-. Por 1,00 g pasta de dente como a quantidade comum por aplicação
Foi, portanto, o objetivo deste estudo para avaliar a eficiência relativa de dois tratamentos de flúor na desmineralização e remineralização do esmalte dental humano em um modelo de ciclagem de pH. microscopia de luz polarizada qualitativa e semi-quantitativa de secções de terra seriadas foi usada para detectar a morfologia das lesões e para avaliar o volume de poro de des- e remineralização. microscopia de luz polarizada foi escolhido como o método para determinar a morfologia dos diferentes lesões, pois permite distinguir entre as diferentes zonas de lesão. Além disso, a extensão das diferentes zonas lesões poderiam ser medido exatamente.
Métodos
Tissue
Vinte e três totalmente impactados terceiros molares humanos foram utilizados de acordo com as instruções de GLP que regem o uso de tecidos humanos. Estes dentes foram seleccionados porque a estrutura de esmalte uniforme sem desafios individuais devido a não exposição à cavidade oral. Imediatamente após a remoção cirúrgica clinicamente indicado que foram cuidadosamente limpos de detritos orgânicos e armazenado em solução salina contendo 0,1% de timol. Nenhum outro tratamento de superfície do esmalte foi aplicado. Os dentes eram de revestida com cera deixando uma janela de 3 × 4 mm no bucal e lingual superfícies lisas e, finalmente, divididos aleatoriamente em 4 grupos (Tab. 1) .table 1 geral experimental projeto
Group
Demineralisation
Remineralization
Teeth
Lesions
N
(controle negativo)
Padronizado
HEC-gel
pH 4,7, 37 ° C
Saline
37 ° C
5
10
P
(controle positivo)
Remin. solução
pH 7,0, 37 ° C
6
12
D1
(experimental)
|
Remin. solução + Denttabs® 1450 ppm
F- pH 7,0, 37 ° C
6
12
D2
(experimental)
|
Remin. solução + Denttabs® 4350 ppm
F- pH 7,0, 37 ° C
6
12
desmineralização /remineralização, pH-Cycling
condições de ciclagem de pH foram escolhidos para criar lesões de esmalte artificiais avançados sobre superfícies lisas naturais. Cada ciclo foi marcada para 3 dias e foi repetido 6 vezes. O período experimental do pH-ciclismo durou, portanto, 18 dias. Depois de desmineralização e remineralização (excepto para o grupo de controlo negativo), os espécimes foram lavados em água destilada para remover o excesso de solução de tratamento de gel. gel de desmineralização continha 1,5 mM de CaCl 2, 0,9 mM de KH 2 PO? 4, KCl 150 mM, tampão de acetato de sódio 0,1 M, acetato de celulose com 30 mm de hydroxyehtyl. O pH foi ajustado para 4,7 e controlada antes e após cada ciclo de 3 dias [6]. Remineralização
soluções eram compostas de CaCl 1,5 mM 2, 0,9 mM de KH 2 PO? 4, e 150 mM cloreto de potássio a pH 7,0, novamente controlada antes e após cada ciclo de 3 dias. a cera
dentes revestidos foram fixadas com fios de metal e cair nas respectivas soluções (Figura 1) e o volume de cada solução foi 100 ml. Estas soluções foram constantemente agitado utilizando um agitador magnético. Todos os ciclos foram executados sob condições climáticas constantes a 37 °. As áreas de janela foram microphotographically controlada antes de ciclagem de pH para descartar amostras com rachaduras de esmalte de arranhões iatrogênicas e para documentar as lesões de manchas brancas artificiais após 18 dias. A Figura 1 de configuração do processo de incubação. Os dentes com revestimento de cera foram fixados aos fios de metal e estavam pendurados nos diferentes meios de incubação. Os meios de incubação foram constantemente agitadas lentamente com um agitador magnético. Os grupos de tratamento
O esquema experimental é apresentado na Tabela 1. O grupo de controlo negativo de 5 N dentes With10 lesões ciclos foram submetidos somente de desmineralização e foi mantida durante os ciclos de remineralização em solução salina. O grupo controle positivo P de 6 dentes com 12 lesões foi remineralizada na solução especificado sem conteúdo de flúor. Os 2 grupos experimentais (D1 e D2) de 6 dentes com 12 lesões cada foram expostos a solução de remineralização contendo Denttabs ® com 1.450 ppm F - (D1) ou Denttabs ® com 4350 ppm F - (D2). Os comprimidos de higiene oral contêm fluoreto proveniente de NaF, e outros ingredientes de acordo com a INCI são hidroxietil celulose microcristalina, sílica hidratada, carbonato de hidrogénio de sódio, laurilsulfato de sódio, ácido ascórbico, estearato de magnésio, aspartame e aroma de hortelã.
Os comprimidos foram suspensos em a solução de remineralização, com uma proporção de um comprimido por 5 ml de solução para simular a biodisponibilidade máxima de fluoreto imediatamente depois de escovar (Naumova et ai., fluoreto biodisponibilidade na saliva após o uso DENTTABS ® em comparação com dentifrício, submetido).
a microscopia de luz polarizada (PLM)
Após a remoção dos revestimentos de cera padronizados micro fotografias de todas as lesões em 10 × ampliação foram tiradas. Antes de processamento ainda mais as raízes foram removidos. Todos os dentes foram, então, desidratados em álcool graduado e embebidas em Technovit 9100 (Kulzer, Weinheim, Alemanha). seções de terra de série foram cortadas com um micrótomo serra (LEICA CM 1900, Leica, Wetzlar, Alemanha), com uma espessura de 80 mm na direção corono-apical. Três secções de terra por dente representando duas proximal e uma área média das lesões foram usadas para a avaliação quantitativa e qualitativa do semi morfologia da lesão.
A avaliação qualitativa das características das zonas de lesão incluiu a homogeneidade da zona superficial e do corpo de a lesão que representa a perda de minerais específicos de área devido à mudança de birrefringência de diferentes volumes de poro imbibited com Technovit 9100. Além disso foi analisada a presença de laminações no corpo da lesão e a zona translúcida detectável.
para a análise quantitativa da extensão das respectivas zonas de lesão de cárie artificial (zona de superfície, do corpo da lesão, zona translúcida) foi medido em mm integração dos seus valores máximos e mínimos e continuando em distâncias iguais ao longo de toda a lesão até 10 medições foram avaliados. Três seções de cada lesão foram selecionadas para as medições. Estatísticas
Como os dados não apresentaram distribuição normal análise estatística foi realizada utilizando o teste não paramétrico Mann-Whitney U e SPSS 14 como programa de computador. A significância foi determinada a p & lt; 0.05.
Resultados
macroscópica aparência Online em todos os 4 grupos após 18 dias experimentais lesões de esmalte cárie como artificiais de diferentes intensidades foram detectados. Nenhuma destas lesões exibiram erosão da superfície, e a morfologia de superfície com 10 × ampliação foi semelhante ao som esmalte em torno das lesões. No entanto, houve uma diferença acentuada do aparecimento de lesões de ponto branco-subsolo. O grupo controle negativo N apresentaram lesões branco-ponto avançado bastante homogénea, enquanto que no grupo controle positivo P as lesões de manchas brancas foram menos homogênea, com alterações de cor. Nos grupos experimentais contraste tanto D1 e D2 resultou em lesões branco-ponto menos intensivos, ea menos desmineralização subsolo perto de manchas brancas não detectáveis foi documentado para D2 (Figura 2). Figura 2 aspecto das lesões experimentais. lesões Branco-ponto no grupo de controle N (a), grupo remineralização P (b), grupo experimental D1 com Denttabs® 1450 ppm de flúor (c) e grupo experimental D2 com Denttabs® 4350 ppm de flúor (d).
Qualitativa avaliação PLM
os aspectos característicos de 3 secções de terra por lesão estão resumidos na Tabela 2. a zona de superfície do corpo e da lesão em grupos D1 e D2 experimentais eram menos homogénea, devido ao volume de poro inferior. Laminações dentro do corpo das lesões foram predominantemente detectada em grupos experimentais D1 e D2. grupo D2 apresentou remineralização parcial ou total, incluindo a laminação e /ou desaparecimento do corpo da lesão (Figura 3) .table 2 qualitativa microscopia de luz polarizada com características de lesões artificiais de esmalte, percentagem de secções seriadas de terra
< col> Grupo
zona de superfície homogênea
corpo da lesão homogênea
Presença de laminações
Detecção de translúcido zona
N
100%
90,0%
-
85,0%
P
100%
87,5%
8,3%
95,8%
D1
83,3%
75,0%
37,0%
100%
D2
70,8%
62,5%
45,8%
100%
Figura 3 micrografias luz polarizada de exemplos morfológicas dos 4 grupos de controle e dentes experimentais. a) Controlo negativo N: zona de superfície homogênea, o corpo desmineralizada da lesão sem laminações; flecha com asterisco = zona de superfície, seta dupla = corpo da lesão. b) Controlo positivo P: Zona superfície homogênea, menor corpo da lesão, zona translúcida detectável; flecha com asterisco = zona de superfície, seta dupla = corpo da lesão. c) Grupo Experimental D1: zona de superfície homogênea, pequeno grupo do corpo da lesão, detectável seta zona translúcida com a zona asterisco = superfície, seta dupla = corpo da lesão. d) Grupo Experimental D2: zona de superfície homogênea, desaparecendo corpo da lesão com laminações, ampla zona translúcida; linha pontilhada com seta esboçado = corpo laminado da lesão, seta = laminações; contornos seta dupla = zona translúcida.
PLM avaliação quantitativa
Os resultados de todas as medições da dimensão da zona de superfície, o corpo da lesão, e da zona translúcida são apresentados na Tabela 3. A zona de superfície grupo N foi significativamente mais prolongada em comparação com todos os outros grupos (p & lt; 0,01). As diferenças na extensão do corpo da lesão foram altamente significativos mostrando a menos desmineralização por grupo D2 com elevado teor de flúor (p & lt; 0,001). A extensão de perda de mineral por lesão e por grupo era de N & gt; P & gt; D1 & gt; D2. A zona translúcida foi mais prolongada no grupo D2 e estatisticamente muito diferente de todos os outros grupos (p & lt; 0,001). Este foi confirmada pelo teste de Kruskal - Wallis (p & lt; 0,001). Os resultados foram os mesmos para a profundidade total de todas as zonas de lesão, assim como para a extensão mínima e máxima. A perda mais mineral foi observado no grupo de controlo negativo N, e a menos perdas no grupo de fluoreto de D2 (N & gt; P & gt; D1 & gt; D2) .table 3 extensão das zonas de lesão em uM nos diferentes grupos
zona de superfície
corpo de lesão
Translucent zone
Group
Median
Mean
STD
Median
Mean
STD
Median
Mean
STD
N
14,2
15,7
5,5
203,5
203,3
40,7
67,8
78,9
30,9
P
10,7
10,9
2,9
135,7
132
20,3
89,2
87,6
18,6
D1
10,7
10,5
3
71,4
72
13,1
75
79,3
22,6
D2
10,7
11,2
5,5
35,7
37,2
13
100
99,4
36,7
Discussão
Estudos anteriores sobre a história natural do esmalte lesões de cárie humanos em dentes decíduos e permanentes, utilizando três características dimensionais de microscopia de luz polarizada têm contribuído para a compreensão da dinâmica da progressão da cárie [7-9]. A mesma metodologia incluindo o 3D-reconstrução de lesões de cárie como artificiais e a avaliação do volume do corpo da lesão foi explorada para testar vários cremes dentais [1] e sob diferentes condições de pH [10]. O tamanho, volume e configuração dessas lesões artificiais diferem grandemente das características típicas de início precoce natural, preso ou lesões progredindo. No entanto, as zonas de lesão em luz polarizada de acordo com Gustafson [11] são os mesmos, e criadas artificialmente cárie como lesões são amplamente utilizados para detectar a regulação da deposição mineral e dissolução [3] e para determinar a eficiência relativa de dentífricos de fluoreto sob condições de ciclismo pH [2].
os dados do presente estudo confirmam os efeitos do flúor na desmineralização e remineralização do esmalte dental humano. Verificou-se que o regime de desmineralização durante 18 dias criado lesões de cárie-avançados como com zonas superficiais homogéneas e elevado volume de poros do corpo da lesão. A medida foi de cerca de 200 uM e diferentes dos dentes de controlo positivo em ciclagem de pH com solução de remineralização padrão com uma profundidade de cerca de 120 uM.
A disponibilidade de fluoreto de 1450 ppm contendo comprimidos de higiene oral na solução de remineralização foi igual a 96 ppm ( um 0,33 g comprimido por 5 ml de solução) o que corresponde à biodisponibilidade de flúor a partir de um 1400 ppm convencional F - dentifrício na saliva imediatamente após a escovação dentária (Naumova et al, biodisponibilidade flúor na saliva após o uso DENTTABS ® comparados. a dentifrício, submetido). A disponibilidade de flúor elevada do 4350 ppm contendo comprimidos de higiene bucal foi de 287 ppm o que novamente simula a biodisponibilidade na saliva após a escovação com Denttabs ®.
Em ambos os grupos experimentais de dentes a perda mineral diminuiu tremendamente e os diferentes medida do corpo da lesão foi altamente significativa. A profundidade da lesão do grupo fluoreto de D1 convencional era de cerca de 70 uM, e o corpo da lesão no grupo de fluoreto de elevada D2 foi ainda menor em torno de 40 pm. A zona translúcida não diferiram em grupos de controlo e no grupo flúor convencional D1. No entanto, esta zona de desmineralização da frente era significativamente mais prolongado do grupo fluoreto de elevada D2 representando principalmente a inibição da desmineralização na parte interior da lesão, em contraste com a absorção de minerais na parte exterior da lesão do esmalte humano. Houve também um aumento acentuado de lâminas em perto de metade de todas as seções. Em contraste, lâminas eram muito raros no grupo remineralização sem flúor, e eles estavam completamente ausentes nos dentes com apenas ciclos de desmineralização. Nas lesões branco-ponto naturais laminações são atribuídas a períodos curtos ou longos duração de desafio cárie diferente [12, 13]. Ten Cate et al. [2] mostraram que a absorção mineral e perda ocorrer em diferentes profundidades no interior das lesões, e eles assumiram que recristalização induzida pelo flúor fez com que os cristais maiores e menos solúvel em ácido. Nossas características de PLM confirmar esta hipótese, e demonstram uma dose-resposta clara. A diferença marcante na estrutura mineral das lesões incipientes artificiais, comparada com a de esmalte som, dá origem ao fenômeno da remineralização e desmineralização simultânea. microrradiográficos estudos quantitativos após a aplicação de uma maior concentração de fluoreto apresentou um aumento na remineralização na lesão externa e uma diminuição na desmineralização na parte interior, que resulta em um aumento significativo no ganho mineral [3]. recentemente tem sido discutido-se que com F elevada externa - níveis, o F - gradiente pode ser mais elevada, conduzindo o fluoreto mais profundamente na lesão avançada, apesar de o F - difusão ser retardado por adsorção e para reacção com cristais de hidroxiapatita [4]. De acordo com estes resultados de concentrações mais elevadas de fluoreto são necessários para prevenir a progressão de lesões de cárie como artificiais. Portanto, a F - biodisponibilidade em fluidos orais simulados pelo desenho do estudo apresentado desempenha um papel significativo no aumento da remineralização de lesões de cárie de esmalte
Conclusão
Em conclusão, remineralização e desmineralização do esmalte avançados humanos cárie-like. As lesões foram encontrados para se beneficiar de concentrações de flúor mais elevadas (4350 ppm em comparação com 1450 ppm) durante o tratamento de higiene oral de comprimidos em um modelo de ciclagem de pH.
Declarações
Agradecimentos
Os autores agradecem a Sra Susanne Haussmann por sua assistência técnica.
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Os autores declaram que não têm interesses conflitantes. Prodentum, Berlim, Alemanha, desde que o DETTABS® para esta investigação, mas não teve mais influência sobre o desenho do estudo. Contribuições
dos autores pg foi responsável por escrever o manuscrito. TK realizou as experiências e as medições. WHA foi responsável pelos estudos morfológicos.
Todos os autores leram e aprovaram a versão final do manuscrito.
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