Resumo
fundo
coloração extrínseca de dentes pode resultar da deposição de uma variedade de pigmentos no interior ou sobre a superfície do dente, que branqueamento originam principalmente da dieta ou do uso do tabaco. Mais recentemente, estudos clínicos têm demonstrado a eficácia de algumas gomas de mascar na remoção de manchas nos dentes extrínseca. O objetivo deste estudo foi avaliar a eficácia de dois nicotina medicado gomas de mascar (A e B) na remoção de manchas em um in vitro
experiência, quando comparado com uma confeitaria de branqueamento goma de mascar (C) e saliva humana (D) .
Métodos
incisivos bovinos foram coradas por uma alternância de exposição ao ar e imersão num caldo que contém pigmentos naturais, tais como café, chá e microrganismos orais durante 10 dias. amostras de esmalte coradas foram expostos a saliva sozinho ou para o teste de gomas de mascar sob condições que simulam a mastigação humano. A mudança de coloração das amostras de esmalte foi medida utilizando um espectrofotómetro. As medidas foram obtidas para cada amostra (média de três absorvâncias) usando o L * a * b escala: luminosidade (L *), vermelho-verde (a) e amarelo-azul (b)
Resultados Medicado mastigação. gengivas (a e B) removida uma quantidade maior de mancha extrínseca visível, enquanto a goma de mascar de confeitaria com uma reivindicação de clareamento (C) teve um efeito de clareamento mais suave, tal como avaliado por uma avaliação quantitativa e qualitativa.
Conclusão
o Nicotine testado Terapia de substituição (NRT) gomas de mascar foram mais eficazes na remoção da mancha do dente extrínseca. Esta melhoria visível na aparência clareamento dental poderia reforçar a motivação dos fumantes a deixar de fumar
material suplementar Electrónicas | A versão online deste artigo. (Doi:. 10 1186 /1472-6831-8-23) contém material suplementar, que está disponível para usuários autorizados.
Fundo
um sorriso atraente e dentes olhando saudáveis refletem bem-estar e qualidade de vida para a maioria das pessoas [1]. A cor natural do dente permanente é determinada pela translucidez esmalte permitindo que a cor da dentina subjacente seja visível. Esmalte actua como um filtro para a dentina pelo modo como a luz passa através da dentina e como a luz é reflectida de volta pela dentina, que é a cor do dente percebida visualmente [2]. Esta cor pode ser quantificado com um espectrofotômetro usando o L * a * b * escala de cores, que mede a leveza de L *, gama de cores vermelho-verde para a * e faixa amarelo-azul de b *. Coloração de dentes é devido a manchas extrínsecas, que se encontram sobre a superfície do dente e no interior da película adquirida, enquanto as manchas intrínsecas se encontrarem dentro dos tecidos dentais [3]. Os efeitos estéticos criados por ambos os tipos de descoloração são questões que são tratadas pelo dentista. Mais mancha intrínseca não pode ser facilmente removido, mas podem ser mascarados por meio de técnicas de reparação, ou por meios químicos tais como peróxido. Pelo contrário, a coloração extrínseca pode muitas vezes ser removido por acções mecânicas simples [3]. procedimentos de assistência domiciliar que remover mancha extrínseca, estão focados em creme dental e escovas de dente. Mais recentemente, algumas gomas de mascar com uma reivindicação de branqueamento dentário foram lançados com estudos clínicos apoiando a sua eficácia na remoção de manchas extrínsecas [4].
Gomas de mascar também tem sido usado para entregar agentes terapêuticos, tais como a nicotina para a terapia de cessação do tabagismo [ ,,,0],5]. O objetivo deste vitro
método descrito por Kleber [6] foi avaliar as capacidades de remoção de manchas extrínsecas de duas pastilhas elásticas medicinais que contêm nicotina, uma confeitaria goma de mascar com um clareamento dental alegação de formulação e, contra um não mastigação -essências de terebintina controle negativo usando saliva apenas humano.
Métodos
produtos
as gomas de mascar experimentais foram fornecidas pelo patrocinador de embalagem codificado, o que equivale a amostras de teste cego.
os produtos testados foram dois nicotina terapia de reposição (NRT) marcas, Nicotinell Mint revestido de goma de mascar com 2 mg de nicotina (goma de mascar A; Novartis Consumer Health) e Nicotinell Thrive Mint goma de mascar com 2 mg de nicotina (goma de mascar B; Novartis Consumer Health). As diferenças entre as duas gomas são de que a goma de mascar A tem um 60% maior teor de carbonato de cálcio e uma base de sabor Mint diferente do que mastigar B. A goma de mascar de confeitaria com uma reivindicação de branqueamento dentário, V6 Branco Forte Mint (goma de mascar C; Fertin) , contendo carbamida e xilitol mas não polifosfatos foi utilizado como controle positivo.
Preparação de amostras de esmalte
praças Quatro mm de esmalte dental de incisivos permanentes bovinos, que são um modelo representativo para dentes humanos [7], foram cortadas usando um disco de corte de diamante. Usando um molde, um quadrado de esmalte que mede 4 mm x 4 mm, foi incluído em resina de fundição de poliéster transparente para fornecer um bloco quadrado de 1,5 cm com a superfície labial do esmalte dos dentes expostos. A superfície superior do bloco de poliéster foi achatada para o nível da superfície labial dos quadrados de esmalte utilizando um cortador de gesso dentária, enquanto que o uso de água como lubrificante. A superfície foi então alisado por mão-de lixar, em 400 lixa de esmeril utilizando água como o lubrificante até que todas as marcas de moagem foram removidos. Finalmente, a superfície de topo do bloco foi mão-polida para um acabamento espelhado utilizando uma lama de água de GK1072 caulino calcinado (tamanho de partícula médio = 1,2 microns) num pano de algodão. A amostra final foi examinada sob um microscópio de dissecação e descartado se foram observadas imperfeições de superfície.
A fim de tornar as superfícies do dente polido mais semelhantes aos dentes naturais e promover a formação de manchas sobre o esmalte, as amostras foram condicionadas durante 60 segundos em 0,2 M de HCl, seguida por uma erosão final com ácido fítico 1% durante 60 segundos. As amostras foram então lavadas com água desionizada e ligados ao aparelho de coloração. Aparelho de coloração de dente
O aparelho de coloração de dente, como mostrado na Fig. 1 foi concebido para proporcionar a imersão alternativa para o caldo de colorao e secagem ao ar dos espécimes. Este instrumento foi feita em casa
. Figura aparelho de coloração 1 dente. O aparelho é constituído por uma base da plataforma de alumínio, o qual suporta uma haste de Teflon (de 3/4 de polegada de diâmetro) ligado a um motor eléctrico, o qual por meio de uma caixa de redução de velocidade, faz rodar a haste a uma velocidade constante de 1,5 rpm. furos para parafusos estão espaçados a intervalos regulares ao longo do comprimento da haste. Os espécimes de esmalte estão ligados à haste do primeiro por colagem da cabeça de um parafuso de plástico à volta da amostra, em seguida, enroscando a amostra de esmalte sobre a haste. Por baixo da haste é um, 300 ml de capacidade calha removível que realizou o caldo de colorao dos dentes.
Dente preparação caldo de colorao
O caldo de colorao foi preparada por adição de 1,02 g de café instantâneo, 1,02 g de chá instantâneo, e 0,75 g de de mucina gástrica a 250 ml de caldo de soja tripticase esterilizado [6]. Cerca de 50 ml de uma 24 horas de Micrococcus luteus
cultura, que é uma mancha induzir bactérias encontradas na cavidade oral, também foi adicionada ao caldo de mancha para promover e acelerar a formação de manchas extrínsecas sobre as amostras de esmalte. O aparelho, que contém as amostras de esmalte em anexo e caldo de colorao, foi depois colocado numa incubadora a 37 ° C, com as amostras em rotação continuamente através do caldo de colorao e ar. O caldo de colorao foi substituído com caldo fresco uma vez a cada 24 horas durante dez dias consecutivos. Com cada mudança de caldo de carne, a calha e as amostras foram lavadas e toothbrushed com água deionizada para remover quaisquer depósitos soltos. No décimo primeiro dia do caldo de colorao foi modificado com a adição de 0,03 g de FeCl
3,6H 2O, e este foi continuado com alterações caldo diárias até que a mancha sobre os espécimes era suficientemente escuro (G * & lt; 35 ). Os espécimes foram então removidos do caldo de colorao, toothbrushed completamente com água desionizada, e refrigerados numa humidificador até ser utilizado. Medição da mancha
A cor da mancha extrínseca na amostra de esmalte foi medido tomando leituras de reflectância absorvância difusas com um Minolta CM-503i Espectrofotómetro com iluminação difusa /8 ° ângulo de visão, mm de abertura 3 e com um ambiente iluminante D65 (Minolta Camera Co., 101 Williams drive, Ramsey, NJ, 07446).
as medições de absorvância ao longo de todo espectro de cores visíveis foram obtidos utilizando a escala de cor CIELAB [8]. Esta escala quantifica cor de acordo com 3 parâmetros, L * (escala leveza-escuro), a * (chroma vermelho-verde), e b * (chroma amarelo-azul). A fim de obter leituras reprodutíveis, os espécimes de esmalte manchado foram deixados a secar ao ar à temperatura ambiente durante 30 minutos antes das medições foram feitas. Estas medições foram realizadas alinhando o centro do segmento quadrado de 4 milímetros de esmalte manchado directamente sobre a abertura de 3 mm de diâmetro segmentação do espectrofotómetro. Uma média de 3 leituras de absorvência utilizando o L * a * b * escala foram efectuadas para cada espécime.
Procedimento de ensaio
Antes do tratamento, a linha de base G * foram determinados a * b * contagens de manchas de esmalte e os espécimes usado para distribuir as amostras de esmalte em 4 grupos equilibrados de 16 amostras cada um. Um dispositivo de mastigação (Gildea Ferramenta de & amp;. Engineering Co., Inc., Fort Wayne, IN, EUA)., Desenvolvido por Kleber et ai
[6] para simular a mastigação humano de goma de mascar, foi utilizado (Figura 2) . As amostras de esmalte manchado foram imersos em 15 mL de fresco, estimulada saliva humana (resultante de Parafilm
mascar ®), que tinham sido recolhidas e colocadas no reservatório de mastigação. O elemento de aquecimento controlado por termostato foi ligado para manter a goma de mascar e saliva à temperatura do corpo para manter a consistência mastigação adequada. goma de mascar fresca (2,5 gramas) e de saliva foram usadas para cada período de tratamento de 20 minutos. Seguindo o 3 rd (60 min) e 6 th tratamentos (120 min), os espécimes foram lavados, deixados a secar durante 30 minutos antes de uma medição de reflectância difusa absorvância foi feita. Após as medições finais de manchas, as amostras foram pumiced utilizando uma peça manual dentária, a fim de limpar toda a mancha residual da amostra de esmalte, e as leituras foram levadas de novo para obter o valor inerente de cada amostra para a "percentagem removido" cálculo. Figura 2 dispositivo de mastigação. cálculos
Stain in the mudança geral na cor da amostra de esmalte manchado foi calculada usando a equação CIELAB: AE = [(AL *) 2 + (Aa *) 2 + (Δb * ) 2] 1/2.
o valor AE resume a mudança geral para cada fator de cor AL *, Aa * e Δb *), enquanto AL e representa apenas o valor de leveza. Ambos descrevem a capacidade da goma de mascar de teste para remover mancha Os dados foram calculados e definidos da seguinte forma:..
Stain Removido = AE ou pontuação AL após o tratamento
total Stain Disponível = pontuação AE após o tratamento e polidores
% Stain Removido = "Stain Removido" dividido por "Stain total disponível."
Cada componente do L * a * b * escala representam as mudanças específicas na luminosidade (L *), de cor vermelho-verde (a * ), e cor amarelo-azul (b *).
análise estatística
a diferença de valores médios calculados para o efeito de remoção de manchas foi determinada e foram estatisticamente testadas por análise de variância para testar diferenças entre os grupos utilizando o teste de Student Newman-Keuls. Todas as comparações foram testados em um global do nível de 0,01 de significância usando os dois t-teste unilateral.
Resultados da remoção da mancha
bovina dente, um modelo representativo para dentes humanos [7], foi exposto ao ser humano recém-estimulada saliva com ou sem produtos de goma de mascar para 3 (60 minutos) a 6 ciclos (120 min), 20 min cada. A confeitaria clareamento da gengiva e saliva foram renovadas a cada 20 minutos, a fim de simular o tempo médio que a goma é normalmente mastigado. Sob estas condições, a mancha extrínseca removido, o que é avaliada como a alteração de cor global (AE) entre a linha de base e 60 ou 120 minutos é apresentada na Tabela 1 1.Table alterações de cor total (AE) de mancha dental extrínseca
< col> AE
A
nicotina goma de mascar
B
nicotina goma de mascar
C
Whitening goma de mascar
Saliva
60 min
10,80 ± 1,96 **
10,08 ± 1,69 **
5,00 ± 2,27 *
1,03 ± 0,43
120 min
14,91 ± 2,12 **
13,15 ± 1,57 **
6,55 ± 2,24 *
0,65 ± 0,29
mudança de cor total (AE) nos escores de manchas extrínsecas por gomas de mascar a, B e C e saliva após 60 min ou 120 min in vitro
mastigação (média ± desvio padrão de 16 amostras (n = 16)). Valores com o mesmo número de asteriscos não são estatisticamente diferentes. As gomas A e B em relação C ou de saliva, bem como C em função do saliva, são significativamente diferentes (a p & lt; 0,01). Tanto a 60 e 120 min
A análise estatística demonstrou que, após 60 minutos de mastigação, pastilhas elásticas a resultou em uma pontuação AE de 10,80 ± 1,96 e goma de mascar B resultou em uma pontuação AE de 10,08 ± 1,69. Ambos removido de forma significativa (p & lt; 0,01) a mancha do que a goma de mascar C (AE = 5,00 ± 2,27) eo controle saliva (AE = 1,03 ± 0,43). Além disso, a goma de mascar tinha um C significativamente (p & lt; 0,01) maior do que o efeito de remoção de mancha de saliva. Após 120 minutos de mastigação, gomas de mascar A e B continuou a remover de forma significativa (p & lt; 0,01) mais mancha (AE = 14,91 ± 2,12 e 13,15 ± 1,57) do que tanto a goma de mascar C (AE = 6,55 ± 2,24) eo controle saliva (AE = 0,65 ± 0,29). Gomas de mascar C, mais uma vez, teve um aumento significativo (p & lt; 0,01). Maior efeito de remoção de mancha de saliva
Para definir a cor do esmalte calculados a partir dos valores de reflectância, medidas de L * leveza em uma escala de 0 (preto) a 100 (branca de neve), contribuindo principalmente para o aparecimento de clareamento dos dentes. valores AL são demonstrados na Tabela 2 e bem correlacionada com a AE observado na Tabela 1.Table 2 Mudanças na luminosidade (DL) de mancha extrínseca dental
AL
A
nicotina goma de mascar
B
goma de mascar de nicotina
C
Whitening goma de mascar
Saliva
60 min
9,53 ± 1,77 **
8,74 ± 1,73 **
3,99 ± 2,13 *
-0,16 ± 0,55
120 min
13,76 ± 2,32 **
11,97 ± .1.65 **
5,52 ± 2,26 *
0,04 ± 0,48
Lightness mudança (AL) em dezenas de manchas extrínsecas por gomas de mascar a, B e C e saliva após 60 min ou 120 min de in vitro
mastigação (média ± desvio-padrão de 16 amostras (n = 16)). Valores com o mesmo número de asteriscos não são estatisticamente diferentes. As gomas A e B em relação C ou de saliva, bem como C em função do saliva, são significativamente diferentes (a p & lt; 0,01). Tanto a 60 e 120 min
Uma vez que o olho humano pode detectar visualmente uma diferença de cor AE de dois ou mais, a quantidade de corante removido por gomas de mascar a e B produziu uma alteração significativa na cor da amostra de esmalte tal como mostrado na Figura 3. Figura 3 avaliação qualitativa da remoção da mancha. remoção de manchas por o produto testado antes (linha de base) e após 120 minutos de mastigação
in vitro.
Análise da avaliação quantitativa
A fim de calcular a percentagem de mancha removida por a goma de mascar, toda a mancha remanescente na amostra de teste esmalte após a fase de mascar foi removido por polidores-los totalmente limpo. Uma pontuação média máxima AE foi então calculada, que representa a quantidade total de corante removível sobre a amostra de esmalte. Com base nesta pontuação, goma de mascar A removido 34,6 ± 6,9% e 47,6 ± 6,2% da mancha após 60 e 120 minutos e goma de mascar B removido 34,6 ± 5,0% e 45,2 ± 4,8% da mancha após 60 e 120 minutos de mecânica mascar, respectivamente (Figura 4). Ambos foram significativamente mais eficazes do que a goma de mascar C (16,5 ± 7,4% e 21,4 ± 6,4%) e o controlo de saliva, o que removeu 3,3 ± 1,4% do corante, em 60 min e 2,1 ± 1,0% em 120 min. Uma tendência similar foi observada quando a percentagem de mancha removida foi expressa como alteração na luminosidade (AL; dados não mostrados). Figura 4 A avaliação quantitativa da remoção de manchas. Percentagem de mancha total de removido como cor geral de mudança (AE) por várias gomas de mascar (A, B e C) e saliva recém-estimulada após 60 min e 120 min de in vitro
mastigação (média ± desvio-padrão de 16 amostras). Nota: Barras com o mesmo número de asteriscos no mesmo ponto de tempo não são estatisticamente diferentes. As gomas A e B em relação C ou de saliva, bem como C em função do saliva, são significativamente diferentes (a p & lt; 0,01). A 60 e 120 min
Discussão Neste estudo, a fiabilidade dos resultados não poderiam ser influenciada pela farinha de pedra-pomes ou a secagem ao ar de espécimes de esmalte. A farinha de pedra-pomes utilizado para a remoção de mancha extrínseco existente (para determinar a cor inerente do espécime), faz conferir um polonês quantificável à superfície do espécime e é semelhante aos utilizados para a profilaxia colar limpeza dental no consultório dentário. Portanto, este não iria causar riscar a superfície, o que resultaria em luz difusa, que poderia interferir com a medição espectrofotométrica. Além disso, é relevante notar, que os espécimes clarear à medida que secam, e que dentro dos primeiros minutos, os parâmetros de cor mudar dramaticamente, mas estabilizar após 30 minutos. Foi tomado cuidado para assegurar que todas as amostras foram lidas como um grupo e deixou-se secar durante 30 minutos. Uma vez que todas as amostras foram tratadas do mesmo modo e para o mesmo período de tempo, não se deve esperar dessecação das amostras de afectar os resultados. Boa correlação foi obtida entre a mudança global na mancha de cor (AE) ea mancha luminosidade (AL), o que influencia branqueamento aparência da amostra esmalte. Embora a reflectância espectrofotômetro pode quantificar cor de forma objetiva, este sistema não é capaz de fazer medições espaciais de uma área manchada específico.
As gomas de mascar medicado A e B removidas significativamente maior quantidade de mancha extrínseca que o controle positivo, que foi ainda mais eficaz do que a saliva. Continua mascar 60-120 min resultou na remoção de manchas adicionais para todas as gomas de mascar. Avaliação da remoção da mancha destas alterações era claramente evidente para as gomas de mascar A e B medicado, mas menor será a diferença foi observada para o branqueamento de confeitaria de goma de C. Em contraste, a saliva não teve efeito detectável, o que poderia ter sido esperado, devido à ausência de agentes, tais como carbonato de cálcio ou bicarbonato de sódio branqueamento. Este último, conhecido como bicarbonato de sódio, é solúvel na saliva e classificada como um abrasivo suave. Ele melhora a leveza dente, removendo a mancha de dente extrínseca, quando incorporado em gomas de mascar [9] e mancha intrínseca quando adicionado em dentifrícios [10]. O carbonato de cálcio, por outro lado, é praticamente insolúvel em água e forma partículas abrasivas fortes que ajudam a reduzir a placa dos dentes e melhorar a leveza do dente por meio de polimento da superfície do esmalte [11-13]. Sem ter acesso à formulação detalhado do branqueamento confeitaria de goma (C), carbonato de cálcio e bicarbonato de sódio foram identificadas na 3 testados gomas de mascar, mas carbonato de sódio só foi encontrada nas gomas de mascar NRT. Subsequentemente, a presença adicional de esta molécula poderia contribuir para as diferenças no efeito de clareamento reflectidos na remoção de nódoas superior, com a NRT gomas de mascar A e B. O cálcio presente na saliva pode reagir com o carbonato de carbonato de sódio, resultando na formação de cálcio insolúvel carbonato, que tem polimento propriedades [11-13]. Efeitos semelhantes de branqueamento dentário pode ser assumida para todas as outras gomas de mascar aromatizadas Nicotinell, que contêm a mesma quantidade de carbonato de cálcio, bicarbonato de sódio e carbonato de sódio como hortelã Nicotinell revestido e Nicotinell hortelã prosperar gomas de mascar utilizados neste estudo. A goma de confeitaria não contém carbonato de sódio, mas o xilitol, que é um conhecido agente anticárie [14] e de carbamida (ureia). Esta última, quando utilizada em gomas de mascar, demonstrada para induzir uma recuperação de pH mais pronunciado após uma ingestão de sacarose [15]. Assim, xilitol e goma de mascar de carbamida em permitir a redução da formação de placa dentária.
A placa dentária é um biofilme microbiano com uma composição diversa que se deposita no dente, e é uma fonte de cárie dentária e gengivite [16, 17]. Na fumaça do cigarro, alcatrão, arsénio, cádmio e 4000 produtos químicos e gases são liberados [18]. Dependendo da duração de exposição a estes produtos químicos, que pode resultar em Brown extrínseca de manchas escuras nas superfícies dos dentes dos fumadores pesados, que são incorporados na película salivar [19]. Esmalte película é um filme de proteína, o abastecimento a partir da exposição contínua de esmalte para saliva total, que funciona para proteger o esmalte. Vários estudos têm mostrado película para reduzir drasticamente a erosão do esmalte na presença de bebidas ácidas [20]. A combinação de goma de mascar e os ingredientes abrasivos pode ajudar a estimular a produção de saliva e de remoção mecânica da placa, portanto, favorecer a renovação da película e melhorar a leveza do esmalte, como relatado na literatura [21, 22].
Medicado gomas de mascar contendo nicotina são projetados para serem usados como substitutos orais para cobrir as necessidades de nicotina do ex-fumador. A população de fumar tem uma maior prevalência de problemas dentários, tais como a periodontite e perda de dentes [23]. Assim, os presentes resultados fornecem evidências de que a NRT testado gomas de mascar pode contribuir para uma melhor higiene oral geral, removendo a película manchado na superfície do esmalte, aumentando assim o clareamento dental aparência. Este efeito pode ser enfatizado pelos profissionais de saúde ao aconselhar seus pacientes a parar de fumar, uma vez que considerações estéticas são frequentemente citados pelos pacientes como uma entre muitas razões para cumprir com aconselhamento profissional [24].
Considerando todos os pontos acima, in vitro
sistema de mastigação é um método adequado para avaliar a remoção mecânica de mancha extrínseca por agentes abrasivos ou de polimento, tais como bicarbonato de sódio e carbonato de cálcio, respectivamente. No entanto, este procedimento não pode permitir que para sublinhar o efeito do agente como xilitol ou de carbamida na redução da formação de placa dentária, que também contribuem para clareamento dental aparência [11-13].
Conclusão
Estes resultados mostram a in vitro
sistema de mastigação ser um método válido e confiável para avaliar a remoção de mancha extrínseca no esmalte. NRT gomas de mascar da marca Nicotinell foram significativamente mais eficaz do que uma goma de mascar de confeitaria alegando ter um efeito de clareamento, e saliva sozinho. Este clareamento dental ação visível poderia reforçar a motivação dos fumantes a usar o suporte NRT adequada ao planejar parar de fumar.
Declarações
Agradecimentos
Este estudo foi realizado em nome da Novartis Consumer Health, Nyon, Suíça.
os autores agradecem a Anne Callens e Dr Alberto Paredes-Diaz do global Medical Affairs, Novartis Consumer Health para fornecer apoio e revisão do manuscrito. arquivos enviados originais
dos autores para imagens
Abaixo estão os links para os autores 'original apresentada arquivos de imagens. 'arquivo original para a figura 1 12903_2008_98_MOESM2_ESM.pdf Autores' 12903_2008_98_MOESM1_ESM.pdf Autores arquivo original para a figura 2 12903_2008_98_MOESM3_ESM.pdf Autores 'arquivo original para a figura 3 12903_2008_98_MOESM4_ESM.pdf Autores' arquivo original para a figura 4 Conflito de interesses
GS e NHN são funcionários da Novartis Consumer Health, que produz e distribui os produtos de terapia de reposição de nicotina. Este estudo foi financiado pela Novartis Consumer Health.
Os autores declaram que não têm interesses conflitantes. Contribuições
dos autores
MM foi o supervisor do projecto e realizadas as investigações e avaliados os resultados. NH-N apoiou as experiências e contribuíram para a avaliação dos resultados e redação do manuscrito. GS contribuiu para o rascunho do manuscrito e revisto crítica do conteúdo intelectual relevante. Todos os autores leram e aprovaram a versão final do manuscrito.
