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Um método substituto para análise de comparação das concentrações salivares de xilitol contendo products

 
da arte abstracta
Fundo
xilitol goma de mascar foi mostrado para reduzir o Streptococcus mutans
níveis e decadência. Dois estudos examinaram o curso presença e tempo de concentrações de xilitol salivares entregues via goma pellet contendo xilitol e comparou-os a outros produtos contendo xilitol.
Methods of a intra-sujeitos projeto foi usado para ambos os estudos. Estudo 1, adultos (N = 15) recebeu três produtos contendo xilitol (goma pellet (2,6 g), ursinhos de goma (2,6 g) e goma vara comercialmente disponível (Koolerz, 3,0 g)); Estudo 2, um segundo grupo de adultos (N = 15) recebeu três produtos contendo xilitol (goma de pellet, ursinhos de goma e um xarope de xilitol 33% (2,67 g). Para ambos os estudos os indivíduos consumiram um produto xilitol por visita com um 7 -dia washout entre cada produto. Um protocolo padronizado foi seguido por cada visita produto. pedido de produto foi determinada aleatoriamente na visita inicial. as amostras de saliva (0,5 ml a 1,0 ml) foram coletadas no início e até 10 pontos de tempo (~ 16 min de comprimento), após o consumo do produto iniciada. a concentração de xilitol em amostras de saliva foi analisado usando cromatografia líquida de alta eficiência. a área sob a curva (AUC) para a determinação da concentração média de xilitol na saliva ao longo do período total de amostragem foi calculada para cada produto.
resultados
Em ambos os estudos os três produtos xilitol (estudo 1: goma de pellet, ursinhos de goma, e pau de goma; estudo 2: goma de pellet, ursinhos de goma e xarope) tinha curvas de tempo semelhantes com dois picos de concentração de xilitol durante o período de amostragem. Estudo 1 teve seus picos mais altos médios no ponto de amostragem 4 min enquanto Estudo 2 teve seus picos mais altos médias entre 13 a 16 minutos. níveis xilitol salivares voltou ao valor inicial em cerca de 18 minutos para que todas as formas testadas. Além disso, para ambos os estudos, a AUC total para os produtos xilitol foram semelhantes em comparação com a goma de pellet (Estudo 1: Goma de pellet - 51,3 μg.min /mL, ursinhos de goma - 59,6 μg.min /mL, e pau de goma - 46,4 ug. min /mL; Estudo 2: goma pellet - 63,0 μg.min /mL, ursinhos de goma - 55,9 μg.min /mL, e xarope de - 59,0 μg.min /mL)
Conclusão
O método de comparação demonstrou alta. Confiabilidade e validade. Em ambos os estudos de outros produtos contendo xilitol tinha curvas de tempo e significa picos de concentração de xilitol semelhantes a goma pellet xilitol sugerindo que este teste pode ser um substituto para estudos mais longos comparando vários produtos.
Peter Milgrom, Kiet A Ly, Marilynn Rothen, Gregory Mueller , Mary K Hagstrom, Ernie Tolentino, lingmei Zhou e Marilyn C Roberts contribuiu igualmente para este trabalho
material suplementar Electrónicas | a versão online deste artigo (doi:.. 10 1186 /1472-6831-8- 5) contém material suplementar, que está disponível para os utilizadores autorizados.
fundo
xilitol, um álcool de açúcar que ocorrem naturalmente actualmente aprovado para utilização em alimentos, medicamentos e produtos de saúde oral em mais do que 35 países já foi mostrado para reduzir cariogénicos bactérias e cárie dentária [1-5]; particularmente entregues por qualquer goma ou pastilha [6]. Nossos estudos anteriores [2, 7] têm relatado sobre a dose minimamente eficaz e frequência de uso do xilitol entregues através de goma de mascar pellet para reduzir Streptococcus mutans
, um patógeno cárie dentária. Pensa-se que o efeito anti-cárie significativa do xilitol é um resultado da supressão constante S. mutans [8] e a alteração na virulência [9] a partir de exposição frequente e crónica para produtos contendo xilitol. Embora goma xilitol mastigação é, novas formas inovadoras eficazes para entregar xilitol em níveis clinicamente eficazes são necessários porque a goma de mascar não é nem seguro, para os muito jovens, nem aceitável, em escolas, em os EUA [6]. No entanto, estudos clínicos repetida a longo prazo dos vários veículos xilitol não são viáveis. Assim, o desenvolvimento de um teste substituto de um sistema de entrega de xilitol é garantido.
Houve dois estudos que examinam os níveis salivares de xilitol após a ingestão de vários produtos contendo xilitol em crianças [10, 11], e nenhum em adultos. Lif Holgerson et al [10] determinou as concentrações de xilitol salivares em crianças (idade média de 11,5 anos) depois de usar uma variedade de produtos contendo xilitol (gomas de mascar, pastilhas, doces, lavar e creme dental com flúor). Todos os produtos foram consumidos numa única sessão com uma breve lavagem com água destilada imediatamente após o consumo e uma lavagem de 10 min entre os produtos xilitol. Parece que a saliva foram coletadas a partir do assoalho da boca com uma pipeta. Isto resultou na recuperação de uma grande quantidade de xilitol no produto, mas o método não tem qualquer fidelidade às condições reais em que a flora oral é exposto ao xilitol. Além disso, não ficou claro se a saliva foi coletada da mesma forma após o consumo do produto xilitol. Os pesquisadores descobriram que os produtos xilitol concentrações elevadas de xilitol salivares entre oito a 16 minutos após o uso do produto xilitol. Tapiainen et al [11], em um segundo estudo, encontraram concentrações xilitol salivares em crianças pré-escolares foram imediatamente elevada após a goma de mascar ou quando um xarope de xilitol foi esguichado na boca com uma seringa, mas eram indetectáveis ​​após 15 minutos. A saliva foi recolhida de uma maneira diferente, dependendo da idade da criança; menores de idade 3 saliva foram coletadas diretamente da boca através de uma pipeta enquanto crianças em idade 4 e cuspiu mais velhos através de um funil em tubos de ensaio. Não está claro como e quando saliva foram coletadas durante a administração de xilitol nessas crianças como o protocolo não é detalhado. Para ambos os estudos, as concentrações de xilitol salivares foram determinadas por ensaio enzimático utilizando um procedimento baseado no poliol desidrogenase (Boehringer Mannheim, Alemanha). O ensaio tem um limite de detecção de aproximadamente 200 ng /mL.
Este artigo descreve um método válido e confiável para comparar as concentrações de xilitol salivares durante o uso da cromatografia líquida de produtos usando um método padronizado e poderosa de análise química contendo xilitol, de alto desempenho (HPLC). HPLC é um método de separação, identificação e quantificação de compostos numa amostra. Ele tem sido usado previamente para medir xilitol e outros álcoois de açúcar na goma e produtos de confeitaria [12, 13]. Para o ensaio de HPLC, o limite inferior de detecção de xilitol, utilizando a curva padrão, é de 0,2 ng /mL. A validade é o grau em que um teste mede com exactidão o fenómeno é desejável tentar medir [14]. Confiabilidade é a medida em que o teste está de acordo, em que o acordo pode ocorrer em dois períodos de tempo (por exemplo, teste-reteste), entre as formas comparáveis ​​do mesmo teste, entre as seções individuais de um teste, ou entre diferentes avaliadores [15- 17]. Dois estudos que tratam o curso presença e tempo de xilitol na saliva entregues através de uma variedade de produtos contendo xilitol são descritos. Este artigo analisa especificamente a presença e evolução no tempo (pico e duração de quantidades detectáveis) das concentrações de xilitol na saliva para a goma de mascar xilitol (de pelotização e vara formas), urso xilitol goma e xarope de xilitol; e compara o xilitol-saliva curva total do curso do tempo (área sob a curva) de goma de mascar xilitol pellet para uma goma vara xilitol disponíveis comercialmente, urso xilitol goma e xarope de xilitol.
Métodos
Design by dois estudos foram realizada utilizando um design intra-sujeitos para cada estudo (ver Figura 1). Figura 1 intra-sujeitos desenho do estudo utilizado para Estudos 1 e 2.
Assuntos Compra de Estudos 1 e 2, sujeitos (N = 15 por estudo) foram recrutados por meio de folhetos publicitários e cartazes na Universidade de Washington, Seattle, campus WA. Potencialmente sujeitos interessados ​​foram convidados para ligar ou enviar e-mail para saber mais sobre o estudo. Os indivíduos foram rastreados usando uma lista de perguntas (por telefone) ou um questionário (por email) para determinar se eles eram elegíveis para participar. Os indivíduos foram excluídos se eles tinham menos de 18 anos de idade, com a saúde debilitada, teve pontes completas ou parciais, tinha implantes, tinha fenilcetonúria, ou produtos xilitol usados ​​regularmente. utilização de xilitol foi determinado por um questionário alimentar que foi desenvolvido e utilizado para os nossos estudos anteriores xilitol e actualizada para estes estudos [2, 7]. O questionário alimentar foi administrado a indivíduos potenciais durante o processo de triagem. xilitol uso regular foi definida como sendo superior a 3 vezes por dia ou por mais do que 3 dias. Estes parâmetros foram estabelecidos porque em nossos estudos xilitol anteriores [2, 7], esta frequência é inferior ao limiar diária eficaz. O Conselho de Revisão Institucional da Universidade de Washington aprovou esses estudos e foi obtido o consentimento informado por escrito dos participantes.
Indivíduos elegíveis foi dada uma data e hora para a sua visita inicial (primeiro) e pediu para se abster de consumir qualquer produto xilitol 24 horas antes da sua visita. Os indivíduos receberam uma lista de produtos para evitar antes de suas visitas de estudo. Os indivíduos também foram convidados a abster-se de comer ou beber (excepto água) 1 h antes da visita.
Procedimentos
Procedimentos Gerais
na fase inicial (primeira) viagem e subseqüentes visitas, foram confirmados os critérios de elegibilidade acima e uma amostra de saliva de base estimulada foi coletada. Assuntos mastigado parafina para 1 minuto (ingerido após as 1 st 30 segundos, depois deixou saliva para acumular durante o 2 nd 30 segundos), cuspir em 50 tubos de pré-rotulados refrigerados cónicas ml e descartou a parafina. Os tubos foram colocados em gelo imediatamente após a recolha. Os indivíduos eram elegíveis para continuar no estudo se eles forneceram pelo menos 1 mL de saliva estimulada no início desta primeira visita. Após a amostra de linha de base foi feita, os sujeitos receberam um total de 3 produtos contendo xilitol. Todos os indivíduos foram testados com cada um dos produtos 3 ao longo de um período de 3 semanas (Ver Estudos 1 e 2). Houve uma lavagem de 7 dias entre cada produto. A ordem dos produtos de xilitol foi determinada aleatoriamente para cada sujeito nesta visita usando um gerador de números aleatórios.
Estudo 1 Estudo Para
1, depois de sujeitos fornecida uma amostra de saliva inicial (descrito acima), eles consumiram um dos três produtos de xilitol (goma xilitol pellet (2,56 g /visita em 3 peças; Fennobon Oy, Karkkila, Finlândia), xilitol goma ursos (2,6 g /visita em 2 partes; Santa Cruz nutricional anteriormente Harmony Foods Corp, CA, EUA), e xilitol pau de goma (3,0 g /visita em 2 partes; Koolerz, Hershey Foods, PA, EUA) e deu amostras de saliva várias vezes ao longo de um período de 15 a 20 minutos amostras de saliva foram tomadas durante estimulada (ao usar o produto xilitol) e não estimulada (. não utilizar o produto) pontos de tempo. em cada ponto de tempo de amostragem, um mínimo de 0,5 mL de saliva foram coletadas.
para a pelota xilitol ou vara xilitol visitas goma, assuntos mastigou a goma e engoliu normalmente, em 1 minuto eles engoliram uma última vez, inclinou a cabeça ligeiramente para a frente, e cuspiu a saliva acumulada no tubo cônico de pré-rotulados 50 mL. Isto foi repetido para os pontos de tempo de amostragem (2, 3, 4 e 5 minutos). Após o ponto de tempo de 5 minutos, a goma foi descartado e assuntos sentou-se calmamente com a cabeça pendurada, tornando mandíbula mínimo e movimentos faciais para permitir que a saliva para acumular. A saliva não estimulada foi coletada em 7, 9, 11, 13 e 15 minutos após o início.
Para a visita urso gummy, assuntos mastigados e engolidos ursinhos de goma (2 ursos) um de cada vez. Imediatamente depois de consumir o primeiro urso gummy, assuntos engoliu uma última vez, inclinou a cabeça ligeiramente para a frente, e cuspiu a saliva acumulada no tubo cônico de pré-rotulados. Assuntos seguido o mesmo procedimento para consumir a segunda urso gomoso. Após o segundo urso gummy, assuntos sentou-se calmamente com a cabeça pendurada, tornando mandíbula mínimo e movimentos faciais para permitir que a saliva para acumular. A saliva não estimulada foi recolhido a 4, 6, 8, 10, 12, 14, e 16 minutos após o início.
Estudo 2
Após sujeitos fornecida uma linha de base de parafina estimulada amostra de saliva na mesma maneira que no Estudo 1, eles consumiram 1 de 3 produtos xilitol (goma xilitol pellet (mesma dose de estudo 1), ursos xilitol goma (mesma dose Estudo 1), e 33% de xarope de xilitol (2,67 g /visita em uma única 8 ml aplicador de dose unitária; fórmula disponível mediante solicitação) e deu amostras de saliva várias vezes ao longo de um período de 15-20 minutos. Como no estudo 1 amostras de saliva foram coletadas com um mínimo de 0,5 mL por amostra.
Consulte o Estudo 1 para os procedimentos de pellet xilitol goma e urso gomoso visitas. Para a visita xarope, sujeitos aplicado aproximadamente metade do xarope a partir do uso de dose única unidade do aplicador em cada lado da boca entre os seus dentes e bochecha. Eles swished o xarope em torno dos seus dentes com a sua língua antes de engolir . Imediatamente depois de consumir o xarope, sujeitos engoliu uma última vez, inclinou sua cabeça para a frente um pouco, e cuspiu a saliva acumulada no tubo cônico de pré-rotulados. Assuntos sentou-se calmamente com a cabeça pendurada, tornando mandíbula mínimo e movimentos faciais para permitir que a saliva para acumular. saliva não estimulada foi recolhido em 2, 4, 6, 8, 10, 12, 14, 16, e 18 minutos.
Para ambos os Estudos 1 e 2, amostras de saliva foram transferidas a partir dos tubos cónicos para tubos de 1,5 ml de Eppendorf e congelado a -20 ° C antes da análise por HPLC. análise de HPLC

cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC) foi usado para analisar as amostras de saliva. As amostras de saliva foram tratados como se segue: 200 mL da amostra de saliva foi adicionado a 50 uL de NaOH a 1 M em um tubo de 1,7 mL Eppendorf estéril. Para isso, 50 mL de Manitol (fonte) a 2 ug /ml foi adicionado a cada amostra para actuar como um padrão interno. As amostras foram agitadas brevemente e em seguida, pipetadas para outro tubo equipado com um filtro de PTFE de 0,45 micron e um frasco de auto-amostrador limpo. Estas amostras foram centrifugadas durante 1 min a 2000 rpm à temperatura ambiente; o eluente foi usado para análise por HPLC de monossacáridos sobre uma coluna CarboMA1 [18 (Dionex Corp., Sunnyvale, CA)], e utilizando as condições listadas abaixo.
um amostrador automático SEC foi usada para injectar 30 mL de amostra durante a separação corre; o tempo de execução para cada separação foi de 20 min. separação por HPLC isocrática de açúcares foi realizada utilizando desgaseificada de NaOH 500 mM como eluente, utilizando uma taxa de fluxo de 0,4 mL /min. Os açúcares foram detectados por um detector amperométrico pulsado com as de alta sensibilidade Modelo 5040 eléctrodos de ouro (ESA Coulochem II) HPLC electroquímica. Em todos os casos, a configuração do pulso era 50, 700 e -800 mV para 500, 540 e 540 ms, respectivamente [19]. Todos os dados de execução foi baixado e analisados ​​utilizando software EZChrom, versão 2.0 (ESA, Chelmsford, MA). Todos os dados de concentração salivar xilitol foram expressos em ug /mL, mas pode ser expressa no sistema internacional (SI) da unidade (mmol /L) (por exemplo, 40 ug /ml = 0,26 mmol /l). Análise de Dados

Todos os dados foram importados para MS Excel e verificado. A concentração média (SD) xilitol para cada ponto de amostragem (Estudos 1 e 2) foi calculado usando SPSS v. 12,02 (SPSS, Chicago, IL). Fiabilidade foi determinado através do cálculo da correlação (momento do produto de Pearson) entre a goma de mascar xilitol (sedimento) e os outros produtos contendo xilitol. Para ambos os estudos aproximação da área sob a curva (AUC, μg.min /ml) para determinar a concentração média de xilitol na saliva ao longo do período total de amostragem foi calculada para cada produto usando SAS /ETS PROC EXPAND (SAS, Cary, NC) e em comparação com a curva de goma de mascar xilitol (pellet) para determinar a validade do método utilizando PROC MIXED (SAS, Cary, NC).
resultados
Estudo 1
no Estudo 1, os três produtos xilitol (goma pellet , gomas, e goma de pau) tiveram curvas de tempo semelhantes com uma concentração mais elevada primeiro pico seguido por um segundo pico de concentração mais baixa durante o período de amostragem (Ver Figura 2). A Tabela 1 mostra as concentrações de xilitol médios para cada produto de xilitol em pontos de amostragem indicados. O primeiro pico médio foi de 4 min (goma de sedimento - 10,2 ug /mL; gomas - 10,9 ug /mL; e ater goma - 9,0 ug /mL). O segundo pico médio era de 13 min (goma de sedimento - 6,4 ug /mL; manter goma de -5,2 mg /mL), e aos 14 min (gomas - 5,7 ug /mL). A temporização do segundo pico entre as gomas de xilitol e gomas pode ser atribuído ao protocolo de amostragem. AUC total para os dois produtos contendo xilitol não diferem significativamente a partir da goma pellet (goma pellet - 51,3 μg.min /mL, ursinhos de goma - 59,6 μg.min /mL, e pau de goma - 46,4 μg.min /mL; F (1, 28) = 0,16, p = 0,69). O coeficiente de correlação (r 2) entre as concentrações de xilitol médios em cada ponto temporal foi de 0,99 entre a gengiva xilitol pellet mastigação e ursinhos de goma xilitol e 0,99 entre o pellet e pau de goma. Figura 2 Estudo 1: Comparação das concentrações salivar xilitol (ug /mL) após o uso de produtos contendo xilitol (N = 15)
Tabela 1 Estudo 1:. Concentrações xilitol salivar ((ig /mL) ao longo do tempo; média (DP )) depois de usar produtos contendo xilitol (N = 15)
Tempo
Pellet goma de mascar 3 peças × 0,85
Gummy bear 2 peças × 1,3 g
vara goma de mascar 2 peças × 1,5 g
Base
2,06 (0,74)
1,55 (0,53)
1,55 (0,39)
1 min
1,72 (0,86)
1º - 2.19 (1.11)
2º - 3,30 (1,58 )
2,06 (2,08)
2 min
3,54 (3,89)
2,24 (1,39)
2,96 ( 2.28)
3 min
2,07 (0,98)
--------
2.16 (1.10)

4 min
10,22 (3,65)
10,87 (2,18)
8,97 (3,03)
5 min
3,59 (2,88)

3,14 (1,30)
6 min
-------- ----
2,87 (1,56)
------------
7 min
1,75 (0,47)
---------
1,60 (0,55)
8 min
---- --------
1,42 (0,49)
------------
9 min

2,10 (1,07)
---------
2,15 (0,99)
10 min
- -----------
1,90 (0,62)
------------
11 min
2,62 (2,25)
------------
2,43 (0,62)
12 min
------------
2,33 (0,96)
------------


13 min
6,37 (4,41)
------------
5,18 (2,60)

14 min
------------
5,66 (2,86)
----------- -
15 min
2,45 (1,65)
------------
2,03 (0,67)
16 min
------------
2,27 (0,76)
----- -------
Estudo 2
No Estudo 2, os três produtos xilitol (goma de pellet, ursinhos de goma e xarope) tinha curvas de tempo semelhantes com maior concentração oposto segundo pico ao de Estudo 1 (Ver Figura 3). A Tabela 2 mostra as concentrações médias de xilitol em pontos de amostragem indicados. O primeiro pico médio foi de 4 min (goma de sedimento - 8,2 ug /ml; gomas - 7,0 ug /mL) e em 6-8 minutos para o xarope - 6,0-6,6 ug /mL. O segundo pico médio era entre 13-16 min (13 min para goma de pastilha - 10,1 ug /mL; 14 min para gomas - 9,0 ug /ml; e 16 min para o xarope de -8,3 mg /mL). Como no Estudo 1, a temporização diferencial do segundo pico entre os produtos xilitol pode ser atribuída aos seus diferentes protocolos de amostragem. AUC total para os dois produtos contendo xilitol não diferem significativamente a partir da goma pellet (goma pellet - 63,0 μg.min /mL, ursinhos de goma - 55,9 μg.min /mL, e xarope de - 59,0 μg.min /ml; F ( 1, 26) = 0,05, p = 0,83). O coeficiente de correlação (r 2) entre as concentrações de xilitol médios em cada ponto temporal foi de 0,99 entre a goma de mascar xilitol pellet e ursinhos de goma e foi de 0,96 entre a gengiva pellet mastigação e a calda. Figura 3 Estudo 2: Comparação das concentrações salivar xilitol (ug /mL) após o uso de produtos contendo xilitol (N = 15)
Tabela 2 Estudo 2:. Concentrações xilitol salivar ((ig /mL) ao longo do tempo; média (DP )) depois de usar produtos contendo xilitol (N = 15)
Tempo
Pellet goma de mascar 3 peças × 0,85
Gummy bear 2 peças × 1,3 g
Xarope 2,67 g
Base
2,02 (0,60)
2,19 (0,64)
2.01 (0.43)
1 min
1,61 (0,26)
1º - 1,66 (0,48)
2º - 3,27 (0,96)

1,98 (0,73)
2 min
2,87 (1,35)
1,87 (0,60)
3,45 (1,76)

3 min
1,83 (1,00)
-------- ------------

4 min
8,20 (4,20)
7,03 (4,00)
2,50 (1,47)
5 min
5,93 (3,91)

------------
6 min

------------
4,96 (1,49)
6,01 (3,62)
7 min

1,73 (0,33)
--------- ------------

8 min
------------
1,66 (0,64)
6,61 (3,71)
9 min
2,54 (1,01)
--------- ------------


10 min
------------
2,15 (0,56)
1,98 (0,68)
11 min
3,69 (1,81)
------------ ------------


12 min
------------
3,33 (0,83)
2,06 (0,37)

13 min
10.12 (3.15)
------------
-------- ----
14 min
------------
8,97 (3,28) 3,51
(1,21)
15 min
2,40 (1,05)
------------
- ----------
16 min
------------
2,40 (0,97)
8,29 (3,54)
18 min
------------ ------
------
2,45 (0,95)
Discussão
Os produtos contendo xilitol utilizados nestes estudos eram comercialmente disponíveis (goma de pellet, a vara da gengiva) ou fabricado para outro de nossos estudos (ursinhos de goma, xarope). Os indivíduos foram instruídos a consumir os produtos, que normalmente seria consumido. Por exemplo, todas as unidades de goma foram mastigados em conjunto e ursinhos de goma foram consumidos um de cada vez.
Ambos os estudos mostraram que em todos os níveis salivares produtos xilitol xilitol aumentou com o consumo de produtos xilitol. A quantidade de xilitol (isto é, a dose) consumido para cada produto contendo xilitol era a mesma unidade de dosagem previamente determinada nos nossos estudos xilitol para reduzir o nível de S. mutans
quando consumidos 3 a 5 vezes por dia [7].
ambos os estudos demonstraram que os outros produtos contendo xilitol foram semelhantes à goma de mascar pastilha contendo xilitol ( "o padrão de ouro") no seu curso de nível e tempo de concentrações xilitol salivares. Isto sugere que este método é uma forma válida para medir a concentração de xilitol na saliva. Além disso, os outros contendo xilitol produtos "(ursinhos de goma, goma vara xilitol e xarope de xilitol) as concentrações médias de xilitol salivares ao longo do tempo foram altamente correlacionados ao xilitol salivar xilitol pellet de goma de mascar. Isto sugere que este método é fiável
Estudos 1 e 2 concordou com os estudos Holgerson Lif e Tapiainen [10, 11]:. Xilitol concentrações salivares foram elevados durante um curto período de tempo (inferior a 15 minutos) e, em seguida, subsequentemente, diminuiu . Interessantemente, os níveis salivares dentro nossos estudos não aumentam de uma forma linear mas de uma forma bimodal. Ambos os Lif Holgerson e Tapiainen estudos [10, 11] não apresentou um segundo pico de concentração. Como mencionado anteriormente, não é claro a partir da descrição dos estudos Holgerson Lif e Tapiainen dos protocolos específicos, seguido por recolha de amostras de saliva. Nosso protocolo do estudo foi voltado para uma abordagem de "vida real"; indivíduos foram instruídos a consumir os produtos xilitol como fariam normalmente. É possível que os dois picos demonstrado nos estudos actuais foram um resultado do protocolo; isto é, a amostragem tanto estimulada (durante o consumo de xilitol) e os níveis salivares não estimuladas desde todos os produtos incluídos na amostra demonstrou isso. No estudo Lif Holgerson (experiência A), a saliva foi colhida após o consumo do produto de xilitol (de saliva não estimulada) que correspondem com o nosso período de amostragem não estimulado, e a partir do pavimento da boca, utilizando uma pipeta. Este pode ser um artefato do sistema de coleta de saliva e levanta questões sobre a validade desta abordagem. Além disso, no estudo Tapiainen apenas uma amostra por criança foi levada ao passo que no estudo amostras repetidas foram tomadas por disciplina. Finalmente, os limites de detecção entre os estudos actuais e citados eram diferentes. A análise por HPLC teve um nível muito mais baixo de detecção de xilitol (de 0,2 ng /ml) em comparação com o ensaio enzimático (0,2 mg /L) utilizada nos estudos anteriores [10, 11].
Curiosamente, 2 Estudo xilitol tinha salivar níveis ligeiramente abaixo Estudo 1 e teve seu maior concentração máxima média na segunda metade do período de amostragem em relação ao Estudo 1. Não está claro porque Estudo 2 resultados mostraram a distribuição bimodal inversa dos níveis salivares xilitol. Esta variação pode ter sido devido às diferenças inerentes de um outro grupo de indivíduos usados ​​no estudo 2.

Conclusão Esta metodologia pode ser útil para a análise da concentração salivar e tempo de curso do xilitol em outros produtos contendo xilitol e podia servir como um substituto para estudos mais longos e mais caros que envolvem avaliação do nível de bactérias ou ensaios clínicos envolvendo um grande número de seres humanos. Para ambos os estudos, em comparação com a goma de xilitol sedimento, os outros produtos contendo xilitol testados tiveram curvas de tempo semelhantes e significa picos de concentração de xilitol. Isto sugere que os efeitos dos outros produtos xilitol sobre os níveis bacterianos e cárie dentária devem ser semelhantes aos efeitos demonstrados com o uso de goma xilitol pellet.
Declarações
Agradecimentos
Nós gostaríamos de agradecer as seguintes empresas para fornecer o produtos utilizados; açúcar xilitol (Danisco, New York) e ursos xilitol goma (Santa Cruz Nutritionals anteriormente Harmony Foods Corp, Santa Cruz, CA). Além disso, gostaríamos de agradecer ao Dr. Eva Soderling por compartilhar sua experiência no desenvolvimento dos protocolos de estudo e da Universidade de Washington, Escola de Enfermagem, Enfermagem biocomportamental Research Lab (subvenção financiado pelo NIH, NINR2 P30 NR 04001). Apoiado por NIDCR-NIH U54 DE14254; Head Start, HRSA 90YD0188 /03; e MCHB, HRSA R40MC03622-03.
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O autor (s) declaram que não têm interesses conflitantes.
contribuições dos autores
CAR participou no desenho e análise do estudo e elaborou o manuscrito. PM concebeu o estudo, participou no desenho e análise, e comentou sobre o manuscrito. KAL participou no desenho e análise do estudo e comentou sobre o manuscrito. MR, GM, MKH, MCR realizou o estudo, e ET realizado o ensaio de HPLC, e comentou sobre o manuscrito. LZ assistida na análise dos dados. Todos os autores leram e aprovaram o manuscrito final.