Abstract
Fundo
O objetivo deste estudo foi comparar a reação do tecido conjuntivo de ratos para materiais de enchimento de duas finais root: branco Agregado Trióxido Mineral ( WMTA) e Diaket.
Métodos Cada um dos materiais foi colocado em tubos de dentina e implantado por via subcutânea no dorso do tecido conjuntivo de ratos albinos Wistar 21. biópsias de tecidos foram coletadas 7, 30 e 60 dias após o procedimento de implante. Os espécimes foram processados e corados com hematoxilina e eosina e examinadas ao microscópio. Depois de determinar o número de células inflamatórias nas secções de cada espécime, as pontuações de reacção inflamatórias foram definidas como se segue: 0; nenhuma ou poucas células inflamatórias (nenhuma reacção), 1; menos de 25 células (reação leve), 2; 25 a 125 células, (reação moderada), e 3; 125 ou mais células (reacção grave). A análise estatística foi realizada utilizando os testes de Kruskal-Wallis e Mann-Whitney.
Resultados Houve diferença estatisticamente significativa no número de células inflamatórias medianas ao longo dos três períodos de teste, com o grau mais grave de inflamação observado no one período -week. Poucos casos de necrose foram observados com WMTA. Diaket exibiu o grau mais severo da inflamação e necrose. Após 30 dias, ambos os materiais provocou reação inflamatória moderada. O período de oito semanas apresentaram o menor grau grave de inflamação em todos os grupos.
Conclusões
Concluiu-se que WMTA exibe uma resposta do tecido mais favorável em comparação com Diaket que induziu reação inflamatória mais grave do que WMTA e de controlo.
Material eletrônico complementar
a versão online deste artigo (doi:. 10 1186 /1472-6831-11-17) contém material suplementar, que está disponível para usuários autorizados
Fundo
a. procedimento cirúrgico periapical geralmente envolve ressecção raiz-end, a preparação e vedação, usando um material de enchimento de raiz-end. Sucesso da cirurgia pode depender da capacidade de vedação do material de enchimento de raiz-end para evitar a entrada de bactérias ou seus derivados, e também sobre a sua capacidade de proporcionar um ambiente favorável para a regeneração e cicatrização dos tecidos perirradiculares [1, 2 ].
agregado trióxido mineral (MTA) foi desenvolvido como um material de enchimento de raiz-end da Universidade Loma Linda, Califórnia, EUA [1]. Os principais compostos neste material são o silicato de tricálcio, aluminato tricálcico, óxido tricálcio e óxido de silicato de [2]. In vivo e in vitro
estudos apoiou o uso potencial deste material como um material de enchimento de raiz-end [3-5]. Investigações anteriores também demonstraram a capacidade de MTA para encorajar a deposição de tecido duro [3, 6, 7], e a sua boa capacidade de vedação em comparação com outros materiais de [3, 8-10]. Além disso, o MTA foi encontrado para ser bem tolerada e biocompatível [11-17], e revelou uma resposta dos tecidos periapicais mais favorável em comparação com amálgama, IRM, e Super EBA [4, 5, 18].
Diaket é um quelato de cálcio reforçado com resina de polivinil-[19]. Inicialmente foi formulado como selante de canal radicular quando misturado na forma de um pó à razão de líquido de 1: 1. Tetsch, em 1986, o primeiro documentada a utilização de Diaket como um material de obturação do canal radicular-fim quando misturado a uma consistência mais espessa [20]. propriedades aceitáveis Diaket demonstrado [21-23]. Ele demonstrou uma vedação superior em comparação ao amálgama [23], um potencial de cura favoráveis em cães [22], e uma melhor resposta de cura em comparação com guta-percha [24].
Ambos Diaket e MTA foram encontrados para promover a regeneração dos tecidos perirradicular . . No entanto, foram consideradas as propriedades de manuseamento de Diaket a ser superiores às do MTA [21]
O objectivo do presente estudo foi o de comparar a reacção do tecido conjuntivo de ratos para os materiais de enchimento de duas extremidade da raiz: branco Trióxido Mineral foram utilizados agregados (WMTA) e Diaket.
Métodos
Vinte e um macho, ratos Wistar albinos 5-6 meses de idade pesando 350 ± 50 g. cuidados com os animais foi realizada de acordo com a Comissão Cuidado e Uso Institucional Animal e do Canadian Council on Animal Care [25, 26]. O protocolo foi aprovado pela Universidade da Jordânia de Ciência e Tecnologia Reitoria de Pesquisa e Animal Care University e do Comitê Use. Os seguintes grupos foram investigadas:
Grupo 1:. O grupo controle (tubos de dentina vazios)
Grupo 2: Branco Agregado Trióxido Mineral (Dentsply, Tulsa Dental, Tulsa, OK, EUA)
Grupo 3:. Diaket , (3 M ESPE AG, Seefeld, Bayern, Alemanha).
tubos de dentina foram preparados a partir de raízes de dente dos dentes humanos enraizadas individuais com um comprimento de 7 mm. Os canais foram ampliada utilizando ProTaper arquivos (Dentsply Maillefer, Ballaigues, Suíça) e brocas Gates Glidden (Dentsply Maillefer, Ballaigues, Suíça) para uma espessura da parede exterior de 0,5-1 mm. O forame apical foram ampliadas em um diâmetro aproximado de 2 mm. Os tubos de dentina foram copiosamente irrigados com hipoclorito de sódio a 3% e 18% de EDTA (ácido etileno-diamina-tetra-acético), (Ultra Dent, EUA), lavou-se com água destilada, depois autoclavada. Para cada animal, foram usadas três tubos, dois como transportadores dos dois materiais testados e um tubo vazio como um controlo.
WMTA foram misturados de acordo com as recomendações do fabricante. Diaket foi misturada a uma consistência (pó a proporção líquido de 2: 1) mais espessa do que as recomendações do fabricante, [21]. Os materiais foram aplicados nos tubos.
Os animais foram anestesiados utilizando um regime que consiste de atropina (0,02-0,05 mg /kg), cloridrato de cetamina (40-87 mg /kg), e cloridrato de xilazina (13/05 mg /kg). As peles dorsais dos animais foram barbeados e desinfectados com solução de iodo a 5%. Duas incisões centímetros de comprimento foram feitas na parte de trás de cada animal, pelo menos 2 cm de distância um do outro, usando um não. 15 lâminas (Aesculap AG & Co. KG, Tutlingen, Alemanha) em uma cabeça a orientação cauda. A pele foi reflectida e espaços subcutâneos foram criados por dissecção romba. Os tubos de dentina foram imediatamente implantados nos espaços. A pele foi fechada com sutura 3/0 seda.
As avaliações foram feitas aos 7, 30 e 60 dias após a implantação cirúrgica. Em cada período de avaliação, 7 animais foram sacrificados com uma overdose de anestésico. A pele dorsal foi rapada e os tubos foram excisadas com o tecido conectivo circundante. Os espécimes excisados foram mantidas em solução de formalina a 10% durante 2 semanas. Após o processamento do tecido e incorporação, foram preparados cortes seriados de 6 mm de espessura e corados com hematoxilina e eosina. Os cortes foram examinados e avaliados utilizando um microscópio de luz (Olympus, U-MDOB BX 40, Olympus Optical Co. LTD, Japão) a 40 ×, × 100 e 400 × ampliações. Para cada material, a soma e a média de células inflamatórias (leucócitos polimorfonucleares (PMNs), células plasmáticas, linfócitos, macrófagos e células gigantes) e fibroblastos foram determinados em dez áreas separadas pelo × 400 de ampliação. O observador cego para a fonte de tecido
Reacções em tecido foram classificados como:. 0, nenhuma ou poucas células inflamatórias (nenhuma reacção); 1, a menos de 25 células (reação moderada); 2, entre 25 e 125 células (reação moderada); e 3, 125 ou mais células (reacção grave), [13, 27, 28]. Necrose e /ou supuração foram categorizados como "sim" ou "não".
Os resultados foram analisados estatisticamente utilizando os testes de Kruskal-Wallis e Mann-Whitney para comparação de gravidade da inflamação em intervalos e de materiais.
Resultados
grupo de controlo Online em amostras obtidas em 7 dias, observou-se o tecido de granulação vascular (Figura 1.a) que era dominada por PMN, células plasmáticas e linfócitos, com algumas células gigantes e macróf agos. tecido de granulação inflamada que tinha crescido para os tubos também foi observado (Figura 1.b). Aos 30 dias, infiltrados de células inflamatórias suaves, dominado principalmente por linfócitos e cápsulas fibrosas finas ao redor dos tubos, foram observados (Figura 1.c). tecido de granulação inflamada também foi notada no interior dos tubos, mas com menos infiltração inflamatória (Figura 1.d). No dia 60, alguns infiltrados inflamatórios de células dispersas foram observados (Figura 1.e), ao lado de um aumento da actividade de fibroblastos e uma cápsula fibrosa mais espessa. Não foi detectada necrose. Figura 1 imagens histológicas de infiltração de células inflamatórias no final de tubos implantados e crescimento interno de tecido de granulação no interior dos tubos em grupos MTA (coloração hematoxilina-eosina) e controle de. (A) altamente vascularizado, moderadamente inflamado tecido de granulação (G) na extremidade do tubo de dentina (D) no grupo de controlo no dia 7; ampliação original × 50. (b) crescimento para dentro de tecido de granulação inflamado (I) para dentro do lúmen do tubo no grupo de controlo no dia 7. Espaço anteriormente ocupado pela extremidade do tubo de dentina é representado por (S); ampliação original × 100. (c) uma cápsula fibrosa fina (FC) em torno do tubo vazio dentina (D) em 30 dias; ampliação original x 200 (d) crescimento para dentro de tecido de granulação inflamado (I) dentro de um tubo vazio dentina (D) em 30 dias; ampliação original × 200. (E) inflamação Muito ligeira observada em alguns casos, o grupo de controlo em 60 dias, em que os linfócitos (L) foram as células predominantes; ampliação original × 400. (f) a angiogénese activa com tecido de granulação inflamado na zona de contacto com MTA em 7 dias. célula gigante com tragado MTA (GM); ampliação original × 200. (g) A necrose na área adjacente ao material MTA (H) em 7 dias; ampliação original × 200. (h) reação inflamatória leve em um espécime do MTA em 30 dias; ampliação original × 400. (i) A supuração (SP) observada na área adjacente ao material MTA (M) no tubo em 30 dias; ampliação original × 50.
Houve diferença estatisticamente significativa na soma de células inflamatórias entre os três períodos de teste para o grupo controle (valor de P & lt; 0,05). O número de células inflamatórias foi significativamente maior para o de 7 dias do que o grupo de 30 dias.
WMTA grupo Online em amostras obtidas em 7 dias, observou-se necrose cercado por angiogénese activa e tecido de granulação moderadamente inflamado (Figura 1. h, g). O infiltrado foi predominou por PMNs, linfócitos, células plasmáticas, macrófagos e células gigantes. reacções inflamatórias semelhantes foram observados no dia 30, que foram caracterizados por necrose e /ou supuração, rodeados por um infiltrado inflamatório moderada (Figura 1.h, i). O aumento da atividade fibroblástica e raras células gigantes e macrófagos também foram detectados (Figura 2.a). A inflamação foi leve no dia 60, e dominado por linfócitos, macrófagos e células gigantes, com um aumento na atividade fibroblástica. Além disso, um material osteóide semelhante foi observada adjacente ao WMTA no dia 60 (Figura 2.b) em uma amostra. Figura 2 histológica imagens de características inflamatórias infiltração de células e reação tecidual no final de tubos implantados em MTA e grupos Diaket (coloração hematoxilina-eosina). (A) Poucas macrófagos e células gigantes (g) observados no grupo de MTA em 30 dias; ampliação original × 400. (b) material de Osteóide-like (OS) observada na área adjacente ao MTA (M) em 60 dias; ampliação original × 100. (c) necrose grave e ampla liquefativa ou supuração (N) na área adjacente à Diaket de material (M) a 7 dias; ampliação original × 100. (d) células gigantes (G) e os macrófagos no tecido conjuntivo adjacente ao Diaket em 30 dias; ampliação original × 200. (E) inflamação suaves observados na área adjacente à Diaket (H) em 60 dias; ampliação original × 100. (f) predominância de linfócitos no grupo Diaket em 60 dias; ampliação original × 50.
uma diferença estatisticamente significativa foi encontrada na soma de células inflamatórias entre os três períodos de teste para este grupo. A maior soma de células inflamatórias foi registado para o grupo de 7 dias e o menor para o grupo de 60 dias. No entanto, foram encontradas diferenças significativas apenas entre o grupo de grupo de 7 dias e 60 dias, e entre o grupo de 30 dias e do grupo de 60 dias.
Diaket grupo Online em cortes obtidos em 7 dias, liquefativa extensa necrose rodeados por tecido de granulação inflamado altamente vascularizado foi detectado (Figura 2.c). As células inflamatórias predominantes foram PMN, células plasmáticas e macrófagos. Aos 30 dias após o implante, a reação inflamatória diminuiu com um aumento de células gigantes e infiltrados de macrófagos (Figura 2.d). No dia 60, a inflamação foi leve a moderada (Figura 2.e), e dominado por linfócitos e células plasmáticas (Figura 2.f). Não foi observada necrose. O aumento da atividade fibroblástica também foi notado, mas não foi tão pronunciado como nos grupos WMTA controle e
Foram observadas diferenças estatisticamente significativas entre a soma de células inflamatórias entre os três períodos de teste. (P & lt; 0,05). A única diferença estatística significativa encontrada foi a observada entre os períodos de 7 dias e 60 dias (P & lt; 0,05), com o período de sete dias, exibindo o valor mais elevado significativo para a soma de células inflamatórias, seguido do 30-dias ., em seguida, os períodos de 60 dias
comparação entre os grupos em 7 dias
Houve diferença estatisticamente significativa (KW = 7,78, p & lt; 0,05) no número de células inflamatórias entre os três grupos. A pontuação média de células inflamatórias no grupo Diaket (pontuação mediana de 2) foi significativamente maior do que no WMTA (mediana 1 ponto) eo grupo controle (pontuação média de 1) grupo (p & lt; 0,05). Necrose foi observada em todas as amostras no grupo Diaket e em três espécimes no grupo WMTA
30 dias
Houve diferenças estatisticamente significativas. (KW = 6,84, p & lt; 0,05) no número de células inflamatórias entre os três grupos . A pontuação média de células inflamatórias no grupo Diaket (pontuação média de 2) foi significativamente mais elevada do que no grupo de controlo (pontuação média de 1), (p & lt; 0,05). Nenhum outro foram encontradas diferenças significativas. Necrose foi observada em apenas um espécime do grupo Diaket e um espécime do grupo WMTA
60 dias
Houve diferenças estatisticamente significativas (KW = 6,43, p & lt; 0,05). No número de células inflamatórias entre os três grupos . As pontuações de células inflamatórias no grupo Diaket (pontuação média de 1) foram significativamente maiores do que no WMTA (pontuação mediana de 0) eo grupo controle (pontuação mediana de 0). A necrose não foi detectada em qualquer amostra obtidos 60 dias após a implantação.
Discussão
A resposta histológica de materiais obturadores implantados no tecido conjuntivo subcutâneo de ratos fornece uma fonte de informação preliminar sobre a sua biocompatibilidade que é relativamente simples e adequado para o teste de rotina de materiais obturadores [29, 30]. Experiências anteriores em testes de implantação envolvidos inserção directa do material testado em tecidos moles de animais de experiência [31, 32]. A desvantagem deste método é que uma relativamente grande área de material estava em contacto com o tecido e, assim, a reacção imediata poderá ser grave. Portanto, o implante do material de teste no interior de um transportador é recomendado [12, 13]. Quando comparado com a aplicação directa do material, este método ajuda a estabilizar o material no lugar, e conseguir uma interface de material de tecido normalizado [13].
Alguns estudos anteriores de silício [30] utilizado, Teflon [29, 31], e polietileno [13, 33]. Neste estudo, foram utilizados tubos de dentina para implantação subcutânea de acordo com outros estudos anteriores, para tornar a investigação mais atual clinicamente relevante [12, 34]. Uma desvantagem do uso de raízes humanos como transportadores é a dificuldade de padronização do tamanho dos tubos. Além disso, uma reacção imunológica a proteínas estranhas pode ocorrer [31]. No entanto, a reação a tubos de dentina vazios estava de acordo com relatórios anteriores que encontraram que os tubos de dentina vazias induzida leve inflamação e formação de cápsula fibrosa [12, 34]. Os tubos de dentina vazios foram utilizados como um controlo para excluir qualquer aumento na contagem de células inflamatórias causadas pela reacção à dentina [7, 12].
Os materiais estudados foram usadas no estado desactivado para mimetizar a situação clínica. WMTA é difícil de manusear, e esta é uma das suas desvantagens, uma vez que tende a manchar e contaminar a área de trabalho. Portanto, atenção meticulosa foi praticado durante a colocação de WMTA nos tubos de dentina. Na situação clínica, WMTA tem de ser manuseado com cuidado para minimizar este problema.
A reação observada no grupo controle foi de acordo com relatórios anteriores [12-14]. Houve uma diminuição contínua significativa na resposta inflamatória acompanhada por um aumento da actividade de fibroblastos. Embora PMNs foram predominantes no 7º dia, eles apresentaram uma contagem média menor em comparação com grupos Diaket e WMTA. Este valor médio diminuiu significativamente aos 30 e 60 dias, o que indica que os tubos vazios dentina pode ter induzida uma reacção inflamatória inicial. A resposta inflamatória a 7 dias pode ser devida aos efeitos tóxicos dos materiais implantados, ou ao trauma produzidos durante a colocação dos tubos, enquanto aos 30 e 60 dias, a resposta inflamatória pode ser atribuída ao efeito cumulativo da toxicidade de os materiais de teste.
a reação tecidual à WMTA foi comparável com os resultados de estudos anteriores [12-14]. resultados de sete dias mostraram uma reação de corpo moderado e estrangeira que diminuiu em 30 dias e diminuiu significativamente em 60 dias, e foi acompanhado por um aumento acentuado na atividade fibroblástica. Isto indica um aumento do processo de reparação e tolerabilidade pelo tecido conjuntivo. Além disso, o material osteóide semelhante observada no dia 60 é um pouco semelhante ao descrito descobertas anteriores de que a formação de calcificação distrófica [13].
Os principais compostos presentes no MTA são o silicato de tricálcio, aluminato tricálcico, óxido tricálcio e óxido de silicato [ ,,,0],2]. Após a reacção com os fluidos do tecido, o óxido de cálcio produz o hidróxido de cálcio. O hidróxido de cálcio será posteriormente dissociadas em Ca
+ e OH -. Os iões hidroxilo difundidos aumentar o pH e promover a alcalinização nos tecidos adjacentes, o que favorece a cicatrização [7]. Além disso, a biocompatibilidade do MTA também foi atribuída à sua propensão para libertar o cálcio, e a sua capacidade para formar hidroxiapatite [35].
Diaket causou uma reacção grave inicial, mas ambos os 30 e 60 dias os resultados mostraram que a reacção inflamatória diminuiu para uma resposta suave a moderada. Estas observações são semelhantes aos resultados de um inquérito anterior [31]. Por outro lado, uma diminuição significativa no valor médio da soma das células inflamatórias no dia 60 foi detectado, acompanhada por um aumento mínimo da actividade de fibroblastos.
Isto pode indicar que Diaket tem uma tendência para induzir inflamatória inicial mais grave e aguda reacção com extensa necrose de liquefação e /ou supuração de WMTA. Aos 30 dias, os grupos WMTA e Diaket demonstrou contagens de células inflamatórias médios comparáveis. A gravidade reação inflamatória diminuiu significativamente no dia 60. Resultados semelhantes foram obtidos em um estudo animal anterior, apesar das diferenças nas metodologias utilizadas em comparação com o inquérito em curso [21].
A resposta inflamatória inicial para Diaket poderia ter sido causado por a libertação inicial possível dos componentes materiais, e quando houve um decréscimo na quantidade destas substâncias lixiviáveis, a inflamação diminuiu em gravidade e o material foi mais tolerados pelos tecidos.
Conclusões em conclusão, o inflamatório inicial resposta causada por WMTA foi mais favorável do que a resposta causada por Diaket. No entanto, com o passar do tempo, houve uma redução acentuada na severidade da resposta inflamatória, e um aumento da actividade de fibroblastos em ambos os materiais. Experimentos adicionais são necessários para confirmar estas observações
abreviações
WMTA:.
trióxido Branco Mineral agregado
EDTA:
etilenodiamino-tetra ácido acético
PMNs:
polimorfonucleares leucócitos
Declarações
Agradecimentos e Financiamento
a pesquisa foi financiada pela deanship pesquisa da Jordan Universidade de Ciência e Tecnologia número de concessão 53/2006.
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Os autores declaram que não têm interesses conflitantes. contribuições
dos autores
AW participaram no desenvolvimento da metodologia da pesquisa, auxiliando na preparação das amostras, elaboração do manuscrito e análise estatística. AM realizou o trabalho experimental, assistiu na redacção do manuscrito e no exame dos espécimes. HH participou no desenvolvimento da metodologia da pesquisa, e foi preparado e examinado os espécimes. Todos os autores leram e aprovaram o manuscrito final
