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O Microbiome Humano Através de um Oral Healthcare Lens

 
INTRODUÇÃO AO MICROBIOMEHave HUMANO você já pensou em si mesmo como um porto-seguro microbiana? De acordo com a ciência da nova era, você deve. De fato, os últimos esforços para definir o microbioma humano demonstraram que abrigam número aparentemente infinito de inquilinos microscópicas.

É esta relação inter-reino que levou a uma reforma de o que é realmente ser humano incluindo redefinindo o nosso nome do nosso ancestral Homo erectus
contrapartida, a 21 século "Super-organismo." Tal como definido pela Eberl G. e Sleator RD., um super-organismo é aquele em que o ser humano não é mais visto como separado de seus micróbios residentes. 1,2 Em outras palavras, nós somos uma amálgama (trocadilho intencional) de eucariotas (nucleadas) e procariotas (anucleadas) células microbianas.

Certamente, o advento da "ômicas" tecnologia como Metagenomics e de vários bilhões de projectos transnacionais de dólares, incluindo Europa & rsquo; s MetaHIT (Metagenomics do intestinal Tract) e Instituto Nacional de Saúde & rsquo EUA; s Projeto Microbioma Humano (HMP) revelaram que estão cheias de micróbios com certos habitats corpo considerados "pontos quentes" para a colonização, incluindo a pele, cavidade oral, intestino e do trato urogenital. 3,4

se você gostaria de acreditar ou não, cada e cada um de nós abriga micróbios em uma proporção de 10 partes células microbianas a linha germinal uma parte e células somáticas, o que equivale a dizer que são micróbios 10 por cento humanos e 90 por cento. 5 Essa quantidade numérica traduz em um valor aproximado peso de três a cinco libras ou um a dois por cento da nossa massa corporal. 6 Na verdade, estes micróbios conter mais de 8 milhões de proteína microbiana que codifica genes, ultrapassando nossa própria em mais de 360 ​​vezes. 7 Ele é esses números que levaram alguns a sugerir que somos em essência mais microbiana que humana (pelo menos do ponto de vista celular) e como Johnathan Eisen resumidos na sua recente Ted Talk, "há mais massa nos micróbios do que a massa em nossos cérebros ". 8

Apesar dos tempos modernos inovações tecnológicas para o microbioma humano, não seria uma discussão adequada dos consórcios microbianos, especialmente a partir de uma perspectiva de saúde oral, sem pagar homenagem a Antony van Leeuwenhoek. Em sua obra seminal, ele estudou placa que ele descreveu como "um pouco de substância branca, que é grosso como se o & lsquo;. Twere massa" Ele examinou ainda mais a placa microscopicamente, que o levou a conta em suas próprias palavras que os micróbios foram contidos no biofilme. "Eu, então, quase sempre viu, com grande admiração, que, na referida matéria havia muitos animalcules de vida muito pouco, muito linda a-comovente." É nestas observações que foram creditados como os primeiros relatos de micróbios vivos de um hospedeiro humano . 9

como podemos adquirir uma "mistura variada microbiana" tão grande e variada ou em outras palavras, selva microbiana, como Ed Yong observou? 10 até agora, o paradigma predominante era de que in utero
que são estéreis e nós adquirir nossos parceiros microbianas no nascimento. No entanto, estudos recentes, já em 2008, ter anunciado novos insights, sugerindo que não pode ser completamente carregado estéril e, na verdade, a colonização da paisagem humana começa antes do nascimento. 11,12 Independentemente destes novos achados, o que tem sido bem estabelecido é que o modo de entrega, quer por via vaginal ou cesariana entregue, influencia os agentes colonizadores iniciais de um hospedeiro. A mãe & rsquo; s flora vaginal e fecais habitam aqueles que são fornecidos através de processos de parto naturais e do meio ambiente afeta seção partos cesarianos 13 Como resultado, existem disparidades inter-individuais em nossos colonizadores logo no nascimento
<.. p> no campo da odontologia, que muitas vezes são ensinados a noção de que nossos cuidadores são uma importante força motriz do tipo de bactérias que são encontrados habitando a boca. Na verdade, seria uma receita prudente (embora controversa) para um para sugerir que os pais escolhem suas babás sabiamente. Heck, dar-lhes um exame microbiana oral, se necessário. Para reiterar este conceito do ponto de vista de pesquisa, estudos como o de Parisotto TM. et ai. demonstraram que as crianças estão em maior risco de colonização da cavidade oral com Streptococcus mutans
, um dos jogadores-chave na formação de cáries, quando o conteúdo salivar de suas mães também abriga níveis mais elevados de S . mutans
14 Da mesma forma, uma recente revisão da literatura mostrou que o genótipo ou & lsquo;. selo genética & rsquo; do S. mutans
espécies encontradas em crianças foi idêntico ao dos seus homólogos maternos. 15 Portanto, este mais uma vez mostra a transmissão e inoculação do meio oral com bactérias potencialmente patogénicas de cuidador infantil.

embora tradicionalmente visto como patogénico, especialmente a partir de uma perspectiva de atendimento odontológico, nós, humanos, pode derivar vários benefícios para a saúde dos seus parceiros microbianos, que incluem mas não estão limitados a: regulação da produção de nutrientes e vitaminas, que confere resistência à colonização de micróbios patogénicos, e acolhimento imunomodulação. 16,17,18 com efeito, são esses efeitos benéficos que levaram os investigadores a estudar o potencial de manipular as bactérias hospedeiras na saúde e na doença, a fim de criar um ambiente mais favorável para a colonização de micróbios benéficos. Este tem sido um impulso na desova do multi-bilionária indústria probiótico atual
por que alguém deveria se importa, agora você pode estar se perguntando & mdash.?; qual é a utilidade deste conhecimento e como ele me afeta como um dentista? A resposta simples é que precisamos investigar o microbioma para entender o que está lá fora, tanto na saúde e na doença. Na verdade, a aquisição desse conhecimento é fundamental para a pesquisa sobre como manipular o microbioma para um subtipo mais saudável, particularmente em condições dentárias. Este ponto será mais elucidado mais tarde no artigo.

Para resolver a questão do que está lá fora, na saúde e na doença, é preciso primeiro compreender o ambiente em que os micróbios são testados em diversos locais do corpo. Embora simplista no contexto deste artigo, catalogar os micróbios em vários locais do corpo é uma tarefa difícil que requer amplos esforços transnacionais com os participantes, incluindo Europa & rsquo; s MetaHit (Metagenomics do Intestinal Tract 2008) e Estados Unidos & rsquo; HMP (Projeto Microbioma Humano 2007-presente), que ao longo de anos de pesquisa têm investigado tanto o microbioma intestinal e que de vários locais do corpo, respectivamente.

Como esses pesquisadores criando uma biblioteca de conhecimento das espécies de bactérias encontradas em humanos? A tecnologia a ser empregada pode ser pensado como semelhante ao processo de identificação de seres humanos na cena do crime por meio de perfis de ADN (isto é, impressão digital genética). A única diferença é que estamos a identificar bactérias utilizando a detecção do ADN bacteriano.

Em essência, o ADN bacteriano isolado a partir de uma amostra obtida a uma cavidade corporal, em particular usando kits comerciais ou técnicas que não isolar o ADN eucariótico. Por isso, nenhum ADN humana é encontrado na amostra.

Por sua vez, para fora de toda a amostra de ADN bacteriano obtido, um determinado gene chamado 16S ARNr (ARN ribossómico) actua como uma impressão digital que pode ser usado para identificar o subtipos particulares bacterianas em toda a amostra. Este gene é único na medida em que contém locais conservados (relativos a todas as bactérias) e sítios variáveis ​​(único para nomeadamente géneros bacterianos ou espécies) que podem ser segmentados através de etiquetas moleculares para ver quais as bactérias estão presentes na amostra clínica (Fig. 1) .

Figura 1. 16S rRNA sequenciamento para análise da comunidade microbiana.

Usando primers, que são as marcas moleculares, a amostra de DNA bacteriano é exposto e depois vinculados pelas suas tags específicas. Depois de a ligação entre os iniciadores e 16S rRNA alvo ocorre bacterianas, o gene de rRNA 16S é amplificado (isto é, muitas são feitas cópias do gene de rRNA 16S). Após a amplificação, sequenciamento de regiões variáveis ​​específicas do gene 16S rRNA é concluída para permitir para a resolução das coortes de bactérias específicas presentes na amostra polimicrobiana.

A análise é então realizada para comparar as amostras sequenciadas das identidades microbianas desconhecidos para uma base de dados de sequências conhecidas que correspondem a determinados grupos microbianos. Conhecimento do micróbio & rsquo particular; presença s é obtido quando a sequência coincide com o do banco de dados como as bactérias & rsquo; "impressão digital" específica s é correspondida

Esta tecnologia "omics" não deve ser subestimada.. Na verdade, através da utilização da técnica de sequenciamento de 16S rRNA, o nosso conhecimento do repertório do microbioma humano eo consórcio microbiano oral tem dramaticamente evoluiu. Isto é especialmente importante considerando que as técnicas tradicionais, tais como cultura, produziram baixos retornos na arena microbiana, com menos de metade dos micróbios na cavidade oral tendo a capacidade de ser cultivada. 19
ORAL MICROBIOME IN SAÚDE & amp; DISEASETransitioning a uma maior compreensão do microbioma oral, é importante notar que a pesquisa recente revela que a cavidade oral em si é o lar de mais de 700 espécies de bactérias diferentes e, destes, 49 por cento foram nomeados, 17 por cento permanecem sem nome, mas cultivado, e 34 por cento são conhecidos apenas como espécies cultivadas. 20 Alternativamente, outras estimativas sugerem que, atualmente, mais de 50 por cento do microbioma oral, permanece inculto. 19 Considerando que a cavidade oral contém uma paisagem variada, que serve à razão que as bactérias presentes em todo o ambiente bucal são vastas e variadas de acordo com as superfícies em que residem.

a cavidade oral contém tanto derramamento e não-derramamento superfícies iguais. A dentição representa uma superfície de não desprendimento significativo sobre a qual tanto supragengival e subgengival placa pode ser encontrada, e estas consistem em diversas bactérias, dependendo do local. 21,22 Vertendo a superfícies mucosas, tal como a língua e da mucosa bucal, representam um nicho diversificada em que uma população variada pode ser derivada. Mesmo amostras de saliva foram sugeridos para representar um instantâneo das populações bacterianas encontradas na boca, com populações variando em saúde e na doença, inclusive em cárie dentária 23 e periodontite. 24

Certamente, interrupções das populações de bactérias encontradas em toda a cavidade oral foram demonstradas em particular condições orais com os diferentes coortes de entre aqueles num estado saudável, e aqueles em doenças orais particulares. Com relação à cárie dentária, uma preponderância das populações bacterianas do Streptococcus, Lactobacillus, Propionibacterium, Actinomyces
e Veillonella
gêneros têm sido demonstrado em maior abundância relativa na placa de adultos exibindo cárie ativa em comparação com aqueles sem cárie. 22, 25

Etiologicamente, a doença periodontal é multifatorial (Fig. 2), e é bem aceito que a proliferação de bactérias Gram negativos específicos, microrganismos anaeróbios nos bolsos subgengivais contribuir para a doença . progressão incluindo Socransky & rsquo; s Keystone patógenos complexo vermelho: Porphyromonas gingivalis
, Treponema denticola
, e Tannerella forsythia
, anteriormente Bacteriodes forsythus
26 recentemente, no entanto, a pesquisa também mostrou (através do emprego de métodos de sequenciação de profundidade) que não só bolsos subgengivais abrigar esses patógenos periodontais propostas, mas ambos chapa dorso supragingival e língua contêm Socransky & rsquo; s patógenos periodontais conhecidos, bem como potencialmente novos biomarcadores bacterianas associadas com periodontite crônica (CP). Essas áreas podem proporcionar locais de amostragem alternativos para investigação de agentes patogénicos potenciais associados com CP. 27

endodonticamente, biofilmes multi-espécies têm sido implicados na iniciação e progressão de condições periapicais. 28

a partir de um ponto de vista mau odor oral, estudos têm sugerido que o dorso da língua de indivíduos com halitose frequentemente abrigar bactérias que são capazes de quebrar os produtos de proteína, resultando na produção de ácidos gordos de ofensa e subprodutos de enxofre, conhecido como volátil compostos de enxofre. 29,30

de maneira nenhuma, porém, é esta pretende ser uma revisão exaustiva da literatura como as implicações dos consórcios bacterianos em condições bucais foi revisto em outro lugar. 31

é importante ter em conta que não é suficiente simplesmente indicar que a presença de um agente patogénico percebida é a causa de uma condição de doença, mas em vez disso, a abundância relativa de determinados agentes patogénicos associados a doenças e a natureza multifactorial destas condições deve também ser tomado em conta (Fig. 2).

Figura 2. natureza multifatorial das condições de saúde bucal. Etiologia das condições de saúde bucal envolve uma relação tripartida entre fatores do hospedeiro intrínsecas, fatores ambientais extrínseca e do consórcio microbiano oral.


Os dados fornecidos através de uma avaliação dos consórcios microbianos associados à doença, embora não seja causal, levou os cientistas a especular sobre o potencial de utilização de bactérias terapeuticamente, incluindo os probióticos em odontologia como um complemento para um & rsquo;. s arsenal clínico
probióticos em DENTISTRYProbiotics conforme definido pela FAO /OMS (Organização para a Alimentação e Agricultura e Organização Mundial da Saúde ) são "microrganismos vivos que, quando administrados em quantidades adequadas conferem um benefício à saúde do hospedeiro" (2001). Em outras palavras, estes são bactérias específicas que são intencionalmente colocados em formulações que variam a partir de cápsulas secas por congelação, para sprays, loções tópicas e produtos lácteos, a fim de proporcionar o hospedeiro com um benefício mensurável. Critérios que concedem estado probiótico incluem mas não estão limitados ao fato de que as bactérias utilizadas são "geralmente reconhecido como seguro", em parte devido ao facto de que eles podem ser derivados de um hospedeiro humano saudável. Além disso, eles devem ser vivo no momento da administração, mas pode morrer dentro do hospedeiro e seja o micróbio, ou seus componentes, deve induzir uma resposta no local de acção. 32 Assim, os probióticos termo refere-se os micróbios -se que são adicionados aos produtos comerciais.

prebióticos, por outro lado, são fermentados selectivamente ingredientes que promovem alterações específicas na composição, e /ou actividade da microbiota gastrointestinal que conferem benefícios para o hospedeiro. 33 prebióticos pode ser comparado ao "alimento" para micróbios benéficos na forma de hidratos de carbono não digeríveis. Quando consumido, prebióticos proporcionar uma vantagem selectiva para os micróbios potencialmente benéficos indígenas ao hospedeiro para sobreviver e /ou crescer.

simbióticos representam produtos que contêm uma combinação de probióticos e prebióticos 34 e, como resultado, não apenas fornecer os micróbios supostamente benéficos para o anfitrião, mas fornecendo os micróbios seu "alimento" também ajudá-los a sobreviver e prosperar in vivo
.

do ponto de vista económico, a partir de 2010, o negócio probiótico foi mostrado para representar uma indústria multi-bilionária com um aumento previsto no mercado global projetado para atingir mais de 30 bilhões de dólares em 2015. 35

Dada a grande variedade de produtos disponíveis no o mercado, peneirar a literatura pode ser difícil. No entanto, do ponto de vista de saúde oral, embora vários probióticos foram testados do ponto de vista da investigação, ainda muito poucos têm sido comercializadas com a finalidade de tratamento dentário.

De uma perspectiva cariogénico, os estudos focaram-se na utilização de probióticos de ambos os géneros Lactobacillus e Bifidobacteria. Isso inclui Lactobacillus paracasei ssp. paracasei, Lactobacillus rhamnosus
36 Comprar e Lactobacillus reuteri
37
ao lado de espécies de bifidobactérias
. 38 estas bactérias foram coletivamente demonstrada para afetar a colonização do potencial cariogênico patógeno S. mutans
. Um dos probióticos não tradicionalmente procurados, Weissella cibaria
foi demonstrado ser eficaz não só na redução do desenvolvimento de cárie, através da prevenção da formação de biofilmes de cariogénicos S. mutans
, 39 mas também tem sido demonstrado que afetam Fusobacterium nucleatum
colonização, um patógeno microbiano implicado em ambos os periodontite e halitose oral. 40

Além disso, em diz respeito a periodontite, L. reuteri
ATCC 55730 contendo goma de mascar 41 e Lactobacillus brevis
42 têm demonstrado diminuir os níveis de fluido gengival de citocinas e das metaloproteinases da matriz na saliva, respectivamente. Estas substâncias têm sido mostrados para serem actores-chave na biologia da doença periodontal. Do ponto de vista inibitório patógeno periodontal, lactobacilos foram novamente demonstrado ter um efeito inibidor sobre o crescimento de bactérias periopathogenic conhecidos, incluindo P. gingivalis
, Prevotella intermedia
e Aggregatibacter actinomycetemcomitans
. 43 Mesmo no caso da gengivite, Krasse P. et al. demonstrou o benefício de utilizar L. reuteri
formulações em diminuir escores de placa e gengivite em indivíduos que apresentam moderada a variedades graves da doença. 44

Um resumo dos probióticos dentários propostas podem ser encontrados na Tabela 1. Mais uma vez, o estudos citados não são de forma comentários exaustivos e mais aprofundados sobre potenciais probióticos para condições dentárias podem ser encontrados em outros lugares. 45-47

Com relação aos probióticos comercializados no campo da odontologia não é um general falta de produtos comercializados especificamente para a saúde dental. Dois dos produtos mais reconhecidos na área dos cuidados de saúde oral incluem SUNSTAR & rsquo; s losango, GUM & reg; PerioBalance & reg; (Fig. 3) e Oragenics EvoraPlus & reg; pastilha contendo ProBiora3 & reg; (Fig. 4). ProBiora3 & reg; também é facilmente disponível como um aditivo para as empresas interessadas, permitindo a incorporação deste cocktail probiótico patenteada em diversos tipos diferentes de veículos de entrega incluindo colutórios, pastilhas elásticas, pastilhas e comprimidos dissolvem-rápido

L & FIGURA 3. touro.; L & bull; M & reg; PerioBalance & reg; por SUNSTAR. Cada pastilha contém o probiótico L. reuteri Prodentis

Figura 4. EvoraPlus & reg.; por Oragenics. Cada comprimido contém ProBiora3 & trade ;, um cocktail probiótico de oralis Streptococcus
KJ3 & reg ;, Streptococcus uberis
KJ2 & reg ;, e Streptococcus rattus
JH145 & reg ;.

GUM & reg; PerioBalance & reg; Tem sido sugerido para promover gengivas saudáveis, reduzindo a formação de placa e gengivite, quando usado em conjunto com uma boa higiene oral. O probiótico activa contida no produto é L. reuteri Prodentis
. É geralmente recomendado que uma pastilha ser usada depois de escovar, fio dental e a utilização de lavagens da boca e deve ser dissolvido na boca durante um período de 10 minutos. O produto deve ser consumida por um período de 14 a 28 dias; em conjunto com uma boa higiene oral, a fim ter efeitos apreciáveis ​​ 48

O EvoraPlus & reg.; comprimido contém ProBiora3 & reg ;, um coquetel de Streptococcus oralis
KJ3 & comércio ;, Streptococcus uberis
KJ2 & trade ;, e Streptococcus rattus
JH145 & trade ;. Este produto tem sido sugerido para promover o hálito fresco e dentes mais brancos, e proteger a saúde dos dentes e gengivas entre as visitas odontológicas. 49 Mais especificamente, a empresa propõe através da produção de peróxido de hidrogênio ambos S. oralis
KJ3 & trade; e S. uberis
KJ2 & trade; inibir o crescimento de agentes patogénicos potenciais periodontais. In vitro
, eles têm sido mostrados para diminuir as manchas nos discos de cerâmica, um efeito atribuído ao seu potencial de produção de peróxido de hidrogénio. Como assim, Streptococcus rattus
JH145 & trade; diminui S. mutans
níveis de inibição competitiva; ou seja, ocupando o mesmo nicho e prevenir S. mutans
colonização sem ser cariogênico em si. 49

Apesar de a investigação em curso no campo dos probióticos no campo da odontologia, existem várias coisas que um profissional de saúde prudente deve deliberar quando se discute ou considerando o uso de probióticos para os seus pacientes, incluindo a compreensão de como eles são regulados.
pROBIÓTICO REGULATIONSFirstly, deve-se considerar as diretrizes US Food and Drug Administration ao contemplar o uso de probióticos. Esta autoridade reguladora, que supervisiona produtos probióticos em os EUA, atualmente regula probióticos, que são vendidos over-the-counter, como suplementos dietéticos e agentes não farmacológicos. Assim, eles não são submetidos aos mesmos controlos rigorosos e inspeções que as empresas farmacêuticas devem aderir, probióticos tornando assim mais frouxa do ponto de vista regulamentar. 50 A única exceção às normas menos estritas é se a empresa fabricante do produto probiótico tem a intenção de usar seu produto de acordo com benefícios paralelas às de agentes farmacêuticos. 50

Health Canada forneceu pouca assistência no que diz respeito à regulamentação probiótico e desde 2009, tem permitido um número limitado de reivindicações ou declarações sobre a natureza inerente de microorganismos probióticos. Estas alegações predominantemente envolvem sugerindo que os probióticos quer formar uma parte, ou contribuir para, flora intestinal saudável. 51 Colectivamente, estes resultados implicam que, devido à falta de uma regulamentação estrita de funcionários, deve-se questionar a dose, o conteúdo e estirpes em um determinado produto probiótico; a falta de regulamentação pode resultar em estes níveis estar abaixo da média e, de fato, não contém o que é sugerido na embalagem ou nas quantidades necessárias para provocar uma resposta do hospedeiro.

Além disso, apesar do número de resultados positivos mostrado na os estudos clínicos acima mencionados, há outros que têm demonstrado efeitos limitados com os mesmos probióticos sobre os parâmetros clínicos tais como os medidos em condições periodontais 52 e sua natureza anti-cariogênico proposto. 53 Da mesma forma, os estudos sobre probióticos e por via oral saúde examinando a duração do tratamento, resposta à dose, tempo de curso de ação e o melhor veículo de entrega probiótico (incluindo gomas, iogurtes, comprimidos ou enxaguatórios bucais) são escassos. Mesmo as bactérias propostos que são sugeridos para ajudar a aliviar condições dentárias, tais como aqueles de Lactobacillus e Bifidobacteria géneros, necessitam de ser examinadas como eles são acidogênica na natureza. Como resultado, eles mesmos, pode mediar mudanças prejudiciais na cavidade oral. 54 Da mesma forma, as afiliações de custos, análise de risco-benefício, a duração do efeito, e mecanismos de ação Faltam também do ponto de vista de pesquisa na arena probiótico.

em última análise, embora existam resultados preliminares promissores sobre os benefícios de probióticos na área da saúde oral, deve-se não ser excesso de zelo na recomendação de probióticos, como é necessária mais investigação para determinar a eficácia clínica.
CONCLUSIONSAll em todos, apesar do potencial de probióticos para ser um benefício no campo da odontologia, o campo ainda está muito em sua infância e até à data, não oferece uma panaceia para os problemas de saúde bucal. O dentista prudente deve, no entanto, considerar melhorar o seu conhecimento neste campo como a investigação está em curso com resultados promissores. Tendo em conta que as populações de pacientes estão consumindo mais e mais probióticos (como evidenciado pelo aumento do multi-bilionária oral, a indústria de probiótico) e que os pacientes podem procurar o conselho de seus profissionais de medicina dentária quanto ao uso de probióticos para a saúde oral, discussões probióticos são um necessário adenda ao 21 educação odontológica do século XXI.

Considerando que vivemos em uma época onde a terapia fecal de bactérias foi aceito pelos pacientes, não parece exagero para o público a considerar probióticos para a sua via oral saúde, já que é parte do tracto digestivo. O que é mais, tendo em vista um aumento na resistência aos antibióticos, (e os antibióticos são uma modalidade de tratamento que os dentistas usar extensivamente), os pacientes podem eleger para consumir probióticos em conjunto com antibióticos prescritos. Por conseguinte, o ónus permanece sobre o profissional de saúde para proporcionar a orientação adequada, tal como para o uso de probióticos, a fim de facilitar a melhor saúde oral e os resultados gerais de saúde. OH

Natasha Singh Hons. BSc, MSc, DDS Candidato 2016; é um terceiro ano estudante DDS na Faculdade de Odontologia da Universidade de Toronto. Ela já havia concluído um mestrado especializado em Molecular e Microbiologia do Departamento de Ciências da Nutrição, da Universidade de Toronto, St. George, e atualmente permanece ativo no campo da Dental Research. Natasha pode ser contactado em [email protected]

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