conclusões
A terapia fotodinâmica matou E. faecalis
nas infecções endodônticas primárias experimentais e recuou canais radiculares humanos. PDT é um complemento eficaz na desinfecção do canal radicular, especialmente em retratamentos endodônticos.
Palavras-chave
A terapia fotodinâmica PDT fotoativado quimioterapia Fototerapia Laser Root canal de desinfecção infecção endodôntica Enterococcus faecalis eletrônico material suplementar
A versão online deste artigo (doi :. 10 1186 /1472-6831-14-132) contém material suplementar, que está disponível para usuários autorizados
Fundo
um tratamento de canal é a combinação de instrumentação mecânica de um sistema de canais radiculares, o seu. desbridamento químico e enchimento com um material inerte, projetada para manter ou restabelecer a saúde dos tecidos perirradiculares. Embora, microrganismos infectantes são removidos durante o desbridamento mecânico combinado com irrigação químicos, bactérias residuais são facilmente detectáveis em cerca de 50% no tempo de obturação do canal radicular, apesar de irrigação extensiva com hipoclorito de sódio [1]. As bactérias foram encontradas em isthmi, canais laterais, barbatanas, ramificações e estruturas anatômicas, que permanecem inacessíveis para a instrumentação mecânica [2, 3].
Bactérias e toxinas bacterianas que permanecem no sistema de canais radiculares, após o preparo químico-mecânico ou entrar no sistema de canal radicular preenchido via infiltração salivar, o vazamento da restauração coronária ou inadequada canal obturação pode levar à insuficiência [4-7]. doença pós-tratamento associada a tratamento endodôntico pobres pode ser causada como resultado de não usar dique de borracha, falta de acesso resultando em canais perdidas não tratadas de raiz, instrumentação inadequada, desinfecção insuficiente, inadequada obturação do canal radicular ou erros iatrogênica, por exemplo, instrumento fraturado, perfuração, borda [8].
retratamento de canal é considerado mais difícil em comparação com o tratamento do canal da raiz primária, pois há obstáculos normalmente intracanal para superar, por exemplo, remoção de guta-percha, material intracanal, como pontos de prata, postes ou instrumentos fraturados, corrigindo erros de iatrogenias tais como bordas ou perfurações [8]. Estudos anteriores demonstraram que o material de obturação de canais não pode ser completamente removido deixando guta-percha e /ou selador na parede do canal radicular fazer a desinfecção do sistema de canais radiculares mais difícil em relação aos tratamentos endodônticos primários [9-11].
após a remoção de obturação do canal radicular e outros obstáculos intracanal contaminação bacteriana residual tem de ser reduzido a um mínimo para endodontia bem sucedida [12]. Um método preferido é alternada a irrigação utilizando hipoclorito de sódio e um agente quelante, por exemplo ácido cítrico ou o ácido etilenodiaminotetra-acético [13]. compostos de clorexidina e iodo também têm sido defendida como irrigantes adicionais para canal radicular (re) tratamento [14].
fracassos endodônticos estão associados com altas proporções de microrganismos aeróbios e facultativos gram-positivas [15]. Enterococcus feacalis
, que podem ser encontrados em canais radiculares tratados e não tratados, está altamente relacionado com falhas [16]. Pseudomonas
, estafilococos e estreptococos
são também causadores de falhas.
A terapia fotodinâmica (PDT), também conhecida como terapia Fotorradiação, a fototerapia, fotoquimioterapia, ou quimioterapia fotoativados (PACT) é um tratamento médico, que utiliza a activação de um agente de fotossensibilização (fotossensibilizador) por exposição à luz de um comprimento de onda específico na presença de oxigénio [17]. Não há uma transferência de energia do fotossensibilizador activado ao oxigénio disponível, que resulta na formação de espécies de oxigénio tóxicas, tais como o oxigénio singleto e radicais livres. O oxigénio singleto e espécies radicais provocar uma destruição rápida e selectiva de microorganismos. A maioria dos fotossensibilizadores são activados pela luz entre 630 e 700 nm. Os principais fotossensibilizantes encontrados na literatura são Hematoporfirina derivados (620-650 nm), fenotiazina, como azul e azul de metileno toluidina (620-700 nm), cyanine (600-805 nm), fitoterápicos (550-700 nm) e hytalocyanines (660-700 nm) [18-20].
PDT tem sido mostrado para ser uma terapia adjuvante para endodontia convencional para optimizar a redução microbiana em canais radiculares em infecções primárias endodontia [21-23]. Garcez et ai. [24] investigaram o efeito de TFD no retratamento endodontia in vivo. Eles descobriram que a TFD como um adjuvante para endodontia convencional conduz a uma redução significativa da carga bacteriana após a irrigação utilizando hipoclorito de sódio, peróxido de hidrogénio e EDTA e é eficaz contra as bactérias resistentes a múltiplas drogas. Em retratamentos é impossível remover o canal da raiz preenchendo completamente, impedindo a desinfecção do sistema de canais radiculares. Com base nas descobertas anteriores, PDT é suposto ter um efeito antimicrobiano adicional após a irrigação do canal radicular, especialmente sobre os microrganismos resistentes.
O objetivo do presente estudo é investigar o efeito antibacteriano da terapia fotodinâmica (PDT) em Enterococcus faecalis
biofilmes em canais radiculares humanos infectados experimentalmente de infecções endodônticas primárias e secundárias.
Métodos
espécimes de dentes
Para este estudo, foram selecionados cento e sessenta e extraídos dentes permanentes humanos intactos frontais e pré-molares. Dois foram tiradas radiografias de cada amostra, um vestíbulo-lingual /palatina e uma imagem mesial-distal, para garantir que os espécimes tinham câmaras pulpares normais, canais radiculares de patentes e ápices completamente formados sem qualquer sinal de reabsorção. Dentes com obturações de canais radiculares foram excluídos.
Os dentes foram extraídos do Centro de Medicina Dentária do Departamento de Cirurgia Maxilofacial, Centro Médico da Universidade de Freiburg, por causa da dor de dente aguda, complicações inflamatórias graves de doenças sistêmicas, dentro do contexto da ortodôntico tratamento, infecções agudas (abscesso), estado geral de saúde pobre ou, no caso dos dentes do siso, antes de complicações de tratamento ortodôntico. Os pacientes deram o seu consentimento informado por escrito para usar os dentes extraídos para a pesquisa, que foi analisado e aprovado pelo comitê de ética da Universidade de Freiburg (175/13).
Cavidades de acesso padrão foram preparados e o comprimento dos dentes precisa foi determinada por a inserção de um 10 K-arquivo ISO (VDW®, Munique, Alemanha) no canal até que o arquivo foi visível no forame apical. A ponta do arquivo foi então colocado exatamente no forame apical do dente para medir o comprimento do dente. comprimento de trabalho (WL) foi criado 1 mm aquém do comprimento do dente. Os canais foram preparados utilizando instrumentos ProTaper (Dentsply®, Konstanz, Alemanha) de acordo com as instruções do fabricante, em combinação com uma endo Informático (VDW®, Munique, Alemanha) a 250 rpm. Durante a preparação do canal radicular uma solução de hipoclorito de sódio a 3% foi utilizado para irrigação [25]. preparo do canal radicular foi realizada utilizando arquivos que moldam ProTaper S1 e S2 e acabamento arquivos F1 e F2. preparo apical foi realizada terminando com arquivo F2 ProTaper na WL. A ProTaper F2 ponto de guta-percha foi fixado em WL e da região apical foi coberto com composto usando Optibond FL (Kerr Corporation, Orange, CA, EUA) e CeramX mono (Dentsply®, Konstanz, Alemanha) para um selo apical. Os dentes foram embebidos em metacrilato de (Techovit 4070 ™, Haereus Kulzer®, Wernheim, Alemanha) e, em seguida, decoronated utilizando um instrumento de corte rotativo de diamante (6830 L.314.014, Gebr Brasseler GmbH & amp;. Co. KG, Lemgo, Alemanha) a 40.000 rpm na junção cemento-esmalte. Depois de uma irrigação final com hipoclorito de sódio a 3% e 5% de tiossulfato de sódio, os dentes foram posteriormente autoclavado a 134 ° C durante 18 minutos. Para verificar se os canais radiculares eram livres de microrganismos, amostras foram retiradas dos canais radiculares utilizando pontas de papel estéreis ProTaper F2. Os pontos de papel incubadas no canal radicular durante um minuto e, em seguida, transferida para um frasco contendo 750 ml de solução de Ringer estéril, agitada em vórtice durante 30 segundos e 100 uL foram cultivadas numa placa de agar de sangue durante 24 horas. Dentes com uma cultura positiva foram excluídos.
Obturação do canal radicular e retratamento
Os canais radiculares de 70 espécimes foram preenchidas usando um tamanho de 25 Thermafil obturador (Dentsply®, Konstanz, Alemanha) em combinação com um selante à base de resina epóxi (AH Plus, Dentsply®, Konstanz, Alemanha). Para descontaminação os obturadores Thermafil foram incubadas num frasco com uma solução de hipoclorito de sódio a 3% durante 10 min [26]. O cimento foi colocado no terço cervical do canal radicular com um ponto de papel ProTaper F2 estéril. Cada obturador foi aquecido usando um Plus Forno ThermaPrep (Dentsply®, Konstanz, Alemanha), até que um sinal sonoro indica que o obturador estava pronto para a colocação. foi então inserida no canal radicular preparado com um movimento lento, firme e contínua em direção apical. O identificador de cada obturador foi estabilizada durante o resfriamento. O transportador não foi cortado para ser capaz de remover facilmente. 2 radiografias foram tiradas de cada espécime, um vestíbulo-lingual /palatina e uma imagem mesial-distal, para garantir o preenchimento completo do canal radicular.
Após 24 horas, as operadoras foram removidos e a obturação do canal radicular foi removido usando ProTaper D1 e instrumentos D2 até o comprimento de trabalho foi obtida com 5 × ampliação. Após a remoção da obturação de canais 2 radiografias foram tiradas de cada amostra para visualizar o material de preenchimento do canal da raiz remanescente.
Após a remoção da obturação do canal radicular os espécimes foram seccionados longitudinalmente usando um diamante de corte rotativa viu sob pulverização de água. Os espécimes foram esterilizados usando a esterilização de plasma (H
2O 2). Após a esterilização as duas secções dos espécimes foram ligados um ao outro utilizando um adesivo (Heliobond, Ivoclar Vivadent, Ellwangen, Alemanha).
Enterococcus faecalis
infecção
canais foram infectados com um isolado clínico de E. faecalis. E. faecalis
foi cultivada durante a noite em caldo de soja tríptica (TSB) (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, EUA) a 36 ° C em 5 a 10% de CO 2 e syringed no canal da raiz preparado usando uma agulha de calibre 30 de irrigação. Os canais foram infectados com E. faecalis
durante 72 horas para permitir a formação de biofilme. TSB foi trocado a cada 24 horas. Após 72 horas, os canais radiculares foram lavadas com 5 mL de solução de Ringer estéril e uma amostra usando 3 pontos de papel ProTaper F2 estéreis (Dentsply®, Konstanz, Alemanha) para avaliar a presença de E. faecalis
nos canais radiculares. As pontas de papel foram transferidos para 750 ml de solução de Ringer estéril. As amostras foram cultivadas em agar de sangue para determinar a presença de E. faecalis
nos canais radiculares. 10 espécimes que não foram obturados e 10 espécimes com canais radiculares retiraram ficaram sem infecção por E. faecalis
e serviu como grupo de controle.
Após 72 horas foram recolhidas amostras usando pontos de papel e cultivadas em agar de sangue para verificar, de que canais radiculares não-infectados estavam livres de microorganismos.
tratamento antimicrobiana de infecções primárias
Setenta amostras com infecções primárias foram divididas aleatoriamente em três grupos. No primeiro grupo (grupo de PDT), os canais radiculares de 20 espécimes foram tratados usando PDT (PACT200, Cumdente, Tubingen, Alemanha), o qual consiste de uma fonte de luz a 635 nm, em combinação com a Endo fotossensibilizador PACT-fluido, um toluidina solução de azul em 13-15 mg /mL. PACT-Fluid Endo foi trazido para o canal da raiz usando uma agulha de calibre 30. Após 60 segundos de incubação, a Endo PACT-Fluid foi ativado usando a fonte de luz PACT com a ponta Guia PACT Luz Endo, a 100 mW fonte de luz LED a 635 nm. A ponta Guia PACT claro Endo foi regulado de forma a WL quanto possível e activado para 120 segundos de acordo com as instruções do fabricante. Os canais foram enxaguadas com 5 ml de solução de Ringer para remover a solução de Endo-PACT fluido, e amostrado com 3 pontos de papel estéreis ProTaper F2. Os pontos de papel foram transferidos para 750 ul de solução de Ringer estéril, agitada em vórtice durante 30 segundos e 100 uL foram cultivadas numa placa de agar de sangue e as unidades de formação de colónias foram contadas.
No segundo grupo (grupo de NaOCl), 20 canais radiculares foram irrigados com 10 ml de NaOCl a 3% com um caudal de 3-3,5 ml por minuto. NaOCl foi removido por lavagem dos canais radiculares com 2,5 ml de solução de Ringer estéril.
No terceiro grupo, 20 canais foram tratados com hipoclorito de sódio e (grupo NaOCl-TFD) PDT. Os canais foram lavadas com 10 mL de 3% de hipoclorito de sódio, utilizando uma agulha de calibre 30 de irrigação com um caudal de 3-3,5 ml por minuto. hipoclorito de sódio em excesso foi removido por rega com 2,5 ml de solução de Ringer estéril e os canais foram tratados usando o PDT e amostrados de acordo com o protocolo do grupo PDT. No grupo controle, 10 canais radiculares foram lavadas com 10 mL de solução de Ringer.
Tratamento antimicrobiano de infecções secundárias Compra de tratamento antimicrobiano das infecções endodônticas secundárias, 70 espécimes foram divididos aleatoriamente em três grupos. No primeiro grupo (grupo PDT), 20 canais radiculares foram tratados com PDT (PACT, Cumdente, Tübingen, Alemanha) e amostragem de acordo com o tratamento do grupo PDT das infecções primárias.
No segundo grupo (grupo NaOCl) , 20 canais foram irrigados com 10 ml de NaOCl a 3% com um caudal de 3-3,5 ml por minuto. NaOCl foi removido por lavagem dos canais radiculares com 2,5 ml de solução de Ringer estéril.
No terceiro grupo (grupo de NaOCl-PDT), 20 canais radiculares foram lavadas com 10 mL de 3% de hipoclorito de sódio (NaOCl), usando um medidor 30 agulha de irrigação com um caudal de 3-3,5 ml por minuto. NaOCl foi removido por irrigação com 2,5 ml de solução estéril de Ringer e uma amostra foi feita usando 3 pontos de papel estéreis ProTaper F2. Depois canais foram tratados com PDT e amostradas como descrito acima.
No grupo controle, 10 canais radiculares foram lavadas com 10 mL de solução de Ringer.
Depois de amostras de tratamento antimicrobianos foram retirados de todos os espécimes usando 3 estéril ProTaper F2 pontas de papel e transferido para um frasco contendo 750 ml de solução de Ringer estéril para determinar as fracções de sobrevivência.
espécimes foram separados novamente utilizando um bisturi estéril e o restante do canal radicular enchimento nas paredes do canal radicular foi recolhido usando um handfile estéril (VDW ®, Munique, Alemanha) num frasco contendo 5 ml de TSB e cultivadas durante a noite. 100 ul das amostras foram então cultivadas em agar de sangue. frações de sobrevivência das amostras foram calculados pela contagem de unidades formadoras de colónias. microscopia eletrônica
de varredura (MEV)
Para amostras de dentes de exame SEM, foram preparadas amostras de Thermafil guta-percha e AH Plus. Amostras de recém-misturado AH Plus foram criados por 24 horas. amostras de AH Plus e amostras Thermafil foram desinfectados com 70% de etanol. As amostras de dentes foram cortados verticalmente em duas partes usando uma serra de corte de diamante rotativo. secções dente de amostra foram autoclavadas a 134 ° C durante 18 minutos. As seções de dentes de espécimes e amostras de material foram infectados com E. faecalis
em TSB durante 72 horas em lamelas septadas (μ-Slide 8 bem, Ibidi GmbH, Martinsried, Alemanha). As amostras de materiais e amostras de dentes foram divididos em três grupos. Os poços de um grupo não recebe qualquer tratamento antimicrobiano e serviu como controle. No grupo dois espécimes e amostras de material foram tratadas com Endo PACT-Fluid durante 1 minuto e a fonte PACT Luz por 1 minuto. No grupo de três amostras e as amostras de material foram incubadas com 3% de NaOCl durante 1 minuto. Após o tratamento antimicrobiano, os poços foram enxaguados com 1 ml de solução de Ringer estéril. As amostras e as amostras foram fixadas em formaldeído a 8% durante a noite a 4 ° C e desidratados em álcool graduado (30%, 50%, 70%, 80%, 90%, uma vez por duas vezes e em 99,8% durante 1 hora). Em seguida, ponto crítico de secagem (secador de pontos críticos de DPC 030; Bal-Tec, Wallruf, Alemanha) com dióxido de carbono líquido foi realizada de acordo com o procedimento padrão. As amostras foram atomizados com ouro em um 050 coater SCD (Bal-Tec) e examinadas usando um Zeiss Leo 435 VP microscópio eletrônico de varredura (Leo Electron Microscopy Ltd Cooperação Zeiss Leica, Cambridge, Inglaterra) a 10-12 kV.
a análise estatística
uma análise unidireccional de variância (ANOVA) foi aplicada aos dados a fim de avaliar o efeito de diferentes técnicas de tratamento sobre a redução de E. faecalis
em canais radiculares. O nível de significância foi definido para p & lt; 0,05
. Todos os testes estatísticos foram realizados utilizando SSPS (15,0).
Resultados
Efeito de tratamentos antimicrobianos em infecções primárias
A Figura 1 mostra 72 horas biofilme E. faecalis
. A média de E. faecalis
conta antes dos tratamentos antimicrobianos foram 2,32x10 6 UFC /ml. Figura micrografias eletrônicas 1 Digitalização de raiz canal dentina e os materiais de enchimento raiz Thermafil guta-percha e AH Plus colonizado com E. faecalis na ampliação de 5000 ×. Tratamentos com 3% NaOCl ou PDT reduzir drasticamente E. faecalis
na dentina e as superfícies dos materiais de obturação do canal radicular. Foram encontradas algumas células bacterianas em forma normais em guta-percha e AH Plus após os tratamentos. Restante células na dentina após os tratamentos mostraram forma anormal.
Tratamento de canais radiculares com PDT sozinho causou uma redução da carga bacteriana, resultando em uma morte 92,7% de E. faecalis
. Enxaguamento canais radiculares com hipoclorito de 3% de sódio (NaOCl) conseguiu uma redução de 99,9% ea combinação de NaOCl desinfecção e PDT reduziu a viabilidade bacteriana em 99,9%. A irrigação com hipoclorito de sódio a 3% e a combinação da irrigação NaOCl e PDT levou a uma redução significativamente maior de E. faecalis
em comparação com tratamento por PDT sozinho (p & lt; 0,0001). casos após a irrigação com 3% de hipoclorito de sódio, 80% dos canais radiculares foram cultura canais negativos. O tratamento adicional usando PDT aumentaram o número de canais negativos de cultura a 90%. Quando canais radiculares foram tratados com PDT sozinho, 1 out of 20 casos (5%) foi negativo de cultura (Tabela 1) .table 1 Redução de E. faecalis após tratamento antimicrobiano
contaminação com E. faecalis
UFC /ml × 106
tratamento
contaminação após CFU tratamento /ml x 106
Redução de E. faecalis
[%]
Cultura amostras negativas [%]
média
Std Dev
3% NaOCl
PDT
média
Std Dev
primária infection
2.48
2.04
X
-
0.0006
0.0003
99.9a
80
2.22
1.92
-
X
0.16
0.14
92.7b
5
2.13
1.86
X
X
0.0004
0.0003
99.9a
90
Secondary infection
2.24
1.76
X
-
0.0005
0.0001
99.9a
55
2.57
2.21
-
X
0.02
0.04
99.9a
0
2.26
1.58
X
X
0.001
0.001
99.9a
30
Percentagem de amostras negativas de cultura. letras sobrescritas indicam diferenças estatísticas.
Efeito de tratamentos antimicrobianos em infecções secundárias
tratamento antimicrobiano dos canais radiculares retiraram causou uma redução significativa da carga bacteriana nos três grupos, resultando em uma morte 99,9% E. faecalis
(Tabela 1). NaOCl irrigação alcançado canais radiculares cultura negativa em 55% dos casos, enquanto que em dentes tratados com PDT nenhum espécime foi cultura negativa. Para a combinação de irrigação NaOCl e PDT 30% dos casos foram encontrados cultura negativa.
E. faecalis
isolado do material de obturação de canais
A Figura 1 mostra 72 horas E. facealis
biofilme sobre Thermafil guta-percha e AH Plus. Em todos os grupos E. facealis
poderia ser cultivado a partir do material de enchimento isolado recuperado das paredes do canal radicular. Havia quantidades iguais de CFU recuperados de obturação amostras de material com PDT e da combinação de NaOCl irrigação seguido pelo PDT. níveis de UFC recuperados a partir do material de enchimento depois de NaOCl irrigação dos canais radiculares foram cerca de 10FOLD maior em comparação com PDT e da combinação de irrigação NaOCl e PDT.
Discussão
No presente estudo, PDT provoca uma redução da viabilidade bacteriana em tanto infecção endodôntica primária e canais radiculares retiraram infectadas com E. faecalis
. Tratar canais radiculares com hipoclorito de sódio (NaOCl), PDT ou uma combinação de irrigação NaOCl e PDT causado uma redução significativa de E. faecalis
nos canais radiculares. Nos casos de infecções primárias, a combinação de irrigação NaOCl e irrigação PDT NaOCl alcançado o maior número de canais radiculares com cultura negativa (90%), NaOCl irrigação sozinha canais radiculares cultura negativa obtidos em 80%, ao passo que após o tratamento utilizando apenas PDT um espécime foi cultura negativa. Para as infecções secundárias, NaOCl irrigação alcançado o maior número de canais radiculares com cultura negativa, ao passo que após o tratamento com PDT todas as amostras eram cultura-positiva. Garcez et ai. [24] investigaram o efeito de TFD no retratamento endodontia in vivo. Eles descobriram que a TFD como um adjuvante para endodontia convencional conduz a uma redução significativa da carga bacteriana após a irrigação utilizando hipoclorito de sódio, peróxido de hidrogénio e EDTA e é eficaz contra as bactérias resistentes a múltiplas drogas. Com base nestas descobertas, a TFD é suposto ter um efeito antimicrobiano adicional após a irrigação do canal da raiz, especialmente em microrganismos resistentes. Os resultados do presente estudo não pode confirmar estes resultados em casos de retratamentos. Microorganismos pode ser capaz de invadir a dentina e túbulos dentinários cobertos por material de enchimento do canal radicular e pode não ser acessível para os agentes ou componentes PDT desinfecção. Além disso, irrigularities na forma de canais radiculares, as barbatanas e túbulos dentinários poderia limitar a difusão de NaOCl ou o fotossensibilizador, luz e oxigénio. O material de enchimento do canal radicular restantes podem abrigar microorganismos tornando impossível para soluções de irrigação, o fotossensibilizador e a luz para penetrar. A luz emitida pode ser absorvida ou refletida pelo material de enchimento resíduo de canal limita o efeito da PDT. No entanto, no presente estudo o canal radicular isolado material de enchimento mostra menor contaminação com E. faecalis
após o tratamento com PDT e a combinação de irrigação NaOCl e PDT em comparação com NaOCl irrigação. O fotossensibilizador pode ter penetrado nessas áreas de material de enchimento aderente à parede do canal radicular melhor do que NaOCl ou NaOCl é inativado quando ele entra em contato com E. faecalis
ou de seus componentes da estrutura do biofilme-like [27].
A resistência dos microorganismos organizados em biofilmes tem sido descrito anteriormente [28]. Bactérias em camadas profundas do biofilme são mais resistentes devido à limitação de difusão (fotossensibilizador, o oxigénio ou de luz ou o agente de irrigação) através da estrutura orgânica [29]. Além disso, os compostos orgânicos, tais como células mortas ou biofilme matriz extracelular, neutralizar agentes antimicrobianos. Estudos anteriores sugeriram usar PDT como tratamento adjuvante para irrigação no canal de desinfecção root [21-23, 30]. Os autores encontraram protocolos de irrigação com base em hipoclorito de sódio, peróxido de hidrogénio e agentes quelantes, como EDTA, para ser superior no tratamento antimicrobiano endodontia, especialmente em termos de desintegração biofilme. No entanto, Garcez et ai. [30] tem demonstrado um efeito adicional de PDT após o tratamento convencional e encontrou E. faecalis
ser 100-1000 vezes mais sensível à morte mediada por PDT em comparação com as espécies Gram-negativos [31]. O efeito antimicrobiano menor de PDT em comparação com irrigação pode ser explicado por as células mortas e restos celulares que permanecem no canal da raiz, sobre a parede do canal radicular ou podem ainda ser integrados na estrutura-biofilme como neutralizando a morte mediada PDT, de modo que o fotossensibilizador, o oxigênio ea luz pode não alcançar bactérias em camadas profundas. Irrigação remove as células mortas e restos.
No presente estudo, foi utilizado um modelo de infecção monospecies com um isolado clínico de E. faecalis
. E. faecalis
tem sido freqüentemente encontrados em infecções primárias e secundárias mais importante de sistemas de canais radiculares [32, 33]. E. faecalis
tem sido mostrado para ser muito resistente contra agentes desinfectantes e antibióticos [32]. E. faecalis
pode efetivamente ser colonizado, as formas de biofilme nas paredes dos canais radiculares e invade túbulos dentinários [34-36]. Este modelo monoinfecção foi utilizado para reproduzir a mesma estrutura do biofilme-like em cada canal radicular dos espécimes com uma espécie que é conhecido por ser difícil de eliminar, até desbridamento químico-mecânico [32]. No entanto, infecções do canal radicular são frequentemente associados com várias espécies [27, 37]. Um biofilme com várias espécies podem diferir no conteúdo dos microrganismos em cada amostra que possam prejudicar o efeito de desinfecção [27].
Amostras dos canais radiculares foram feitas usando pontas de papel estéreis ProTaper F2. pontas de papel só pode tomar uma parte das bactérias da parede do canal radicular. Este método de amostragem irá subestimar os níveis de CFU nos canais radiculares antes e após o tratamento e não dá o total de E. faecalis
contagens para cada espécime. Uma amostra de cultura negativa não significa um tratamento de canal estéril. Para todas as amostras foram utilizadas pontas de papel ProTaper F2. Estes pontos de papel tem o mesmo tamanho da superfície e se encaixam perfeitamente no canal de raiz preparado para amostragem e este método tem sido utilizado em estudos anteriores [24, 29, 32]. técnicas moleculares, como técnicas de PCR, são muitas vezes utilizados para detectar microrganismos em canais radiculares [37, 38]. Mas no presente estudo, foi importante para diferenciar entre estar (cultivável) e mortos (não cultivável) bactérias. técnicas moleculares teria conduzido a resultados falsos positivos quando restos de células e DNA são deixados no canal radicular após o tratamento antimicrobiano, superestimando a contaminação restante do canal radicular. Esta superestimação teria sido maior para os espécimes tratados com PDT comparado a irrigação, porque a irrigação irá remover uma grande quantidade de células mortas e restos celulares. Portanto, uma segunda amostra foi feita após o tratamento antimicrobiano usando um K-arquivo estéril para eliminar as aparas de dentina da parede do canal radicular. Deste modo, a contaminação remanescente de parede do canal radicular e túbulos dentinários foi avaliada. Isso limita a subestimação da contaminação bacteriana, por amostragem, utilizando cones de papel.
Souza et al. [29] infectado canais radiculares antes de moldar. procedimentos de instrumentação e irrigação causar estresse extra sobre microorganismos e perturbar o biofilme. Tem sido demonstrado que a instrumentação de canais radiculares reduz significativamente as bactérias em canais radiculares [39, 40]. No presente estudo, PDT foi testado em canais radiculares completamente em forma e, no caso de retratamento endodôntico após obturação de canal e remoção da obturação do canal radicular. Este não imita a situação clínica. Estas amostras foram então infectados com um isolado clínico de Enterococcus faecalis
. Dentro de 72 horas após a infecção, E. faecalis
foi capaz de formar uma estrutura de biofilme-like e os efeitos dos diferentes tratamentos antimicrobianos sobre E. faecalis
em canais radiculares pode ser investigado.
Conclusão
PDT reduz E. faecalis
em infecções primárias infectadas e recuou canais radiculares. No entanto, a irrigação com 3% de hipoclorito de sódio é mais eficaz na eliminação de E. faecalis
em comparação com a TFD. PDT foi capaz de eliminar E. faecalis
do restante material obturador de canal na parede do canal radicular de forma mais eficaz em comparação com 3% NaOCl. PDT não é uma alternativa, mas um complemento eficaz na desinfecção do canal radicular, principalmente nos casos de retratamentos. Perturbação do biofilme antes PDT eo uso adjunto de um hipoclorito de sódio com base abordagem convencional permanecem obrigatório.
Declarações
Reconhecimento
agradecer Os autores Dr. Susanne Stampf e Kirstin Vach (Institute of Medical Biometria e Informática Médica Todos os autores leram e aprovaram o manuscrito final.
