Abstract
Fundo
aftosas recorrentes estomatite (RAS) é um ulcerativa prevalente e desordem dolorosa da cavidade oral com etiologia desconhecida e para o qual existe tratamento eficaz está disponível.
o presente estudo teve como objetivo avaliar a segurança ea eficácia de AphtoFix®, um novo creme de úlcera na boca, que foi desenvolvido para ajudar a tratar RAS. Antes de lançar o produto no mercado, foram realizados dois estudos iniciais de avaliação da segurança.
Sujeitos e métodos
Em um primeiro estudo, a biocompatibilidade in vitro de AphtoFix® foi avaliada em modelos de tecido gengival humana reconstruída de acordo com as diretrizes da ISO 10993. em um segundo estudo, a tolerabilidade de AphtoFix® foi avaliado em 20 indivíduos durante uma aplicação diária de 4 semanas na boca. O terceiro estudo investigou tanto a segurança ea eficácia do tratamento AphtoFix® em 19 pacientes que sofrem de RAS. Este estudo foi realizado em conformidade com a Declaração de Helsinki.
Resultados Os resultados do estudo in vitro mostraram que a biocompatibilidade AphtoFix® creme de úlcera na boca não induziu citotoxicidade detectável e irritação. Estas observações foram confirmados no estudo de tolerabilidade 4 semanas onde nenhum indesejada das reacções adversas foram notados. Os resultados do estudo de eficácia clínica pós-mercado demonstrou uma clara redução no tamanho da úlcera da linha de base após 3 dias de tratamento (p Art & lt; 0,05). redução da intensidade da dor também foi observado em todos os sujeitos.
Conclusão A aplicação de AphtoFix® não induziu quaisquer reacções da pele ou mucosa indesejados. Estes resultados iniciais demonstram que AphtoFix® é segura e eficiente em reduzir o tamanho da úlcera e diminuindo a intensidade da dor induzida por úlceras.
Registro de ensaios
registro de ensaios clínicos Índia Nr. CTRI201408004918, Data de registro: 22/08/2014
Palavras-chave
material suplementar aftosa úlcera aftas cura eletrônico estomatite aftosa
A versão online deste artigo (doi:. 10 1186 /s12903-016 -0177-0) contém material suplementar, que está disponível para usuários autorizados.
Introdução
Recurrent estomatite aftosa (RAS) é uma doença ulcerativa generalizada da mucosa oral caracterizada por uma rodada doloroso, úlceras rasas com bem definida margem eritematosa e pseudomembranosa centro cinza-amarelada [1]. RAS afeta 5-25% da população e mais frequente em pacientes entre 10-40 anos de idade [2-9]. Este tipo de úlcera afeta mulheres e indivíduos de classes socioeconômicas mais elevadas [2, 10, 11]. RAS
é classificada como menor, maior e herpetiforme. Setenta a 87% de todos os casos RAS são menores [12, 13]. Após 24 a 48 h precede o desenvolvimento de uma úlcera aftosa menor, os indivíduos podem experimentar uma picada ou sensação de queimação na mucosa. Tipicamente, as úlceras estão a menos de 1 cm de diâmetro e menos do que cinco ocorrer em qualquer uma vez. Essas úlceras são auto-limitadas e resolver dentro de 7-10 dias sem cicatrizes [1, 12, 14-16].
Major aftas são maiores e causar úlceras mais profundas. Eles costumam levar mais de um mês para curar, e muitas vezes deixar uma cicatriz. Estes geralmente desenvolvem após a puberdade com recorrências freqüentes. ulcerações herpetiforme são a forma mais grave. Caracteriza-se por pequenas, numerosas, 1 a 3 mm lesões que se formam aglomerados. Eles geralmente curar em menos de um mês sem cicatriz [17].
RAS é uma desordem difíceis de tratar. Todas as terapias são destinadas a diminuir os sintomas dolorosos e duração das úlceras [18, 19]. A dor é subjetiva e depende de vários fatores, como experiência pessoal, idade, social, fatores étnicos e habilidades de percepção [20], e os pacientes podem procurar o conselho de uma variedade de fontes no que diz respeito a terapêutica adequada e, muitas vezes auto-medicar com uma gama de agentes [21]. Na verdade, antibacteriana tópica ou sistémica, tal nos clorexidina, anti-inflamatória, imunomodulador, ou tratamentos sintomáticos são utilizados no entanto, tais tratamentos não são totalmente fiáveis [12, 19, 22-26]. O processo inflamatório
desempenha um papel importante no RAS . Neutrófilos e infiltração de células mononucleares na lâmina determinar as características histológicas primários [1, 27]. disfunção imune local exerce também um papel significativo no desenvolvimento de RAS [28, 29]. A presença da flora oral anormais foi associada a uma resposta imune aberrante e inflamação é por isso que as bactérias orais desempenhar um papel patogénico primário no desenvolvimento de RAS. Devido ao potencial de etiologia multifactorial e fisiopatologia, o agente terapêutico óptimo deveria idealmente combinar vários agentes bioactivos [28, 30].
Vários agentes tópicos estão disponíveis para o alívio sintomático como antibióticos, anestésicos locais, anti-histamínicos, anti-non-steroidal inflamatórios, preparações enzimáticas, as gamaglobulinas e imunossupressores. No entanto, o problema situa-se que a eficácia da maioria destes agentes não tem sido adequadamente avaliado em ensaios clínicos concebido e controlado [12, 15, 29, 31-34].
AphtoFix® creme úlcera na boca é uma nova geração de creme úlcera boca com propriedades de protecção, bem como o adesivo que melhoram a cicatrização da úlcera. As propriedades adesivas de AphtoFix® são derivados da goma de celulose e cálcio /sódio PVM /MA de copolímero, que modificam as propriedades físicas do creme em contacto com a humidade para criar uma almofada fina, elástica contra úlceras de pressão. AphtoFix® creme de úlcera na boca contém ingredientes que ativam em contato com a saliva bocas. Isso permite que o creme para criar uma camada protetora e duradoura sobre a área da úlcera.
O objetivo deste estudo é avaliar a segurança e eficácia de AphtoFix na gestão da RAS. A segurança de AphtoFix® foi avaliada em primeiro lugar testando a citotoxicidade e irritação na produção in vitro reconstruídas tecido gengival humano de acordo com a ISO10993 e em segundo lugar através da aplicação deste produto em 20 indivíduos saudáveis durante 4 semanas.
A eficácia clínica de AphtoFix® foi estudada sobre 19 indivíduos que sofrem de RAS. A maioria dos indivíduos tem ulceração aftosa recorrente, que tendem a ser de outra forma saudável, sem sinais de doença sistêmica (minor úlcera). parâmetros de úlcera, como o tamanho, a intensidade da dor ea duração de cada úlcera são avaliados neste estudo
Métodos
Avaliação in vitro da biocompatibilidade de acordo com ISO10993-part1
Materiais
Materiais utilizados:. tecidos epiteliais gengivais humana reconstruída
neste estudo foi utilizado o modelo reconstruído gengival humano epitélio tridimensional (STERLAB, França, número do lote 1301 GEN 01) que consiste em queratinócitos gengivais humanos normais que foram cultivadas durante 5 dias em 0,5 cm
2 filtro inserções de policarbonato na interface ar-líquido. O modelo gengival STERLAB apresenta uma morfologia histológica comparável à do tecido humano in vivo. Após 5 dias de reconstrução de tecidos, os tecidos gengivais foram transferidos sobre um gel de agarose e incubadas à temperatura ambiente durante 24 h (de simulação de condições de expedição). Inserções foram removidas a partir do gel de agarose e transferidas, em 1 mL de meio de crescimento. Em seguida, os tecidos foram colocados a 36,5 ° C /5% de CO 2 durante 24 h.
Método de análise
Ensaio de citotoxicidade (de acordo com ISO10993-05 para epitélio gengival)
cada substância de teste (AphtoFix®, negativos e controlos positivos) foi aplicado localmente em dois tecidos gengivais humanos reconstruídos durante 24 h a 36,5 ° C /5% de CO 2. Depois da exposição, todos os tecidos foram lavados com tampão fosfato salino. Em seguida, a viabilidade celular foi determinada por incubação dos tecidos durante três horas com solução de 300 uL de MTT (0,5 mg /mL). Após incubação o MTT, os tecidos foram lavados 3 vezes com PBS e, por conseguinte, extrai-se com 1 ml de isopropanol. A densidade óptica foi quantificada por espectrofotometria a 550 nm de comprimento de onda. viabilidade quantitativa foi determinada como uma percentagem de controlo negativo.
ensaio Irritação (de acordo com ISO10993-10 para epitélio gengival)
Cada substância de teste (AphtoFix®, controlos negativos e positivos) foram aplicados topicamente em dois tecidos gengivais reconstruídos durante 2 h, seguido por uma recuperação de 42 h de incubação a 36,5 ° C /5% de CO2. Após a exposição, os tecidos foram lavados com tampão fosfato salino. Em seguida, a viabilidade celular foi determinada por incubação dos tecidos durante três horas com solução de 300 uL de MTT (0,5 mg /mL). A densidade óptica foi quantificada por espectrofotometria a 550 nm de comprimento de onda. viabilidade quantitativa foi determinada como uma percentagem de controlo negativo.
In vivo avaliação de segurança
Uma vivo ensaio clínico em foi conduzido em 20 voluntários saudáveis, para avaliar a segurança de aplicação AphtoFix® durante 4 semanas. A população do estudo incluiu 6 homens e 14 mulheres. A média de idade deste grupo é 38.45 anos. O objetivo deste estudo foi examinar a tolerabilidade do AphtoFix® creme de úlcera na boca de acordo com critérios de teste clínico-dermatológicas. Antes do início deste julgamento, todos os participantes foram examinados para eventual irritação da pele por 2 especialistas em dermatologia e Venereologia de Dermatest® Research Institute GmbH. Somente indivíduos sem quaisquer doenças de pele patológicos foram incluídos no grupo de teste. Os participantes puderam consultar os médicos encarregado da trilha em qualquer dia, em caso de qualquer alteração objectivos ou subjectivos de pele foram anotados.
Os participantes do teste foram instruídos a usar o produto na boca (aplicação tópica na mucosa oral) 2 a 4 vezes por dia durante 4 semanas. Uma pequena quantidade de creme foi aplicada nos lábios, bochecha, língua e mandíbula. Além disso, os participantes também foram aconselhados a não usar qualquer outro produto do cuidado da pele na área de teste durante o curso do período de teste de 4 semanas.
In vivo eficácia e avaliação da segurança dos AphtoFix®
População do estudo
o estudo foi realizado no Hospital de multiespecialidades Poojan e do Instituto APL de Laboratório clínico & amp; Investigação (Ahmedabad-380052, Gujarat, Índia). 22 indivíduos foram selecionados e incluídos no estudo de acordo com critérios de inclusão e exclusão
Os critérios de inclusão:.
(1) Homem ou indivíduos do sexo feminino com 18 - 65 anos de idade; (2) o tamanho da úlcera boca & gt; 2 mm em local de fácil acesso na boca permitindo fácil avaliação e tratamento; (3) Sob com início da ulceração da boca dentro de 48 h; (4) Sob que concordou em não usar qualquer outro medicamento para o tratamento de úlcera na boca durante o período de estudo; (5) Sob disposto a cumprir com o cronograma e procedimentos de estudo; (6) representante Assunto ou legalmente aceitáveis (LAR) de sujeito disposto a assinar e datar seu consentimento informado para participar do estudo. No entanto, se o sujeito /LAR de assunto seria analfabeta, a testemunha imparcial iria assinar o Formulário de Consentimento Informado (ICF) Os critérios de exclusão
:.
(1) indivíduos com história de alergia para ingredientes presentes em AphtoFix® ®; (2) Os indivíduos com quaisquer procedimentos dentários invasivos dentro de 2 semanas antes da triagem visita; (3) História de doença crônica não controlada (por exemplo, doença hepática crônica, doença renal crónica); (4) O uso de qualquer outra medicação para tratar úlceras na boca no episódio atual; (5) Participação em qualquer outro estudo clínico durante os últimos 30 dias; (6) Sujeito a qualquer condição que, na opinião do investigador torna o assunto inadequado para a inclusão; (7) Sujeito é uma mulher que está grávida ou disposto a ficar grávida, não está pronto para usar métodos contraceptivos durante o período experimental, ou está a amamentar.
De 22 de indivíduos recrutados, 19 indivíduos foram analisados e 3 indivíduos foram excluídos a partir da análise, uma vez que foram perdidos durante o acompanhamento e, portanto, não é considerado para análise estatística.
aprovação ética e consentimento informado
a presente pesquisa conformados com a Declaração de Helsínquia, e ético liberação e aprovação carta foi obtida a partir de Sangini Hospital Ética Comissão na Índia emitido pelo Departamento de Saúde e Serviços Humanos (DHHS-IORG0007258), Instituto de Defesa do Human Research (OHRP-IRB00008709) and Drug Controller general of India (DCGI-ECR /147 /Inst /GJ /2013).
Todos os participantes receberam uma explicação completa do estudo e forneceu consentimento informado por escrito. As informações fornecidas aos sujeitos foi pré-aprovado pela IEC (Comissão de Ética indiana).
Os sujeitos foram informados sobre o propósito, procedimentos a serem realizados, potenciais perigos e direito do sujeito a uma indemnização em caso de lesão relacionada tentativa e morte antes de participar no estudo. O formulário de consentimento informado e folha de informações do paciente incluiu todas as informações necessárias para cumprir as diretrizes ICH-GCP e recomendações publicadas pelo Governo da Índia.
Indivíduos foram autorizados a fazer perguntas e esclarecer suas dúvidas sobre qualquer aspecto do estudo. Assinar o formulário de consentimento informado significa que os sujeitos confirmou a sua participação voluntária e sua intenção de cumprir com o protocolo e as instruções do investigador e para responder a todas as perguntas no âmbito do estudo. Compra de qualquer alteração no formulário de consentimento informado (quer devido à geração de novas informações ou devido a alterações processuais) a autorização prévia do IEC e aprovação de todos os investigadores foram consideradas obrigatórias.
Protocolo do estudo
Após a assinatura do documento de consentimento informado, os indivíduos foram selecionados para dados demográficos, história médica, clínica e exame físico, incluindo os sinais vitais, objetivas e avaliações subjetivas. Total de 19 indivíduos foram incluídos no estudo. Como todos os indivíduos apresentavam úlceras dentro de 48 horas de duração antes da triagem visita, todos os indivíduos foram incluídos na visita de triagem, daí triagem visita (visita 1) e visita de inclusão para todos os sujeitos foram mesmo.
Tratamento com a boca AphtoFix® creme de úlcera foi iniciada imediatamente após a inscrição. Uma pequena quantidade de creme foi recolhido na ponta do dedo, apertando e aplicado sobre a área afectada (úlceras da boca) usando uma acção de deslizar para se assegurar de que abrange toda a área de ulceração. O creme foi aplicado várias vezes durante o dia (até 4 aplicações por dia) para o máximo de 14 dias, habitualmente após as refeições e antes de ir dormir.
Aplicação de creme foi continuada pelos sujeitos até redução no tamanho e os sintomas da úlcera . Durante a visita de inscrição (visita 2 dia1), em cada visita de acompanhamento (Visita 3 (dia 4) e visita 4 (dia 7)) de medição e no final da visita de estudo (visita 5), a um exame clínico, incluindo os sinais vitais bem como todas as avaliações subjectivas e objectivas foram realizadas. Os sujeitos foram avaliados quanto à examinação física, no tempo de cura completa da úlcera. avaliação de eventos adversos foi realizado na Visita 3, Visita 4 e Visita 5 (dia 14). avaliação
eficácia foi feita através da avaliação dos resultados primários, tais como a média de redução do tamanho da úlcera, a mudança no número de úlceras e intensidade da dor redução (VAS) avaliada na Visita 3 (Dia 4), Visita 4 (dia 7), e Visita 5 (dia 14) e em relação ao basal. Os desfechos secundários são a avaliação da duração da úlcera (dias necessários para a cicatrização da úlcera), o número ea frequência de aplicação obtidos a partir do diário assunto e, finalmente, a qualidade de vida (QV). A avaliação da qualidade de vida foi avaliada por meio de um questionário dividido em 3 domínios, tais como dor e nível funcional e, finalmente, medicação e tratamento limitação de temas de durante o período de tratamento (arquivo adicionais 1: Anexo I).
Análise estatística Todos
variáveis de medição foram expressos como média e desvio padrão e as variáveis categóricas foram expressas em percentagem. parâmetros de eficácia foram analisados utilizando os combinados de pares Wilcoxon signed rank test.
redução na dor e no número de úlcera da linha de base para cada visitas de acompanhamento (visita 3 e 4) e no final da visita de estudo (visita 5) foi analisada utilizando emparelhado teste "t" ou teste de Wilcoxon, dependendo da distribuição dos dados. teste de normalidade (teste de Kolmogorov-Smirnov ou teste de Shapiro-Wilks) foi utilizado para verificar a distribuição dos dados.
P
valores inferiores a 0,05 foram considerados diferença estatisticamente significativa. Os dados foram apresentados como média ± desvio padrão /erro padrão da média com intervalo de confiança de 95%.
Resultados Online em avaliação de segurança biocompatibilidade in vitro
Não foi observado efeito citotóxico nos tecidos gengivais reconstruídos após 24 horas de contacto com AphtoFix ®. A viabilidade foi de 95,81% em comparação com o controlo positivo mostrando uma viabilidade igual a 1,85%. Além disso, o produto AphtoFix® também não foi considerado irritante. A viabilidade dos tecidos gengivais humanos reconstruída após 2 horas de contacto com AphtoFix®, seguido por uma recuperação de 42 h de incubação foi de 92,55% em comparação com o controlo positivo que demonstra uma viabilidade igual a 51,75%. Os resultados são apresentados na Tabela 1 1.Table de citotoxicidade e irritação ensaios
Ensaios
controle
negativo PBS
Controlo positivo SDS 1%
AphtoFix
citotoxicidade (Viabilidade)
100%
1,85%
95,81%
Irritação (Viabilidade)
100%
51,75%
92,55%
In vivo avaliação da segurança de AphtoFix® em indivíduos saudáveis
Todos os 20 voluntários saudáveis toleraram o AphtoFix produto ® creme de úlcera na boca muito bem durante o curso do teste de quatro semanas sob dermatológico e observação clínica. Não houve reações indesejadas ou mesmo patológicos. Portanto, pode-se concluir que o uso de AphtoFix® creme de úlcera na boca não conduz a quaisquer reacções cutâneas ou mucosas indesejados.
In vivo eficácia clínica e avaliação da segurança de AphtoFix® em pacientes que sofrem de RAS
Os desfechos primários
as características demográficas da população do estudo
Dezenove pacientes foram incluídos no estudo (16 homens; 03 fêmeas). A média (± DP) de idade dos sujeitos do estudo foi 27.95 ± 7,75 anos (variação 18-46).
redução do tamanho da úlcera
Dentre 19 indivíduos, 17 indivíduos foram diagnosticados com uma única úlcera e os restantes 2 indivíduos tinham 2 úlceras. Todos os indivíduos tinham tamanhos de úlcera que variam de 4 mm a 7 mm. A redução gradual no tamanho da úlcera foi medida após o tratamento em cada visita pós-tratamento. redução gradual significativa no tamanho da úlcera foi observada em cada visita pós-tratamento, em comparação com os valores basais. Na visita 4, todas as úlceras na boca foram completamente desapareceu em 18 indivíduos. No 1 sujeito restante, a úlcera desapareceu no dia 13. A diferença de tamanho da úlcera entre os valores iniciais e visitar 4 foi estatisticamente diferente: 4,33 ± 0,91 mm contra 0,25 ± 0,71 mm, p Art & lt; 0,05).
Uma vez que nenhum outro medicamento que poderia impactar evolução úlcera na boca era permitido durante o estudo, a eficácia observada é exclusivamente relacionada apenas com a boca AphtoFix® aplicação de creme úlcera. A média de mudança no tamanho da úlcera é mostrado na redução do tamanho da tabela 2.Table 2 Úlcera
As visitas de estudo
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