Abstract
Fundo
O objetivo deste estudo foi comparar dois marcadores bioquímicos, que foram previamente utilizados para determinar os graus de a destruição do osso alveolar, ao avaliar a gravidade da doença periodontal.
Métodos
o epitopo WF6 do sulfato de condroitina (CS) e da fosfatase alcalina (ALP) foram determinados no fluido gengival amostras (GCF) coletadas de pacientes com vários graus da gravidade da doença, incluindo dez pacientes com gengivite (50 sítios de gengivite) e 33 pacientes com periodontite crônica (incluindo gengivite, leve, moderada e sites de periodontite severa; n
= 50 cada), bem como de dez voluntários saudáveis ( 50 sites saudáveis) por tiras Periopaper. Os níveis de CS e ALP foram medidos por um ensaio ELISA e um ensaio fluorométrico, respectivamente.
Resultados Os resultados demonstraram níveis baixos de CS e ALP em sítios de periodontite não destrutivos e ligeiramente destrutivos, ao passo que níveis significativamente elevados de estes duas biomoléculas foram mostradas em moderadamente e severamente destrutivos locais (p
& lt; 0,05). Embora uma diferença significativa nos níveis de CS foi encontrada entre sítios de periodontite moderada e grave, não houve diferença nos níveis de ALP. correlações mais fortes foram encontradas entre os níveis de CS e parâmetros periodontais, incluindo profundidade de sondagem, perda de nível clínico de inserção, índice gengival e índice de placa, do que entre os níveis de ALP e estes parâmetros.
Conclusões
Sugere-se que o nível de CS é um marcador melhor diagnóstico do que o nível ALP para avaliar a gravidade distinta da periodontite crônica
Palavras-chave
fosfatase alcalina condroitina periodontite crônica gengival material fluido crevicular sulfato eletrônico complementar
a versão online deste artigo (doi:. 10. 1186 /1472-6831-14-107) contém material suplementar, que está disponível para usuários autorizados.
Fundo
Actualmente, o diagnóstico de doenças periodontais e avaliação da sua gravidade são baseados em parâmetros clínicos convencionais e achados radiológicos . No entanto, estes métodos não podem detectar rapidamente perdas de tecido periodontal precoces e são, por conseguinte, insuficiente para determinar os graus de gravidade da doença. Portanto, diferentes tipos de ferramentas adjuvantes são introduzidos na prática clínica e fornecer mais validade para o correto diagnóstico e planejamento de tratamento adequado [1]. Até o presente momento, vários biomarcadores têm sido utilizados para o diagnóstico e avaliação do estado de doença periodontal, bem como a previsão do prognóstico da progressão da doença periodontal por causa da sua sensibilidade e especificidade. Um número de estudos anteriores têm recomendado fluido gengival crevicular (GCF), um exsudado de soro, como uma fonte de biomoléculas de amostragem, a fim de avaliar o estado da doença periodontal [2-4]. GCF constituintes são compostos por mais de 65 componentes que têm sido relatados como possíveis biomarcadores para a progressão da doença periodontal [5]. Estes incluem mediadores inflamatórios e modificadores de resposta de acolhimento [6-8], enzimas derivados do hospedeiro e seus inibidores [9-11] e produtos de degradação do tecido [12-14].
Entre enzimas derivados do hospedeiro, associação positiva entre alcalina fosfatase (ALP) e a actividade da doença periodontal foi relatada anteriormente [15, 16]. Esta glicoproteína ligada à membrana, que funciona como uma enzima hidrolítica de fosfo, é um cálcio e proteína de ligação do fosfato [17]. ALP é libertado a partir de neutrófilos e, portanto, detectados em GCF recolhidas a partir de periodonto inflamada bem como a partir de osteoblastos durante a formação óssea [18, 19]. No que diz respeito aos produtos de degradação de tecidos, diversos estudos investigaram os níveis de proteoglicanos e glicosaminoglicanos seus constituintes (GAGs) nos tecidos periodontais e GCF de pacientes com doença periodontal em comparação com os de controlos saudáveis [20, 21]. Principais GAGs presentes em tecidos periodontais são sulfato de dermatano, ácido hialurônico, sulfato de condroitina (CS) e sulfato de queratam. Uma fonte principal de GAGs em GCF é derivado da degradação da matriz extracelular dos tecidos periodontais durante a progressão da doença periodontal. Por conseguinte, níveis elevados de GAGs detectáveis em GCF reflectir directamente, e estão associadas com a destruição de tecidos periodontais, especialmente osso alveolar, no local doente [22-25]. Além disso, níveis elevados de CS em GCF está aparentemente associada com quatro parâmetros clínicos de condição periodontal, que servem como padrões de ouro para a inflamação periodontal e destruição [14]. Além da doença periodontal, os níveis de CS pode ser detectada com precisão no movimento fisiológico dente [26, 27] e em pacientes com doenças inflamatórias patológicas, como doenças degenerativas conjunta [28, 29].
Apesar de uma série de estudos examinaram a relação de cada marcador bioquímico indivíduo para diferentes tipos e gravidade das doenças periodontais, ainda não existe um estudo que comparou a eficácia dos diferentes marcadores para avaliar a gravidade da doença. Os objetivos deste estudo foram, portanto, para investigar os níveis de CS, conforme determinado pelo nosso anticorpo monoclonal patenteado, levantada contra o epitopo catabólico WF6 de CS [30], e da ALP no GCF obtidos de pacientes com vários estados de doença em comparação com controles saudáveis, e comparar a eficiência desses dois marcadores bioquímicos na avaliação da gravidade das doenças periodontais.
Métodos
participantes
Quarenta e três pacientes, incluindo 10 pacientes com gengivite (5 homens e 5 mulheres) e 33 pacientes com periodontite crônica (16 homens e 17 mulheres) foram recrutados no ambulatório de Periodontology, Faculdade de Odontologia, Universidade de Chiang Mai, juntamente com dez voluntários saudáveis (5 homens e 5 mulheres). consentimento informado por escrito para a participação neste estudo foi obtido de todos os participantes. Eles foram diagnosticados de acordo com a classificação de doenças periodontais pela Academia Americana de Periodontologia (AAP) de 1999 [31]. Os tecidos periodontais de controles saudáveis não apresentaram quaisquer sinais clínicos de inflamação ou destruição, enquanto que os de pacientes com gengivite apresentou sinais clínicos de inflamação gengival e sangramento após sondagem, sem formação de bolsa periodontal. As características clínicas de pacientes com periodontite composta inflamação crônica da gengiva e sangramento e formação de bolsa periodontal de perda óssea alveolar, avaliada pela radiografia. Pacientes e voluntários com doenças sistêmicas subjacentes foram excluídos do estudo de acordo com seu histórico médico obtido a partir de uma entrevista com o dentista na Clínica Oral Diagnóstico da Faculdade de Odontologia, Universidade de Chiang Mai. Os participantes recrutados neste estudo eram não-fumantes e pessoas não grávidas sem tratamento periodontal ou uma história de antibiótico ou NSAID usa dentro de três meses antes da amostragem GCF. A proposta foi aprovada pela Comissão de Human Experimentação da Faculdade de Odontologia, Universidade de Chiang Mai. Seleção do site
cinco locais saudáveis de cada voluntário saudável foram selecionados como grupo saudável (H), enquanto cinco sítios de gengivite de cada paciente com gengivite foram escolhidos como a gengivite grupo (G). Para pacientes com periodontite crônica de um total de 200 sites foram selecionados aleatoriamente e divididos em quatro grupos de acordo com uma perda de inserção clínica (CAL). Cinquenta locais com sinais clínicos de inflamação gengival e sangramento à sondagem, sem perda de inserção foram identificados como sítios de gengivite no grupo periodontite (PG), 50 sites com CAL 1-2 mm foram identificados como ligeira grupo periodontite (PSL), 50 sites com CAL 3-4 mm foram identificados como grupo periodontite moderada (PM), e 50 locais com CAL & gt; 4 mm foram identificados como grupo com periodontite severa (PSE).
Parâmetros periodontais
parâmetros clínicos, incluindo profundidade de sondagem (PD), recessão gengival, CAL, índice de placa (PI) [32] e índice gengival (IG) [ ,,,0],33] foram registados. A recessão gengival e PD foram medidos utilizando uma sonda PCP-UNC15 (Hu-Friedy, Chicago, IL, EUA) a partir de um ponto de referência, a junção cemento-esmalte, e ambos os dados foram então combinadas e relatadas como CAL. Todos os parâmetros foram examinados por um periodontista experiente (S. K.). A calibração intra-examinador foi realizada com 98% e 96% de concordância para PD e CAL, respectivamente.
Coleta de amostras GCF
Uma semana antes da coleta GCF, todos os parâmetros clínicos foram registrados para evitar a contaminação do sangue durante GCF amostragem. A técnica de recolha de GCF foi realizada como descrito anteriormente [14]. O local seleccionado foi isolado com rolos de algodão e gentilmente secos ao ar com uma seringa tripla. Periopaper tiras (ProFlow ™, Amityville, NY, EUA) e um instrumento analítico (Periotron 8000 ™, Oralflow Inc., Plainview, NY, EUA) foram utilizados para recolher e medir os volumes do GCF que variam de 0,04 a 1,76 mL. Todas as amostras foram armazenadas individualmente GCF a -80 ° C para posteriores análises. Para recuperar biomoléculas a partir de tiras Periopaper, adicionou-se uma quantidade de 100 ul de solução salina tamponada com fosfato e em seguida, agitada durante 30 min à temperatura ambiente. O GCF foi recuperado a partir das tiras Periopaper como previamente descrito [14] com a taxa de recuperação de cerca de 98%.
Inibição competitiva de ELISA com anticorpo monoclonal WF6 (mAb)
Para determinar CS (WF6 epitopo) níveis, um ELISA quantitativo método foi realizada utilizando o nosso mAc WF6 como descrito anteriormente [14]. Resumidamente, placas de microtitulação (Maxisorp®, Nunc, Roskilde, Dinamarca) foram revestidas com 10 ug /ml de PG-tubarão
uma fracção (100 ul /poço) [34] em tampão de revestimento (tampão carbonato de sódio 20 mM, pH 9,6) durante a noite à temperatura ambiente. As placas foram então lavadas três vezes com 150 ul /poço de tampão de Tris-incubação (Tris-IB) [34] e secou-se. Cento e cinquenta ul por poço de 1% (w /v) de albumina de soro bovino (BSA) em Tris-IB foi adicionado a todas as placas e, em seguida, incubadas a 37 ° C durante 60 min. Em seguida, 100 ul /poço da mistura, composta por 10 ul de amostras de GCF ou de concorrentes padrão (tubarão PG-A lD l fracção; variando de 39,06 a 10000 ng /ml) em mAb contra o epitopo WF6 de CS (número de patente WO 2005/118645 A1) na diluição 1: 100, foram adicionados, em duplicado, durante 60 min a 37 ° C. Subsequentemente, as placas foram lavadas, e a imunoglobulina específica-IgM conjugado com peroxidase anti-rato (100 ul /poço; 1: 2000) e incubou-se a 37 ° C durante 60 min. As placas foram lavadas e o substrato de peroxidase (100 ul /poço) foi adicionada a 37 ° C durante 20 min para permitir o desenvolvimento da coloração. As reacções foram paradas por adição de 50 ul /poço de 4 H H 2SO 4. A razão de absorvâncias a 492: 690 nm foi medida utilizando um leitor Titertek multipanel Multiskan® MCC /340 (ICN /Flow Laboratories, Costa Mesa, CA, EUA). O nível de detecção mínima de ELISA para CS foi 0,019 ng /ml. A concentração de CS em cada amostra foi normalizada pelo seu volume de GCF, tal como medido por Periotron 8000 ™ [14].
Determinação dos níveis de ALP
As amostras de GCF foram medidos os níveis de fosfatase alcalina utilizando um kit de fosfatase alcalina de detecção (Sigma -Aldrich, St. Louis, MO, EUA) de acordo com as instruções do fabricante. Em resumo, uma quantidade de 180 ul-de tampão de ensaio fluorimétrico foi adicionado à mistura que continha 20 ul de solução de amostra do GCF e 1 ul de solução de substrato de 10 mM (4-metilumbeliferil fosfato dissódico). Em seguida, as misturas foram lidas a 360 nm para o comprimento de onda de excitação e 440 nm para o comprimento de onda de emissão em triplicado usando um Fluorometer (Synergy H4 híbrido Multi-Modo de leitor de microplacas, Biotek®, Winooski, Vermont, EUA). concentrações conhecidas de um controle de ALP (Sigma-Aldrich) foram preparadas com as diluições que variam de 0 a 1000 ng /ml. As concentrações de ALP nas amostras de GCF foram medidos e calculados a partir de uma curva padrão de concentrações conhecidas destes. A concentração de ALP em cada amostra foi normalizada por seu volume GCF, medida pelo Periotron 8000 ™ [14].
Análise estatística
A idade média dos participantes foi comparado entre os grupos pelo t pareado
-teste. As diferenças nos parâmetros clínicos entre os grupos foram analisados por ANOVA one-way, seguido pelo teste de Tukey. O teste de Kolmogorov-Smirnov foram utilizados para determinar a distribuição dos níveis de CS e ALP. As diferenças no CS ou os níveis de ALP entre diferentes gravidades de doença periodontal foram determinados pelo Wilcoxon signed-rank, e as diferenças entre os dois grupos de gravidade foram determinados pelo Mann-Whitney U
-teste. As correlações entre CS ou níveis de ALP e parâmetros clínicos foram determinados pelo coeficiente de correlação de Spearman. Os resultados foram considerados estatisticamente significativos quando p
-Valores foram inferiores a 0,05. Os dados foram analisados utilizando o Statistical Package for Social Sciences versão 17.0 para Windows (SPSS Inc., Chicago, IL, EUA).
Resultados Os dados demográficos e os parâmetros periodontais
As idades médias dos controles saudáveis, os pacientes com gengivite, e pacientes com periodontite crônica, foram 27,80 ± 5,18, 26,5 ± 4,79 e 50,27 ± 9,67 anos, respectivamente. Não houve diferença significativa entre a idade média dos controles saudáveis e que de pacientes com gengivite, enquanto que a média de idade dos pacientes com periodontite crônica foi significativamente maior do que a dos controles saudáveis e do grupo gengivite (p Art & lt; 0,001 ). Todos os quatro parâmetros clínicos são ilustrados na Tabela 1. No que se refere aos parâmetros clínicos de destruição periodontal, não houve diferenças significativas nos valores médios e de DP CAL entre a saudável (H), gengivites (L) e da gengivite em periodontite locais crónica (PG) grupos (Tabela 1). No entanto, em pacientes com periodontite crônica, a média de valores de PD e de CAL nos ligeiramente (PSL), moderadamente (PM), e severamente (PSE) locais destrutivos foram aumentadas progressivamente, a um grau significativamente maior do que os dos locais não destrutivos (p
& lt; 0,05) (Tabela 1). No que diz respeito aos parâmetros clínicos de inflamação periodontal, demonstrou-se que significa GI e PI pontuação dos grupos de partículas e de PSE foram significativamente maiores do que aqueles dos outros grupos (p
& lt; 0,05) (Tabela 1) Uma .table 1 resumo dos quatro parâmetros periodontais (média ± SD) dentro de todos os grupos estudados
parâmetros periodontais
H (n = 50)
G (n = 50)
crônica periodontite
PG (n = 50)
PSL (n = 50)
PM (n = 50)
PSE (n = 50)
PD (mm)
2,60 ± 0.50a
3.00b
2,66 ± 0.48ab
3,90 ± 0.36c
5,32 ± 0.47d
7,28 ± 1.23e
CAL (mm)
0.00a
0.00a
0.00a
1,88 ± 0.33b
3,86 ± 0.78c
7,90 ± 1.45d
GI
0.00a
1.00b
1,02 ± 0.14b
1,08 ± 0.27b
1,54 ± 0.54c
2,26 ± 0.60d
PI
0,66 ± 0.52ab
1,36 ± 1.08c
0,52 ± 0.61a
1,06 ± 0.59bc
1,78 ± 0.74d
2,42 ± 0.67e
letras diferentes de a a e em cada linha representam uma ordem das médias do menor para os mais altos valores e indicam diferenças estatisticamente significativas (p Art & lt; 0,05) entre os grupos estudados, [sítios saudáveis (H); sítios de gengivite (G); sites de gengivite em periodontite crônica (PG); sítios de periodontite ligeiras (PSL); sítios de periodontite moderada (PM); e locais de periodontite severa (PSE)], dentro de cada um dos quatro parâmetros periodontais, incluindo profundidade de sondagem (PD), perda de inserção clínica (CAL), índice gengival (IG) e índice de placa (IP).
Elevated CS e níveis de ALP em locais destrutivos da periodontite crônica
Desde as distribuições de dados de níveis de CS e ALP não eram normais, os valores médios destes níveis e métodos estatísticos não-paramétricos foram utilizados para determinar as diferenças entre os diferentes graus de gravidade da doença. Verificou-se que os níveis medianos CS entre o H (28,35 ng /mL), L (40,70 ng /ml), PG (34,80 ng /ml), e grupos de PSL (45,05 ng /ml) não eram significativamente diferentes, enquanto que aqueles do PM (168,30 ng /mL) e grupos PSE (330,15 ng /mL) foram significativamente mais elevados do que aqueles nos outros quatro grupos (p
& lt; 0,001) (Figura 1). Além disso, uma diferença significativa nos níveis medianos CS entre moderadamente e severamente locais destrutivos (PM vs PSE) foi encontrado (p
& lt; 0,001) (Figura 1). No que diz respeito aos níveis de ALP, não há diferenças significativas entre o H (19,10 ng /mL), L (21 ng /ml), PG (17,40 ng /ml) e grupos de PSL (19,10 ng /ml) foram observados (Figura 2). Em contraste com os níveis de CS, os níveis medianos entre os locais de ALP moderadamente e severamente destrutivas [PM (27,40 ng /mL) versus o grupo de PSE (37,05 ng /ml)], não eram significativamente diferentes, embora uma diferença significativa ainda não foi observada entre -destructive aos locais ligeiramente destrutivos e moderada a grave destrutivos locais (p
& lt; 0,001) (Figura 2). Figura 1 Raised sulfato de condroitina (CS) níveis no fluido gengival de pacientes com periodontite crônica. O y
-axis representa os níveis médios de CS em ng /ml, enquanto o x
-axis representa vários grupos de estados periodontais. H = saudável, G = gengivite, PG = sítios de gengivite em periodontite crônica, PSL = ligeiras sítios com periodontite crônica, PM = moderados sítios com periodontite crônica, PSE = graves sítios com periodontite crônica. Pequenos círculos abertos e pequenas asteriscos são discrepantes e extremos, respectivamente. *** P Art & lt; 0,001.
Figura 2 Níveis elevados de fosfatase alcalina (ALP) em fluido gengival de pacientes com periodontite crônica. O y
-axis representa os níveis médios de ALP em ng /ml, ao passo que o X
-axis representa vários grupos de estados periodontais. H = saudável, G = gengivite, PG = sítios de gengivite em periodontite crônica, PSL = ligeiras sítios com periodontite crônica, PM = moderados sítios com periodontite crônica, PSE = graves sítios com periodontite crônica. Pequenos círculos abertos e pequenas asteriscos são discrepantes e extremos, respectivamente. *** P Art & lt; 0,001.
Fortes correlações observadas entre os níveis de CS e parâmetros periodontais
Correlações entre os níveis de CS ou ALP e quatro parâmetros periodontais, incluindo PD, CAL, GI e PI, foram determinados como mostrado na Figura 3. Verificou-se que o concentrações CS foram significativamente correlacionados com PD e os valores CAL (r
= 0,632 e 0,634, respectivamente, p Art & lt; 0,001) (Figura 3A e B), enquanto os níveis de ALP foram fracamente correlacionadas com estes valores (r
= 0,287 e 0,282, p
& lt; 0,001) (Figura 3E e F), indicando que os níveis de CS foram associados com os graus de destruição dos tecidos periodontais mais do que os níveis de ALP. Além disso, as concentrações de CS foram significativamente correlacionados com os valores de GI e PI (R
= 0,559 e 0,552, respectivamente, p
& lt; 0,001) (Figura 3C e D), ao passo que os níveis de ALP foram ligeiramente correlacionada com estes valores (r
= 0,242 e 0,313, p Art & lt; 0,001) (Figura 3G e H), refletindo que a correlação entre os níveis de CS e os graus de inflamação do tecido periodontal é mais forte do que entre os níveis de ALP ea graus de inflamação. Em suma, estes resultados sugerem que os níveis de CS levantadas em GCF representam os graus de destruição do tecido periodontal e inflamação melhor do que fazer níveis elevados de ALP. Figura 3 significativas e correlações positivas entre os níveis de qualquer sulfato de condroitina (CS) ou fosfatase alcalina (ALP) e quatro parâmetros clínicos. Os níveis de CS em ng /ml (A, B, C, D) ou os níveis de ALP em ng /mL (E, F, G, H) foram associados com quatro parâmetros periodontais, incluindo a profundidade de sondagem (PS), em mm (A e e), perda de nível clínico de inserção (CAL) em mm (B e F), índice gengival (IG; C e G) e índice de placa (PI; D e H). Nota foram encontradas correlações mais fortes entre os níveis de CS e todos os quatro parâmetros clínicos do que entre os níveis de ALP e estes parâmetros.
Discussão
Neste estudo, demonstrou-se que tanto o CS e ALP níveis em GCF coletadas de pacientes com doença periodontal diferente estados foram criados de acordo com a gravidade da destruição periodontal. Níveis baixos, mas detectáveis CS e ALP foram observados no H, G, PG e grupos PSL, enquanto estes níveis foram significativamente elevados nos grupos de MP e PSE quando comparados com os não-destrutivo para grupos com periodontite ligeiramente destrutivos. Curiosamente, foi demonstrada uma diferença significativa em termos de níveis de CS entre os sítios com periodontite crônica moderada e grave, ao passo que não houve diferença significativa nos níveis de ALP. Além disso, os níveis de ambas as biomoléculas foram significativamente correlacionados com todos os quatro parâmetros periodontais, incluindo os graus de destruição periodontal (DP e CAL) e da inflamação (GI e PI), mas correlações mais fortes entre todos os parâmetros e níveis de CS do que entre aqueles e níveis de ALP foram evidentes. O motivo que escolheu para estudar os níveis do GCF de CS e ALP foi porque ele foi previamente demonstrado que níveis elevados destas duas biomoléculas foram intimamente associada com destruição alveolar óssea em periodontite crônica [14, 35], enquanto que níveis elevados de outras biomoléculas, tais como mediadores pró-inflamatórios derivados do hospedeiro e enzimas proteolíticas, pode reflectir a inflamação e destruição aumentada de ambos os tecidos moles e duros periodontais. Portanto, acreditamos que, entre uma série de biomoléculas encontrados dentro GCF, CS e ALP são bons candidatos para este estudo comparativo para avaliar as diferentes gravidades de destruição óssea alveolar em periodontite crônica.
Como previsto, a idade média dos pacientes com doenças crônicas periodontite foi mais do que aqueles com a gengivite e controlos saudáveis, devido à natureza crónica da doença periodontal, o que é causado pela acumulação de placa dentária e inflamação persistente dos tecidos periodontais nas proximidades. No entanto, os níveis de CS e ALP de os sítios de gengivite de pacientes com periodontite crónica (PG) não foram significativamente diferentes dos de ambos os pacientes com gengivite (G) e de indivíduos saudáveis (H), embora a idade do paciente e em voluntários saudáveis em neste estudo não foram correspondidas. Em contraste com a diferença de idade entre as periodontites crônicas e os restantes grupos, a distribuição por sexo não foi diferente entre os grupos de prevenção de erros no desenho do estudo. Além disso, não houve diferenças significativas nos parâmetros clínicos entre os grupos H, G e PG foram encontrados, que tais parâmetros em PSL, grupos PM e PSE foram reforçadas de acordo com a severidade da periodontite.
Em outros relatórios anteriores, os grupos estudados foram principalmente definido como saudável, gengivite e periodontite crônica [13, 35]. No entanto, em nosso estudo, o grupo periodontite crônica foi dividido em subgrupos, incluindo PG, PSL, PM, e PSE, de acordo com a gravidade da doença. Acreditamos que a classificação detalhada da periodontite crônica de acordo com a gravidade da destruição do osso alveolar vai refletir melhor o potencial dos marcadores bioquímicos para distinguir diferentes estados de doenças que podem fornecer informações úteis e ajudar os clínicos no planeamento de tratamento adequado e manutenção periodontal, enquanto que os parâmetros clínicos convencionais não pode [36, 37].
em alguns estudos anteriores, a associação entre ALP ea doença periodontal foi relatado, especialmente em sítios doentes activos [16, 35]. concentrações significativamente mais elevados de ALP foram observadas em periodontite do que em locais saudáveis e gengivite, e correlações positivas dos níveis de ALP com parâmetros clínicos, incluindo PD e GI, foram relatados [16, 38]. Estes achados foram semelhantes aos nossos, e correlações fracas também foram demonstrados tanto nos estudos e nossa. No que diz respeito aos níveis de CS, níveis significativamente mais elevados foram mostrados em locais destrutivos do que em não-destrutivo ou em locais ligeiramente destrutivos, consistente com os resultados de nosso estudo anterior [14]. Curiosamente, apesar de os níveis de ALP foram maiores nos locais destrutivos, não houve diferença significativa nos níveis de ALP entre a destruição moderada e grave. Por outro lado, foi observada uma diferença significativa nos níveis de CS entre destruição moderada e grave, sugerindo que os níveis de CS podem ser melhor utilizados do que os níveis de ALP, para diferenciar a gravidade clínica da periodontite, especialmente entre a destruição periodontal moderada e grave, embora os níveis de ambas as biomoléculas foram elevados no GCF de pacientes com periodontite crónica.
foi demonstrado neste estudo que, ou CS ou níveis de ALP foram positivamente correlacionados com os quatro parâmetros clínicos, que representam destruição periodontal e inflamação. As correlações positivas de elevados níveis de CS e ALP com maior gravidade clínica estão em linha com os resultados de estudos anteriores [14, 17, 35]. No entanto, no presente estudo, todos os quatro correlações entre os parâmetros clínicos e os níveis de CS foram mais fortes do que aquelas entre os parâmetros clínicos e os níveis de ALP, correspondente com a capacidade de níveis CS, mas não os níveis de fosfatase alcalina, para diferenciar entre a destruição periodontal moderada e grave como mencionado acima. Isto pode ser porque CS é derivado apenas do destruição da matriz extracelular hospedeira [39], enquanto que ALP pode ser derivada a partir de ambas as células bacterianas [40] e células hospedeiras [41-43]. Além disso, reconhece-se que o aumento dos níveis de CS são principalmente devido a reabsorção óssea alveolar, enquanto que os níveis elevados de ALP são encontrados para ser implicada no processo de formação de osso [19] Para além de reabsorção do osso em sítios destrutivas [35, 44]. Por último, CS é uma unidade de repetição de dissacárido de GAGs e não deve ser clivada por proteinases GCF, derivadas de ambos os patógenos e células hospedeiras [45], enquanto que a enzima ALP pode ser degradado por proteases durante a armazenagem essas GCF. Há ainda uma limitação do estudo, devido ao seu desenho transversal; Assim, um outro estudo longitudinal é necessário para monitorar quaisquer alterações nos níveis do GCF destas duas biomoléculas durante a progressão da doença periodontal em cada dente individual.
Conclusões
Em resumo, CS é um marcador melhor bioquímica para diferenciar moderada e grave destruição e osso alveolar mostra correlações mais fortes com todos os quatro parâmetros clínicos que ALP. É, portanto, sugerido por todos os resultados deste estudo que a CS é um marcador melhor bioquímica para avaliar a gravidade da doença periodontal do que é ALP.
Declarações
Agradecimentos
Agradecemos ao Fundo Patrimonial Intramural, Faculdade de Odontologia, Universidade de Chiang Mai; o Grant descoberta baseada Desenvolvimento (P-10-11290), Nacional de Ciência e Tecnologia Agência de Desenvolvimento, Ministério da Ciência e Tecnologia; e do Fundo de Investigação Tailândia para S. K. (BRG5680001) pelo apoio financeiro a este estudo. Agradecemos também o Dr. M. Kevin O Carroll, professor emérito da Universidade de Escola de Mississippi de Odontologia, EUA, e Faculdade Consultor da Chiang Mai University Faculdade de Odontologia, Tailândia, por sua leitura crítica deste manuscrito. Autores
' processos apresentados originais para imagens
Abaixo estão os links para os arquivos enviados originais dos autores para imagens. 'arquivo original para a figura 1 12903_2014_438_MOESM2_ESM.tif Autores' 12903_2014_438_MOESM1_ESM.tif Autores arquivo original para a figura 2 12903_2014_438_MOESM3_ESM.tif Autores 'arquivo original para a figura 3 Conflito de interesses
Todos os autores declaram que não têm interesses conflitantes. Autores
' contribuições
SK: Recrutamento de pacientes e voluntários; escolha do local; exame periodontal; GCF amostra coleções. PK: A medição dos níveis de sulfato de condroitina. SO: Medição dos níveis de sulfato de condroitina. PP: A medição dos níveis de fosfatase alcalina. TS: análises estatísticas. DJ: Preparação do manuscrito. SK: Preparação do manuscrito e autor correspondente. Nós gostaríamos de declarar que todos os autores leram e aprovaram a versão final deste manuscrito.
