da arte abstracta
Fundo
Candida albicans
é uma levedura diplóide que em algumas circunstâncias podem causar infecções de boca e orofaringe. Esta investigação teve como objetivo estudar a prevalência de Candida spp
. e analisar os genótipos ABC de 76 isolados clínicos de C. albicans
obtido a partir da cavidade oral de pacientes transplantados renais de duas regiões geográficas distintas do Brasil.
Métodos
Nós digitados 48 cepas com ABC genotipagem e microssatélites usando iniciador M13 e testadas três fatores de virulência in vitro:. atividade fosfolipase, morfogênese ea capacidade de fugir de neutrófilos fagocitose
resultados
C. albicans
foi a espécie mais prevalente (86,4%), seguido por C. tropicalis
(4,5%). C. albicans
genótipo A foi o mais prevalente (58 isola; 76,4%), seguido pelo genótipo C (15 isola; 19,7%) e genótipo B (3 isolados; 3,9%). Quando a técnica de microssatélites com iniciador M13 foi aplicado, 80% dos isolados do Sul foram colocados dentro do mesmo aglomerado. A maioria das estirpes do genótipo C foram agrupados em dois grupos diferentes. Genótipo C foi considerado mais resistente ao ataque PMNs de genótipos A e B. cepas isoladas do sul do Brasil mostrou também uma melhor capacidade de combater PMNs fagocitose.
Conclusões
Encontrámos uma elevada taxa de C. albicans
genótipo C as amostras isoladas a partir da cavidade oral deste grupo de pacientes. Este estudo caracteriza-se C. albicans orais
cepas isoladas de receptores de transplante renal e contribuirá para um melhor entendimento da patogênese da candidíase oral.
Fatores Palavras-chave
Candida spp
candidíase oral nos rins transplantados Genotipagem de virulência material eletrônico complementar
a versão online deste artigo (doi:. 10 1186 /1472-6831-14-20) contém material suplementar, que está disponível para usuários autorizados
Fundo
Apesar do fato.
que Candida spp. pertencem à microbiota bucal normal, vivendo na língua, gengivas, palato e saliva de indivíduos saudáveis como leveduras comensais, eles podem causar infecções de boca e orofaringe [1, 2]. Candida
spp. foram isolados a partir de 40 a 60% de bocas saudáveis, ao passo que a candidíase oral é mais comum em indivíduos imunodeficientes, aqueles com doenças subjacentes graves, e portadores de próteses superiores [3, 4].
Apesar do facto de outros Cândida menos virulento
espécies tais como C. glabrata, C. tropicalis, C. parapsilosis, C. krusei e C. dubliniensis
também foram isoladas a partir da saliva de pacientes com ou sem candidíase oral, C. albicans
ainda é a espécie mais freqüente associados com lesões orais [5].
Vários fatores podem contribuir para a transição a partir de leveduras comensais para formas patogénicas que são relacionados ao sistema imune do hospedeiro prejudicada associada com a virulência do micro-organismo. Os principais factores de virulência de C. albicans
incluem BUD-a-hifa transição (também chamado de morfogénese), adesão ao epitélio humano e células endoteliais, a formação de biofilme, a capacidade de secretar enzimas hidrolíticas (principalmente proteases e fosfolipases), mudança fenotípica (transição de branco opaco), bem como a evasão de acolhimento células do sistema imunológico [6, 7].
Alguns estudos avaliaram C. albicans
genótipos ABC isoladas da cavidade oral de indivíduos diferentes e os resultados parecem ser muito variável, de acordo com a população avaliada. Por exemplo, um estudo com 11 pacientes diabéticos com periodontite revelou que 51,6% subgengivais C. albicans
isolados pertenciam ao genótipo B [8], enquanto outro inquérito revelou genótipo A como predominante [9].
A prevalência de candidíase oral em pacientes transplantados renais, descritas nas faixas de literatura de 9,4% para 46,7% [10-12]. Um estudo realizado no México por De La Rosa-Garcia et al [11], relata 18,7% dos casos de candidíase oral em um total de destinatários transplantados 90 rins.
Nosso grupo já publicou uma comparação de alguns fatores de virulência (biofilme a produção, a adesão às células epiteliais bucais humanos e atividade de proteinase) entre C. albicans
e não-C. Candida albicans
isolados obtidos a partir da cavidade oral de receptores de transplante renal de Natal, Rio Grande do Norte, Brasil [13]. Este estudo é um seguimento desta publicação anterior, incluindo outras estirpes pertencentes a outra região geográfica do Brasil. Além disso, outros atributos de virulência foram investigados. Portanto, os objetivos do presente estudo foram determinar Candida
distribuição das espécies e genotipicamente caracterizar 48 C. albicans
cepas isoladas da cavidade bucal de 154 receptores de rins transplantados de duas regiões geográficas diferentes do Brasil (Nordeste e Sul ). Além disso, as estirpes foram caracterizadas fenotipicamente quanto à capacidade para expressar os seguintes factores de virulência in vitro:. A secreção de fosfolipase, a transição a partir de células de levedura de hifas (morfogénese) e a capacidade para resistir a fagocitose pelos neutrófilos polimorfonucleares
Métodos
Cepas selecção
durante uma de 3 meses-período, 154 pacientes de dois diferentes regiões geográficas do Brasil (111 de Natal, Rio Grande do Norte e 43 de Maringá, no Paraná) foram submetidos a exame clínico da cavidade oral para diagnóstico candidíase, de acordo com os critérios estabelecidos para lesões bucais em pacientes HIV recomendadas pela classificação da Organização Mundial de Saúde [14] CE-Câmara e. Somente os pacientes que concordaram em participar de um estudo confidencial de vigilância, de acordo com o Comitê Local de Ética em Pesquisa do Hospital Universitário Onofre Lopes, aprovado sob o número 152/07, foram incluídos neste estudo. As estirpes isoladas de colonização oral (sem sintomas) ou durante os episódios de candidíase oral foram avaliadas neste estudo. Para estudos de genotipagem e virulência, foram selecionados aleatoriamente 48 estirpes clínicas de C. albicans
(38 de Natal, Rio Grande do Norte e 10 de Maringá, no Paraná). Todos os isolados são descritas na Tabela 1. As amostras foram abastecido em YPD glicerol (10 g /L de extracto de levedura, 20 g /L de peptona, 20 g /L de dextrose e 3% de glicerol) a -80 ° C no Laboratório de Micologia Médica e Molecular, Universidade Federal do Rio Grande do Norte, Brasil. C. albicans
ATCC90028 e SC5314 foram incluídos neste estudo como strains.Table referência de 1 Dados demográficos dos receptores de transplante renal de Natal, RN e Maringá, PR, Brasil, de acordo com sexo, idade e doença subjacente
Variáveis
Natal (n,%)
Maringa (n,%)
total (n,%)
Sex
Masculino
64 (73,6)
23 (26,4)
87 (100)
Feminino
47 (70,1)
20 (29,9)
67 (100)
Idade
12-18 anos
6 (85,7)
1 (14,3)
7 (100)
19-34 anos
44 (81,5)
10 (18,5)
54 (100)
35-64 anos
59 (64,8)
32 (35,5)
91 (100)
65 anos ou mais
2 (100)
0 (0)
2 (100)
subjacente doença
nefropatia diabética
8 (66,7)
4 (33,3)
12 (100)
A hipertensão arterial
47 (85,4)
8 (14,6)
55 (100)
glomerulonefrite
23 (76,7)
7 (23,3)
30 (100)
doenças renal policística
6 (66,7)
3 (33,3)
9 (100)
Outros
27 (56,25)
21 (43,75)
48 (100)
amostras recolha e leveduras identificação
amostras contendo 2 ml de saliva foram coletadas de todos os pacientes, por estimulação prévia com gomas de mascar. Quando as lesões estavam presentes, uma zaragatoa estéril foi esfregado sobre a superfície da mucosa da cavidade bucal. Subsequentemente, 100 uL de células suspensões foram inoculadas na superfície de Agar Dextrose Sabouraud (SDA; Oxoid, Reino Unido) adicionou-se 300 ug /ml de cloranfenicol (Park-Davis), usando um laço Drigalsky. As placas foram incubadas a 37 ° C durante 48 h. colônias de leveduras foram semeadas em CHROMagar Candida® (CHROMagar Microbiologia, Paris, França) para verificar a pureza ea triagem para diferentes colónias de cor. A identificação das espécies foi baseado nas características das células observadas microscopicamente após cultura em agar de farinha de milho adicionada de Tween 80, bem como a assimilação e fermentação de teste e ID32C Sistema (bioMérieux Marcy l'Etoile, França), sempre que foi necessário [15]. Estirpes pertencentes ao Candida parapsilosis
espécies complexas foram identificados anteriormente com métodos moleculares [13]. C. albicans
extracção de ADN de C. albicans
células foram cultivadas durante a noite em meio YPD líquido ( dextrose 20 g /L, peptona a 20 g /L, extracto de levedura 10 g /L) incubados a 30 ° C, rotação a 200 rpm num agitador giratório (TE-420, Tecnal ® Piracicaba, Brasil). O DNA foi extraído usando o reagente Ultra amostra PrepMan preparação (Applied Biosystems, Foster City, CA) de acordo com as instruções do fabricante. concentração de DNA genômico e pureza foram verificadas com um instrumento NanoDrop (Thermo Scientific; Amersham Pharmacia Biotech, Wilmington, DE, EUA).
microssatélites digitando PCR e genotipagem ABC
microssatélites digitação foi realizada utilizando o iniciador M13 (5 'GAGGGTGGCGGTTCT --3 ') (IDT) como anteriormente descrito [16]. ABC genotipagem foi realizada com os seguintes iniciadores: CAINT- L (5'-ATAAGGGAAGTCGGCAAAATAGATCCGTAA-3 ') e CA-INT-R (5'-CCTTGGCTGTGGTTTCGCTAGATAGTAGAT-3') [17]. Resumidamente, 1,0 ul de ADN de 40 ng /mL foi adicionado a 29 de PCR Master Mix (Promega) para um volume final de 25 uL. As amostras foram amplificadas num termociclador (Amplitherm TX96, EUA) utilizando os seguintes parâmetros de ciclagem: um ciclo inicial de 94 ° C durante 3 min seguido de 30 ciclos de 1 min a 94 ° C, 1 min a 57 ° C, 1 min a 72 ° C e um ciclo final de 5 min a 72 ° C. Para microssatélites digitação, 1,0 ul de ADN de 40 ng /mL, 2,5 mL de 10 x tampão de PCR (Tris-HCl a 100, pH 8,3, KCl 500 mM, MgCl 3,5 mM
2), 5 uL de dNTPmix (100 mM cada dNTP), 1,0 ul de cada iniciador (50 pmol /mL), 0,13 mL de Tween 20 e 1,0 unidades de polimerase de ADN Taq foram adicionados a um volume final de 25 uL. Quarenta e cinco ciclos de amplificação foram realizadas utilizando os mesmos parâmetros de ciclagem descritas anteriormente, excepto que a temperatura de emparelhamento foi de 36 ° C para a tipagem de microssatélites. Os produtos de PCR foram separados por tamanho-electroforese em gel de agarose e o gel foi corado em um /ml de brometo de etídio solução tampão de 0,5 ug (TAE).
microssatélites de análise de dados assistida por computador
imagens de gel foram analisados com o GelCompar II software, versão 4.5 e BioNumerics (Matemática Aplicada, Kortrijk, Bélgica). As semelhanças entre os perfis foram calculados utilizando o coeficiente de Dice para gerar as matrizes de coeficientes de similaridade para dendrograma construções. Para agrupamento perfil, o método do grupo par não ponderada com médias aritméticas foi usada com uma tolerância de 2%.
Testes para a formação de hifas
um montante inicial de 10 6 células /mL em YPD + 20% FBS (soro Fetal de bovino, Sigma-Aldrich, Brasil) foi incubada a 37 ° C, com agitação giratório a 200 rpm. Após 3 h de incubação, as amostras das culturas foram misturadas com um volume igual de 10% de formaldeído para prender ainda mais o desenvolvimento e o índice morfologia significativo (MI) foi determinada [18]. Valores próximos de 1 indicam uma população de células de levedura esferoidais e valores próximos de 4 indicam uma população de células de hifas verdadeiras, com valores entre 1 e 4, indicando morfologias mistos ou pseudohifas.
Fosfolipase ensaio
actividade de fosfolipase foi estimada pela método de gema de ovo de agar [19], com inóculos preparado a partir de dia para o outro NGY (Neopeptone (Difco, Detroit, MI), 1 g /L, glucose 4 g /L e extracto de levedura 1 g /L) culturas padronizada para 2 × 10 5 células /mL.
Candida albicans
matando por neutrófilos polimorfonucleares PMN
isoladas de fresco a partir de amostras de sangue de um único voluntário saudável no dia da experiência [20] foram suspensos em meio essencial mínimo de Eagle (Gibco) + 20 mM de HEPES, pH 7,2, e normalizado para 8 × 10 5 PMN /ml. C. albicans
células cresceram durante a noite em NGY lavadas e ressuspensas a 5 x 10 6 leveduras /ml em HEPES-tamponado com meio essencial mínimo de Eagle contendo um décimo de volume de plasma humano fresco. Volumes iguais de PMN e suspensões de leveduras foram misturados e incubados a 37 ° C durante 3 horas com rotação a 50 rpm. A fagocitose de C. albicans
foram estabelecidas pela contagem em triplicado o número de leveduras dentro ou ligados em 100 PMNs [21].
Análise estatística
Os dados foram analisados usando o software estatístico "GraphPad", versão 3.0 . Os resultados foram apresentados como média ± desvio padrão, e as diferenças foram analisadas pelo teste de Mann-Whitney. Para todas as análises, P foi considerado um valor padrão de 0,05 eo intervalo de confiança de 95%.
Resultados
Os pacientes dados clínicos e demográficos dados demográficos
do paciente estão resumidos na Tabela 1. Para ambas as regiões, a maioria dos pacientes tinham hipertensão arterial como a doença de base mais freqüente. Além disso, a classe etária mais frequente foi de 35 a 64 anos (Tabela 1).
Microbiologia perfis de Candida spp
. em candidíase oral
A partir das cepas obtidas de Natal, RN (Nordeste), foi possível isolar leveduras de 70 de 111 pacientes (63,1%), enquanto que a partir de Maringa, 12 dos 43 (27,5%) Candida
foram obtidas culturas positivas spp. distribuição de espécies para ambas as regiões é descrito na Tabela 2. C. albicans
foi a espécie mais predominantes encontradas em ambas as cidades, seguido de C. tropicalis
. Em apenas um único paciente de Maringá foi possível isolar três cepas pertencentes a diferentes Candida
espécies (C. albicans
, C. glabrata
, C. tropicalis
) .table 2 Distribuição das espécies de Candida spp. isolado da cavidade oral de receptores de transplante renal de duas regiões diferentes geográficas do Brasil: Natal, RN e Maringá, PR
Espécies
Natal (n,%)
Maringá (n,% )
total (n,%)
Candida albicans
59 (77,6)
17 (22,4)
76 (100)
Candida dubliniensis
2 (100)
0 (0)
2 (100 )
Candida glabrata
2 (66,7)
1 (33,3)
3 (100)
Candida tropicalis
3 (75)
1 (25)
4 (100)
Candida orthopsilosis
2 (100)
0 (0)
2 (100)
Candida metapsilosis
Página 2 (100)
0 (0)
2 (100)
total
69 (78,4)
19 (21,6)
88 (100)
de nota, apenas uma amostra de cada paciente foram coletadas, com exceção de três pacientes diferentes da região do Sul do Brasil. De paciente 37, de deformação 06S foi obtido de saliva, enquanto a cepa 06 L de lesão oral. Paciente 38 teve dois de C. albicans
cepas de uma mesma lesão, mostrando dois fenótipos claros diferentes (10S, lisos e 10R, com colônias áspero). Paciente 40 mostrou foram obtidas duas lesões diferentes e duas estirpes, uma a partir da língua e uma outra das gengivas (15 T e 15 g, respectivamente) além de uma estirpe obtida a partir da saliva (15S).
ABC tipagem de Cândida albicans
DNA de todas as 76 cepas de C. albicans
e as cepas de referência ATCC90028 e SC5314 foi submetido à ABC digitação. Genótipo A foi o mais prevalente com 58 isolados (76,4%), seguido pelo genótipo C, com 15 cepas (19,27%) e genótipo B, com 3 isolados (3,9%; Tabela 3). A mesma tendência foi observada quando as linhagens obtidas a partir de cada região foram analisados separadamente: No Nordeste do Brasil, C. albicans
genótipo A foi o mais prevalente, com 42 isolados (71,2%), seguido pelo genótipo C (n = 14 isolados; 23,7%) e do genótipo B, com 3 estirpes (5,1%). A maior incidência de genótipo A também foi encontrado no Sul do país, com 16 isolados (94,1%), seguido pelo genótipo C (n = 1 isolado; 5,9%). C. albicans
B genótipo não foi observada para os isolados obtidos a partir desta região (Tabela 3) .table 3 Os pacientes incluídos neste estudo, região geográfica ABC genotipagem e virulência atributos de Candida albicans
Isolar número
condição clínica
procedência
ABC digitação
atividade fosfolipase PZ (cm)
Morfologia Index (MI)
No of C. albicans células fagocitadas por 100 PMN * (%)
1
Colonização
Natal
B
0,6 ± 0,07
2,46 ± 0,70
134 ± 15,3
2
Colonização
Natal
A
0,55 ± 0,04
3,43 ± 0,77
115 ± 14,6
3
Colonização
Natal
A
0,48 ± 0,06
3,22 ± 0,64
66 ± 7,9
5
A infecção
Natal
C
0,58 ± 0,02
2,23 ± 0,57
98 ± 6,7
6
Colonização
Natal
A
0,53 ± 0,01
2,24 ± 0,51
100 ± 12,5
8
Colonização
Natal
A
0,57 ± 0,04
1,86 ± 0,43
130 ± 19
10
Infecção
Natal
B
0,56 ± 0,12
2,17 ± 0,62
166 ± 8,4
11
Colonização
Natal
C
0,58 ± 0,08
2,15 ± 0,77
28 ± 3,5
12
Infecção
Natal
A
0,54 ± 0,02
2,46 ± 0,56
150 ± 11,1
13
colonização
Natal
C
0,6 ± 0,03
2,17 ± 0,65
126 ± 31,6
17
Colonização
Natal
A
0,52 ± 0,03
3,63 ± 0,63
98 ± 20,2
20
Colonização
Natal
A
0,44 ± 0,01
2,85 ± 0,81
86 ± 21,2
21
Colonização
Natal
A
0,4 ± 0,06
2,78 ± 0,92
114 ± 21,5
23
Colonização
Natal
C
0,53 ± 0,09
2,45 ± 0,67
101 ± 11,4
24
Infecção
Natal
A
0,51 ± 0,10
3,05 ± 0,74
132 ± 13,9
28
Infecção
Natal
A
0,55 ± 0,04
2,84 ± 0,80
165 ± 9,5
30
Colonização
Natal
C
0,52 ± 0,04
2,17 ± 0,62
119 ± 20
31
Colonização
Natal
A
0,49 ± 0,03
2,64 ± 0,82
129 ± 15
32
Colonização
Natal
A
0,49 ± 0,12
2,81 ± 0,65
123 ± 13,2
34
Colonização
Natal
A
0,52 ± 0,07
2,36 ± 0,64
156 ± 16,5
37
Colonização
Natal
B
0,57 ± 0,01
3,38 ± 0,80
124 ± 19,1
40
Infecção
Natal
A
0,51 ± 0,06
3,7 ± 0,56
142 ± 15,9
41
Colonização
Natal
A
0,54 ± 0,03
2,7 ± 0,69
172 ± 21,1
44
Infecção
Natal
A
0,48 ± 0,03
2,8 ± 0,77
176 ± 11,6
46
Colonização
Natal
A
0,46 ± 0,04
2,81 ± 0,77
172 ± 20,1
50
Colonização
Natal
A
0,54 ± 0,04
3,24 ± 0,88
157 ± 36,6
51
Colonização
Natal
A
0,51 ± 0,02
2 ± 0,43
130 ± 19,5
53
Colonização
Natal
C
0,53 ± 0,09
2,79 ± 0,71
132 ± 15,9
54
Colonização
Natal
A
0,47 ± 0,02
1,8 ± 0,40
132 ± 9,2
60
Colonização
Natal
C
0,57 ± 0,03
2,15 ± 0,36
146 ± 9
61
Colonização
Natal
A
0,49 ± 0,01
2,48 ± 0,75
142 ± 9,2
70
Colonização
Natal
C
0,51 ± 0,03
2,99 ± 0,50
140 ± 12,7
72
Colonização
Natal
C
0,46 ± 0,04
2,31 ± 0,61
136 ± 9
82
Colonização
Natal
C
0,55 ± 0,03
3,36 ± 0,93
130 ± 13,2
85
colonização
Natal
C
0,56 ± 0,04
3,15 ± 0,83
144 ± 9,5
107
Colonização
Natal
C
0,57 ± 0,01
2,39 ± 0,63
156 ± 10.1
06A
Colonização
Maringá
A
0,5 ± 0,02
2,34 ± 0,71
80 ± 17,4
06 L
Infecção
Maringá
A
0,56 ± 0,07
2,94 ± 0,58
75 ± 8,7
10Li
Colonização
Maringá
A
0,55 ± 0,01
2,42 ± 0,70
176 ± 6,1
10S
Colonização
Maringá
A
0,64 ± 0,01
2,54 ± 0,76
105 ± 14,7
12A
Colonização
Maringá
A
0,49 ± 0,02
3,3 ± 0,79
59 ± 16,8
12 L
Infecção
Maringá
A
0,51 ± 0,05
3,2 ± 0,68
90 ± 13,2
15A
Colonização
Maringá
A
0,42 ± 0,02
2,96 ± 0,83
116 ± 27,1
15G
Infecção
Maringá
A
0,42 ± 0,03
3,13 ± 0,81
86 ± 21,9
15 L
Infecção
Maringá
A
0,47 ± 0,08
2,58 ± 0,68
76 ± 16,5
18A
Colonização
Maringá
C
0,56 ± 0,11
3,05 ± 0,67
102 ± 11,2
111 L
colonização
Natal
C
0,55 ± 0,03
2,6 ± 0,70
80 ± 17,4
111R
Colonização
Natal
C
0,6 ± 0,15
4 ± 0,00
11 ± 3,2
ATCC90028
Referência
A
0,7 ± 0,08
3,82 ± 0,5
158 ± 17,5
SC5314
Referência
A
0,52 ± 0,04
3,28 ± 0,81
137 ± 20,6
os isolados foram obtidos a partir da cavidade oral de receptores de transplante renal de Natal, RN e Maringá, PR, Brasil.
Candida albicans
digitação de microssatélites contra o ABC genotipagem
Foram selecionados aleatoriamente 48 isolados de C. albicans
incluindo algumas estirpes do genótipo a (21 de Natal e 10 de Maringá) a todas as outras estirpes pertencentes aos genótipos B e C de ambas as regiões e executadas genotipagem de microssatélites. O DNA genómico de todos os 48 isolados foi amplificado com sucesso com o iniciador M13, que tem como alvo as sequências repetitivas do genoma. A amplificação de ADN gerados padrões de bandas bem definidas, que variam de 100 pb até 2 kb. A técnica de microssatélite mostrou poder discriminatório suficiente para reconhecer variação intraespecífica (Figura 1). Como esperado, as estirpes de C. albicans
, SC5314 e ATCC90028 de controlo externos, foram colocadas em agrupamentos completamente diferentes por análise do dendograma realizada utilizando GelCompar II, provando a eficiência da técnica de separação em estirpes isoladas a partir de diferentes áreas geográficas. Estas estirpes de controlo apresentaram 75% de semelhança e foram colocados em conjunto dentro de um conjunto diferente de todos os outros isolados clínicos (figura 1). Figura 1 método grupo par não ponderada com médias aritméticas dendrograma com 2% de tolerância de 50 cepas de Candida albicans isolados clínicos.
Nós não poderia detectar qualquer cluster específico de qualquer colonizar ou infectar estirpes. Além disso, em ambos os casos, as estirpes com 100% de similaridade obtidos a partir de doentes diferentes foram encontrados. Em relação às comparações de parentesco genético dentro das duas regiões geográficas diferentes do Brasil, pudemos observar um cluster enriquecido para Maringa (Sul), onde 80% das cepas foram colocados juntos. Além disso, eles variaram de 80% até 93% de similaridade entre eles. Outro Outro achado interessante é associado com algum grau de correlação observada entre o tipo ABC de C. albicans
ea elevada percentagem de similaridade entre estes isolados quando microssatélites iniciador M13 foi usado. Na maioria dos casos, as estirpes com idêntica percentagem de similaridade determinada com o iniciador M13, também tinha o mesmo A ou C genótipo (excepto para as estirpes 02 e 85 de Natal, bem como 15 T e 18A de Maringa; genótipos A e C em ambos casos). Além disso, C. albicans
estirpes genótipo C de Natal foram colocados dentro de dois conjuntos separados bem definidos, com elevada parentesco comprovada (mais do que 90% de semelhança dentro do mesmo grupo). Em relação ao genótipo B, dois dos três isolados mostrou uma similaridade de 94%, sendo colocado no mesmo grupo (Figura 1).
Além disso, quando diferentes estirpes foram obtidas a partir de diferentes amostras do mesmo paciente, todos eles tinham o mesmo genótipo ABC (genótipo a). atributos No entanto, microssatélites utilizando o iniciador M13 mostrou maior poder discriminatório, porque estas estirpes não foram consideradas idênticas, com a mais recente técnica, mostrando algum grau de variabilidade genética, quando este método foi utilizado.
virulência de Candida albicans
A, B e genótipos C Compra de todos os fatores de virulência testados, só realizada análise estatística para a comparação entre as estirpes pertencentes aos genótipos a e C, por causa do baixo número de isolados pertencentes ao genótipo B encontrados. Em relação à fosfolipase de produção, todas as estirpes foram capazes de produzir a enzima, independentemente se eles foram obtidos a partir de episódios de colonização ou infecção. Para o genótipo A, uma média de 0,51 ± Pz 0,04 foi obtido, enquanto que para o genótipo C, uma média de 0,55 ± 0,05, enquanto que para o genótipo B, a média Pz foi de 0,57 ± 0,07. Não foram encontradas diferenças estatísticas quando estirpes pertencentes aos genótipos A e C foram comparados (Tabela 3).
Quando o índice morfologia (MI) foi utilizado para marcar a morfologia de células, não há diferenças claras poderia ser observado para os três diferentes A, B ou genótipos C. A capacidade das estirpes para alterar a morfologia de células de hifas bud quando cultivadas na presença de meio YPD + 20% de FBS foi verificado para as estirpes pertencentes às três genótipos referidos. As células foram encontrados predominantemente como pseudo, com média MI variando de 2,66 ± 0,61 (genótipo C) para 2,77 ± 0,69 (genótipo A). A média MI isolados de genótipo B foi de 2,67 ± 0,71. Não foram observadas diferenças estatísticas entre os isolados (Tabela 3).
Nós também investigou a capacidade das diferentes cepas de resistir à fagocitose por PMNs. Portanto, o número de células de C. albicans
fagocitadas por 100 PMN foi determinada após três horas de co-incubação de ambas as células. C. albicans
genótipo C foi mais resistente ao ataque de PMN. Estirpes pertencentes ao genótipo B teve uma média de 141,33 ± 14,27 células fagocitadas por 100 PMN. Estirpes pertencentes ao genótipo C eram significativamente mais resistentes ao ataque das células fagocíticas do que os isolados pertencentes ao genótipo A (média de 109,93 ± 12,29 121,67 ± 16,06 em relação, respectivamente; Tabela 3). Atributos
virulência de Candida albicans
linhagens obtidas a partir de duas diferentes regiões geográficas do Brasil (Nordeste e Sul).
Quando os fatores de patogenicidade foram comparados entre todas as linhagens obtidas a partir das duas regiões geográficas, as linhagens obtidas a partir de Maringa (Sul), expressa de forma mais eficiente de todos os fatores de virulência avaliada in vitro. Esta diferença foi considerada estatisticamente significativa para a resistência à fagocitose por PMN (Tabela 4). Curiosamente, 40% dos isolados obtidos a partir de Maringá foram obtidos a partir de lesões, enquanto que apenas 18,4% dos isolados de Natal foram infectando (Tabelas 3 e 4) quatro atributos .table de virulência de Candida albicans isolados obtidos a partir da cavidade oral de pacientes receptores de transplante de rim 0,05. [30].
